小鼠骨髓染色体的快速制备_第1页
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文档简介

1、v目的要求v实验原理v实验用品v方法与步骤v实验报告 掌握小鼠骨髓细胞染色体的制备方法，识别小鼠染色体的数目及特点。v骨髓细胞具有高度的分裂活性，经秋水仙素或秋水酰胺处理后，使分裂细胞阻断在有丝分裂中期，再经低渗处理、固定、滴片、染色等步骤，可制作较好的骨髓细胞的染色体标本。1器材：解剖器具、注射器、离心机、离心管、恒温水浴箱、载玻片、酒精灯等；2试剂 0.1%秋水仙素溶液、Carnoys固定液（甲醇：冰醋酸3：1）、0.075 mol / L KCI溶液、Giemsa染液等。 3材料：小鼠方法与步骤v取材前34 h，向腹腔内注射秋水仙素。注射浓度随动物种类不同而异。秋水仙素的主要作用是使分裂

2、细胞阻断在有丝分裂中期，增加中期分裂相的比例。 腹腔内注射秋水仙素34小时后，断头处死小鼠。取出小鼠的后肢骨，注意不要将股骨剪断，否则容易造成骨髓细胞的流失。滴加适量生理盐水进行冲洗，并仔细地将皮肤、肌肉等组织清除干净。加入适量低渗液，用剪刀将骨充分剪碎，并用吸管吹打，使骨髓细胞全部释放出来。用滤网将获得的液体过滤到离心管中，加低渗液至8ml左右，室温下静置2030分钟，进行低渗。低渗结束后，加入1ml左右的Carnoys固定液进行预固定，轻轻混匀后，离心。1200转/分，离心5分钟，弃上清，加入固定液，混匀后，室温放置30分钟，再次离心去上清，重复固定一次，离心后，向沉淀中加入1ml预冷的固定液，将细胞重悬。预冷的玻片预冷的玻片v绘图表示动物

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