丹参提取物F在再灌注损伤中对胃粘膜抗氧化能力影响

1、    丹参提取物F在再灌注损伤中对胃粘膜抗氧化能力影响        摘要目的：探讨丹参提取物F的胃粘膜保护作用与氧自由基的关系。方法：复制失血性休克-再灌注损伤模型，31只大鼠随机分为单纯失血组（HE，n9），生理盐水对照组（NS，n10）及丹参提取物F组（DSEF，n12）；HE组大鼠在失血性休克20min后处死，NS及DSEF组则在休克20min后回输全部放出的血液，维持20min后处死。其中NS组静滴NS 0.03mlmin，DSEF组静滴DSEF1g100gwt。

2、结果：HE组损伤指数为0，DSEF组损伤指数明显低于NS组（P0.01），DSEF组的丙二醛（MDA）含量明显低于NS组（P0.01），而超氧化物歧化酶（SOD）活性明显高于NS组（P0.01）。结论：DSEF在再灌注损伤中可减轻氧自由基对胃粘膜的损伤。关键词再灌注胃粘膜氧自由基 Effect of Dan Shen Extract F(DSEF) on Anti-Oxidation of Gastric Mucosa during Reperfusion InjuryZhang Lihong, Kong Juan, Yao Changbai, et alDepartment of Anest

3、hesiology, The Second Affiliated Hospital, China Medical University, ShenyangObjective: To examine the protective effects of DSEF on gastric mucosa and the relation with oxygen free radicals (OFR). Methods: 31 Wistar rats were randomly divided into group HE, NS and DSEF. The rats in group HE were ki

4、lled after hemorrhagic shock for 20 minutes. The rats in group NS and DSEF suffering from hemorrhagic shock for 20 minutes were killed after reperfusion for 20 minutes. During whole procedures, the intravenous infusion of normal saline at 0.03 ml/min was given in group NS. DSEF (1g/100g) was infused

5、 in group DSEF. Results: The indexes of gastric mucosal lesions (IGMLs) were 0, 23.18% and 4.42% respectively in group HE, NS and DSEF. As compared with 230.56±19.37 nmol/g in group NS, the content of MDA in group DSEF (94.32±11.32 nmol/gw.t) decreased significantly （P0.01）. In comparsion

6、with 134.29±13.35 u/g in group NS, the activity of SOD in group DSEF (298.47±20.12 u/g) increased markedly （P0.01）. Conclusion: DSEF can effectively relieve gastric mucosal injury caused by OFR during reperfusion.Key wordsReperfusionGastric mucosaOxygen free radicals所谓再灌注损伤，是指在一定条件下缺血缺氧的组织

7、、器官在得到血液再灌注后常常发生的功能减退或结构损伤，在胃则表现为胃粘膜损伤。人们对此已进行了大量研究，但至今仍未找到有效的抗胃粘膜再灌注损伤的药物。本研究试应用丹参提取物F（DSEF）观察其抗氧化能力，探讨胃粘膜再灌注损伤的机制及DSEF的保护作用。1材料与方法1.1试剂DSEF由中国医科大学化学检测中心提供。1.2动物模型及分组以Itoh法复制大鼠失血性休克-再灌注损伤模型1，选用Wistar系雄性大鼠31只，体重260300g，实验前禁食24h，腹腔注20乌拉坦（5mg100gwt），麻醉后气管插管(保持气道通畅)，颈动脉插管(监测平均动脉压)，股动脉插管(放血及血液回输)，开腹洗胃，结

8、扎幽门，尾静脉穿刺以0.03mlmin滴注液体(NS或DSEF)，25min后胃内灌注0.1molL HCl（1ml100gwt），5min后放血，至MAP达2.644.0kPa，大鼠呈失血性休克状态，维持20min后处死，形成单纯失血组（HE组，n9），余22鼠在维持失血性休克20min后，将放出的血液全部经股动脉回输，20min后处死，即形成再灌注损伤模型1。其中10鼠静滴生理盐水（NS组），12鼠静滴注DSEF1g100gwt（DSEF组），HE组大鼠处死前也静滴NS。1.3观察指标及测定方法1.3.1损伤指数胃粘膜损伤，表现为片状或条索状大面积的出血性损伤，其指数为损伤面积除以各自胃粘

9、膜总面积的百分数2。1.3.2粘膜MDA、SOD测定随机选取胃粘膜标本，每组各6个。匀浆后采用Asakawa法3测定MDA含量，采用邻苯三酚自氧化法4测定SOD活性。1.4实验数据用平均值±标准差表示，各组间数据用t检验和相关性检验。2结果2.1各组大鼠平均失血量为19.822.3mlkg，血压在失血前为13.6114.99kPa，休克期为3.293.67kPa，血液回输后为14.4316.04kPa。失血量及平均动脉压组间、组内均无显著差异（P0.05），说明失血性休克的复苏是成功的，DSEF对失血性休克再灌注损伤的影响与心血管功能的恢复无关（表1）。表1各组大鼠失血量及平均动脉压

10、（±s）组别只数失血量（mlkg）平均动脉压（kPa）失血前失血期再灌注后HE921.7±0.814.99±0.553.67±0.15NS1019.8±1.014.37±0.333.39±0.0914.43±0.47DSEF1222.3±1.813.61±0.543.29±0.0716.04±0.562.2胃粘膜损伤指数，HE组为0，DSEF组为4.42±1.39，明显低于NS组的23.18±6.82（P0.01）。2.3NS组MDA含量明显高于HE组（P

11、0.01），而SOD活性明显低于HE组（P0.01）；DSEF组MDA含量明显低于NS组（P0.01），而SOD活性明显高于NS组（P0.01）（表2）。 表2各组大鼠胃粘膜SOD、MDA含量（±s）组别只数SOD（g湿重）MDA（nmolg湿重）HE6315.76±24.35121.78±14.65NS6134.29±13.35230.56±19.37DSEF6298.47±20.12*94.32±11.32*与HE组比P0.01与NS组比*P0.012.4DSEF组损伤指数降低与组织MDA含量的降低呈正相关（r0.935

12、，P0.01），与SOD的增加呈负相关（r0.894，P0.01）。3讨论有关胃粘膜再灌注损伤的机制及防治报道较少，本实验所示的胃粘膜失血性休克再灌注损伤模型的胃粘膜损伤情况与报道相一致5，而在单纯失血性休克20min后处死大鼠中并未见胃粘膜有出血性损伤。说明这种胃粘膜损伤是在失血性休克后血压复升，胃粘膜得到血液再灌注后形成的。近年来Itoh和Guth1报道，OFR在再灌注损伤中起重要作用，他引起生物膜的脂质过氧化造成细胞膜损伤。MDA是OFR脂质过氧化的代谢产物，常作为OFR间接监测指标，SOD为超氧阴离子清除剂，可反映体内自由基清除系统的能力。在正常情况下，OFR生成后即被及时清除，只有当

13、OFR的生成增加或清除能力降低时才会导致组织损伤。本实验观察到，失血性休克再灌注后胃粘膜MDA含量明显增加，SOD活性明显降低。大量OFR的生成，除引起胃粘膜广泛的脂质过氧化外，还可引起细胞内钙超载，导致组织不可逆性的损伤6，在胃则发生胃粘膜出血性损伤。丹参为常用活血化瘀中药，其药理作用十分广泛，DSEF为丹参水溶液提取物，具有增加胃粘膜表层微循环的血流量，降低其毛细血管通透性，减轻血管损伤的作用7。本组在以前实验中发现DSEF还具有增加胃粘膜PGE2、PGI2含量和抑制细胞内钙超载的作用8，9。本实验观察到，静滴DSEF后胃粘膜仅偶见点状出血性损伤，同时胃粘膜MDA含量明显降低，SOD活性明

14、显增强。SOD的增加可加速OFR的清除，保护细胞不受OFR的损伤，MDA生成因而减少；而OFR的减少又促进更多的活细胞产生更多的SOD，清除更多OFR进而形成良性循环，起到保护胃粘膜的作用。作者单位：张丽红孔娟崔健君张秉钧(中国医科大学第二临床学院麻醉科，沈阳市 110003）姚常柏(辽宁省人民医院普外科)参考文献1Itoh M, Guth PH. Role of oxgen dericed free radicals in hemorrhagic shock-induced gastric lesions in the rat. Gastroenterol, 1985,88:1162.2It

15、oh M, Paulsen G, Guth PH. Hemorrhagic shock and acid gastric injury in rat. Gastroenterol, 1986,90:1103.3Asakawa T.Thiobarbituric acid test for detecting lipid peroxides. Lipids, 1979,14:401.4袁勤生邻苯三酚自氧化法测定超氧化物歧化酶的活性医药工业，1983，1：165Smith SM, Grisham MB, Manci EA, et al. Gastric mucosal injury in the rat. Gastroenterol, 1987,92:950.6冯新为主编病理生理学，