血清肌酸激酶测定标准操作规程

1、玉环县人民医院检验科文件编号：JYK-3-SH-032版本/修订号：C/0主题内容生化室作业指导书生效日期：20110701第1页共6页血清肌酸激酶测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清肌酸激酶（缩写CK）测定，各种体液肌酸激酶测定；组合项目申请：血生化中心肌酶谱项目测定。临床医生根据需要提出检验申请。2标本采集与处理2.1 标本采集2.1.1 常规静脉采血约 2 ml ,不抗凝，置普通试管中。或采用含分离胶的真空采血管。检查体液乳酸脱氢酶的体液标本应用肝素抗凝。2.1.2 检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。2.1.3 急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。2

2、.1.4 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。2.1.5 下列标本为不合格标本2.1.5.1 标本量不足：少于 0.3ml的全血标本，或少于 0.1ml的血清或血浆。2.1.5.2 对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。2.1.5.3 无法确认标本与申请单对应关系的。2.1.5.4 其他如标识涂改、标本试管破裂等。2.2 标本保存2.2.1 接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。2.2.2 标本保存时间：室温（1525C）下可稳定4h,普通冰箱中（28C）稳定12h。-20 C保存稳定30天。为避免标本

3、中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过 1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。编写制定日期审核审核日期：核准执行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林华2011-07-01玉环县人民医院检验科文件编号：JYK-3-SH-032版本/修订号：C/0主题内容生化室作业指导书生效日期：20110701第2页共6页2.2.3 已完成测试的标本保持完整的识别号，置48c冰箱内保存7天。2.3 标本采集的注意事项2.3.1 采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动，24h不饮7W和12h以上禁食空腹状态。2.3.2 注意有无应用影响测试项目的药物。2.3.3 可以使用肝素抗凝的血液标本。3

4、方法原理通过下面的3个反应式表示反应，在两个工具酶的参与下，将 CK的活性与NADPhfc成的量或速率 相联系，在340nm波长处连续监测 NADP瞰光度的增加速率，推算出CK的活性。磷酸肌酸+ADP-CKT肌酸+ATPATP +葡萄糖一生t葡萄糖-6 -磷酸+ADP葡萄糖-6 -磷酸+NADP-G6理t 6 -磷酸葡萄糖酸+NADPH4试剂及其他用品4.1 试剂：肌酸激酶测定试剂盒，由北京利德曼生化技术有限公司出品。4.2 试剂盒保存：未开瓶的试剂储存在 28c可稳定至有效期。 试剂开瓶后，在仪器冰箱试剂仓中可 保存28天。开盖后避免污染。当试剂变混浊，或者未开盖的液体有沉淀，或起始吸光率&

5、gt;0.8时，表明试剂已变质，不能继续使用。4.3 试剂盒准备：液态双试剂型，即开即用，无特殊准备。4.4 试剂盒主要成分：R1:R2=4:1组 成混合后溶液的浓度咪陛缓冲液：100mmol/L PH=6.7编写制定日期审核审核日期：核准执行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林华2011-07-01玉环县人民医院检验科文件编号：JYK-3-SH-032版本/修订号：C/0主题内容生化室作业指导书生效日期：20110701第3页共6页N- 乙酰半胱氨酸（NAC20mmol/LEDTA2mmol/LNADP2mmol/L葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PDH）>15

6、00U/L己糖激酶（HK>>2500U/L葡萄糖20mmol/L肌酸磷酸30mmol/L二腺昔-5-磷酸10umol/LADP2mmol/L5校准品与校准模式校准品：不使用校准品，以 NADP的双波长（340/380nm）摩尔吸光系数计算 C中性6质控品与室内质控规则6.1 质控品采用由Beckman-Coulter公司提供的两个不同水平未定值质控血清。6.2 质控液重建方法：液态质控血清，即开即用，无需特殊准备。6.3 质控品测定：在每一批标本中测定两个水平质控血清各一次。6.4 质控规则：采用 Westgard多规则质控规则，由计算机程序进行检索与判断。7适用仪器适用AEROS

7、E和C16000全自动生化分析仪器全自动生化分析仪器。8标本检测步骤装载试剂一进行校准一进行质控一输入标本检测项目一加载标本一标本测定一结果复核一报告。编写制定日期审核审核日期：核准执行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林华2011-07-01玉环县人民医院检验科文件编号：JYK-3-SH-032版本/修订号：C/0主题内容生化室作业指导书生效日期：20110701第4页共6页9.主要分析参数参见说明书。10结果计算计算公式：CK(U/L) = AA/xK = AA(34060)nm/ 匕V-/min/min vsx1mwm10公式中A A/min即单位时间中吸光度降低

8、的值，Vt为总反应体积ml (试剂总量+标本量)，Vs为标本体积ml, l为比色皿光径cm, e为NADP的340/380nm测定的毫摩尔消光系数。仪器根据此公式自动给出 每个标本测定结果。11检验结果的报告及范围11.1 结果的报告11.1.1 结果经审核后，确认准确无误后发出报告。11.1.2 报告单上标明结果的计量单位、参考区间、报告日期、时间、操作者和审核者签名，并有与申请单相同的医学信息。11.1.3 如收到标本的质量可能对测定结果有影响的也在报告单上指出。11.2 报告范围：01200 U/L ,超过此范围的结果报告时必须附有证明该结果准确可靠的文字说明，例如：系根据标本稀释后重复

9、测定的结果。12操作性能12.1 精密度：CV<0.52%,批间 CV<3.21%12.2 方法的有限性及干扰因素：内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响12.3 灵敏度：肌酸磷酸激酶浓度为：500U/L时，吸光度变化率 Ann/min为0.1300.15812.4 线性范围：51200 U/L。编写制定日期审核审核日期：核准执行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林华2011-07-01玉环县人民医院检验科文件编号：JYK-3-SH-032版本/修订号：C/0主题内容生化

10、室作业指导书生效日期：20110701第5页共6页13参考范围及医学决定水平0190U/L14临床意义14.1 肌酸激酶广泛分布于骨胳肌、心肌、脑组织中，肝和红细胞不含此酶。CK是诊断急性心肌梗死（AMI）的酶学指标之一，但总CK的意义不及CK-MB现在更受重视的 AMI的实验室诊断指标是心肌肌钙蛋白。14.2 CK也是反映神经肌肉损伤的敏感指标。各种肌营养不良均有血清CK活性增高，脑血管病及脑膜炎、脑炎、急性精神病患者血清CK活性也可升高。15结果审核以及分析与相关项目的联系15.1 由资深专业人员负责检验结果的审核。15.2 认真审核每一个测定结果，审核者对发出报告结果的准确性和可靠性负责，并在报告单的审核者处签名。15.3 相关项目：审核与心肌酶谱其他酶的关系。如出现与临床不符甚至相悖的情况，应分析与查找原因。16无威胁生命的“紧急值”及报告规定17有关引用程序与文件17.1 Abbott自动生化分析仪仪器标准操作规程。17.2 生化检验室内质控标准操作程序。17.3 检验结果审核程序。17.4 标本送检和接收程序。18参考文献18.1 陆永绥，张伟民主编.临床检验管理与技术规程.杭州：浙江大学出版社，2004.18.2 北京利德曼生化股份有限公司肌酸激酶测定试剂盒说明书。编写制定日期审核审核日期：