沙棘和银杏黄酮对沙棘油的抗氧化研究

1、沙棘和银杏黄酮对沙棘油的抗氧化研究张鞍灵，高锦明，李秀信，乔丽婷摘要：以相同添加量(0.02%)的槲皮素、沙棘黄酮、银杏黄酮、BHT对沙棘油进行了抗氧化研究。结果表明，槲皮素、沙棘黄酮、银杏黄酮都可作沙棘油的抗氧化剂。关键词：黄酮；抗氧化；沙棘油；沙棘；银杏The Antioxidation Effect of the Flavanoids fromHippophae and Ginkgo Biloba on Hippophae OilZHANG An-ling，GAO Jin-ming， Li Xiu-xin，QIAO Li-ting(Northwest College of Forestr

2、y ,Yangling,Shaanxi,712100)Abstract:The antioxygenic activity of quercetin,Hippophae flavonoid,Ginkgo flavonoid,and BHT on Hippophae oil was compared at given concentrations of 0.02%,it has been shown that the antioxidant efficiency of these four antioxyizers increases in the order hippophae flavono

3、idginkgo flavonoidBHTquercetin.It is suggested that BHT be substituted for hippophae flavonoid or ginkgo flavonoid as an antioxidant for hippophae oil.Key words:Flavonoids;Antioxidant;Hippophae oil;Hippophae rhamnoides;Ginkgo biloba目前，沙棘油年产量达百余吨。然而，沙棘油中含大量不饱和脂肪酸1，在储存过程中易于自动氧化劣变，失去营养和保健作用，且产生对人体健康有害的

4、过氧化物2，同时，还缩短了货架寿命。因此，沙棘油的保存技术则是沙棘开发利用必须解决的课题。现今广泛使用的油脂抗氧化剂不外乎是人工合成的BHA、BHT等，但它们能损害人体的酶系统3。自然界广泛存在的黄酮类化合物应是价廉易得首选的天然抗氧化剂，具有酚类抗氧化的通性及显著的生物活性。有关槲皮素对油脂的抗氧化研究已有报道4，但关于银杏和沙棘黄酮作为油脂抗氧化剂尚未见报道。本文首次报道槲皮素、沙棘黄酮及银杏黄酮对沙棘油的抗氧化试验研究，以期为沙棘油的储存提供科学依据。1材料与方法1.1原料与试剂沙棘油(甘肃秦安县沙棘厂)，沙棘皮渣(陕西永寿县沙棘厂)，银杏叶(采自西北林学院校内)，槲皮素(中国预防医学科

5、学院劳卫所)为化学纯，BHT(上海试剂站分装厂)为化学纯。所用试剂均为分析纯。1.2试样的制备1.2.1沙棘黄酮的提取：沙棘干皮渣正己烷脱脂65%乙醇回流4.5 h真空浓缩蒸馏水稀释至一定体积过滤上聚酰胺柱95%乙醇洗脱真空浓缩真空干燥沙棘黄酮。按文献5测得其含量为20.6%。1.2.2银杏叶黄酮的提取：银杏干叶粉碎8倍体积的蒸馏水回流5 h过滤上聚酰胺柱95%乙醇洗脱真空浓缩真空干燥银杏叶黄酮。按文献5测得其含量为30.8%。1.3油样配制准确将一定量0.01 g槲皮素、银杏黄酮、沙棘黄酮、BHT溶解于无水乙醇和乙酸乙酯的混合溶剂，分别加到50 g沙棘油中，搅拌均匀。将试样移至棕色瓶中，并留

6、有13左右空间，用玻塞塞住瓶口，分别置于5冰箱、室温、40±2及60±2恒温箱中保存，定期取样测定。每个样品处理重复3次，结果取平均值。1.4沙棘油过氧化值(POV)的测定准确称取2 g3 g沙棘油样于250 ml碘值瓶中，加入23的氯仿与冰乙酸混合液30 ml及1 ml饱和碘化钾溶液，加塞，摇匀，置暗处放3 min后加入50 ml蒸馏水，以0.5%淀粉1 ml作指示剂，用标准的0.02 mol/L Na2S2O3溶液滴定至蓝色消失为止，同时做空白试验，最后计算POV，其公式为：式中：V1试样消耗的Na2S2O3液量(ml)V2空白消耗的Na2S2O3液量(ml)MNa2S

7、2O3液浓度(mol/L)W油样重(kg)2结果与分析2.1沙棘油的自动氧化将不外加任何抗氧剂的沙棘油分别置于5(冰箱)、室温下贮存。其变化情况如表1所示。表1沙棘油在5及室温下存放的变化情况时间(d)5(冰箱)室温酸值(mgKOH/g)POV(meq/kg)酸值(mgKOH/g)POV(meq/kg)01.210.961.210.961802.303.744.637.963604.767.918.1015.7 从表1可看出，沙棘油酸值和POV在低温5及室温下，随贮存时间延长而缓慢递增，但室温下增幅要明显大于低温下的。这说明沙棘油在这二个温度下都会慢慢自动氧化，只不过室温下的自动氧化速度比5下

8、的快。2.2槲皮素、沙棘黄酮、银杏黄酮及BHT对沙棘油抗氧化效果的比较以添加相同量(0.01 g/50 g沙棘油)的槲皮素、沙棘黄酮、银杏黄酮、BHT分别在40±2和60±2下对沙棘油进行抗氧化试验，其结果见附图、。图：60图：40附图沙棘油POV值随时间变化曲线由附图、可知，添加4种抗氧剂的沙棘油POV，随加热时间延长而呈平稳上升之势，但60时POV要明显大于40时；添加抗氧化剂的沙棘油40时POV与空白相比无显著差异，而60时POV却有极显著差异。这表明沙棘油自动氧化(POV)对温度和抗氧化剂均较敏感。从附图、还可看出，4种抗氧化剂都能明显地延缓沙棘油的自动氧化过程，在

9、二个温度下，其抗氧化能力顺序均为槲皮素BHT银杏黄酮沙棘黄酮。从总的趋势来看，槲皮素抗氧化效能明显优于人工合成的BHT，而银杏黄酮、沙棘黄酮、BHT抗氧化效果彼此相近。因此，槲皮素、沙棘黄酮、银杏黄酮都适合于作沙棘油保存时的天然抗氧化剂，进而替代BHT。3讨论黄酮类化合物与其酚羟基的数目和含量等相关。所以相同条件下，槲皮素抗氧化作用要比BHT强，这与文献报道的一致4。银杏黄酮、沙棘黄酮主要由槲皮素、异鼠李素构成，其黄酮含量分别为30.8%和20.6%，则前者抗氧化效果略高于后者，但两者抗氧化性与BHT相近，这可能与其他抗氧化成分增效协调有关，有待进一步研究。从安全性看，以LD50计，槲皮素15

10、 g/kg,沙棘黄酮40 g/kg60 g/kg，银杏黄酮17 g/kg19 g/kg，BHT1.7 g/kg1.9 g/kg，其毒性大小顺序为BHT槲皮素银杏黄酮沙棘黄酮。综合考虑抗氧化效果及安全性，银杏和沙棘黄酮是人工合成的抗氧化剂BHT的理想天然代用品，更适于作沙棘油的安全有效的抗氧剂。沙棘油中含大量不饱和脂肪酸(RH)，由于其邻近双键碳上的CH键键能很小，易于在空气中具双自由基(.OO.)的三线态氧(3O2)作用下发生均裂，经过氧化自由基生成脂质过氧化物(ROOH)，继而诱发自由基连锁反应，导致沙棘油自动氧化2。同时，过渡金属(如铁、铜)离子存在会对油脂自动氧化产生催化作用。从油脂氧化

11、机理来看，只要选择供氢能力大于RH的酚类抗氧剂(AH)，则会阻止或减少R.或ROO.产生，从而抑制其自动氧化。笔者认为，黄酮类化合物的抗氧性与提供多个活泼氢和络合金属离子有关。一方面，黄酮类化合物可通过形成共振稳定的具有醌式结构的自由基以及通过更稳定的分子内氢键，使新形式的自由基中间体更加稳定，从而取代了作供氢体的油脂分子，终止了沙棘油自动氧化的连锁反应；另一方面，因这些黄酮是富电子的良好配体，可通过络合降低残存于沙棘油中金属离子含量，从而减少或阻止沙棘油自动氧化中的引发作用。相比之下，BHT只能作供氢剂，而不能作络合剂，这为黄酮抗氧化又提供了佐证。本实验结果进一步证实了槲皮素、沙棘和银杏黄酮抗氧性与自由基清除作用相关6。我国拥有丰富的沙棘和银杏资源，从中提取价廉易得的总黄酮用于高效、无毒、安全天然抗氧剂，不失为一种可取之途径。作者简介：女，35岁，讲师作者单位：西北林学院，712100陕西杨凌；参考文献1张付舜，高锦明，郭玉孝.从沙棘油生产和医用研究现状看医学应用发展前景.国际沙棘学术交流会论文集.第1版，西安：武功农业科研中心，1989：2432492翁新楚.脂类的空气氧化.中国粮油学报，1993，(3)：22283王洪新，汤逢.食用天然抗氧化剂的研究及其应用.无锡轻工业学院学报，1988，7(4)：43464陈尚猛，陈健，陈明全等.槲皮素在油脂中抗氧化效果研究.中国