水中菌落总数测定

1、动物检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定 能力目标：能力目标： 掌握生活饮用水菌落总数的测定方法掌握生活饮用水菌落总数的测定方法 掌握水源水菌落总数的测定方法掌握水源水菌落总数的测定方法 判定水被细菌污染的程度和水的卫生质量判定水被细菌污染的程度和水的卫生质量动物检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定水中菌落总数的测定 检验依据：GB/T5750.12-2006 方法：平皿计数法动物检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定实验内容实验内容1 1培养基制备培养基制备2 2水样稀释与接种水样稀释与接种3 3结果分析与报告结果分析与报告动物

2、检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定实验器材实验器材 水样1、4号号自来水自来水2、5号号水源水（养殖场）水源水（养殖场）3、6号号桶装水桶装水 培养基 营养琼脂培养基营养琼脂培养基动物检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定实验器材实验器材 设备、器材 无菌工作台、无菌工作台、酒精灯酒精灯、灭菌灭菌吸管吸管、灭菌试管灭菌试管、稀释液稀释液、灭菌平皿灭菌平皿、恒温、恒温培养箱培养箱、高高压蒸汽灭菌器、菌落计数器、压蒸汽灭菌器、菌落计数器、天平、电炉等天平、电炉等动物检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定实验操作实验操作 生活饮用水 用

3、灭菌吸管吸取用灭菌吸管吸取1mL充分混匀的水样，注入灭菌平皿中充分混匀的水样，注入灭菌平皿中 水源水 吸取吸取1ml充分混匀的水样，注入盛有充分混匀的水样，注入盛有9ml灭菌生理盐水的灭菌生理盐水的试管中，混匀制成试管中，混匀制成1 : 10稀释液稀释液 吸取吸取1 : 10的稀释液的稀释液1ml注入盛有注入盛有9mL灭菌生理盐水的试灭菌生理盐水的试管中，混匀制成管中，混匀制成1 ：100稀释液稀释液动物检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定 按同法依次稀释成按同法依次稀释成1: 1000 , 1: 10000稀释液等备用稀释液等备用 根据对水样污染情况的估计，选择根据对水

4、样污染情况的估计，选择3 3个个适宜稀释度适宜稀释度, ,分别作分别作1010倍递增稀释的同时，倍递增稀释的同时，即以吸取该稀释度即以吸取该稀释度的吸管移的吸管移1mL1mL稀释液于灭菌平皿中稀释液于灭菌平皿中动物检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定 每递增稀释一次，必须更换一支1mL灭菌吸管 每个稀释度制作2个平皿 同时做空白试验动物检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定 倾注营养琼脂培养基 温度：温度：4646左右左右 用量：用量：15mL20mL15mL20mL 培养 温度：温度：3636士士11 时间：时间：4848士士2h2h水样与培养基水样

5、与培养基混匀后混匀后动物检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定4848小时后小时后动物检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定菌落计数及报告方法 记下各平板的菌落数后，求出同一稀释度两个平板的平均菌落数 选择平均菌落数在30300之间者进行计算动物检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定不同稀释度的选择及报告方法 只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则将该菌只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则将该菌落数乘以稀释倍数报告落数乘以稀释倍数报告（见表中实例（见表中实例1 1）实实例例不同稀释液的平均菌落数不同稀释液的平均菌落数菌落总数

6、菌落总数（CFU/mLCFU/mL）报告方式报告方式 （CFU/mLCFU/mL）1010-1-11010-2-21010-3-31 113651365164164202016 40016 40016 00016 000动物检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定 若有两个稀释度，其生长的菌落数均在若有两个稀释度，其生长的菌落数均在3030030300之间，则视之间，则视二者之比值来决定二者之比值来决定（见表中实例（见表中实例2 2、3 3、4 4）实实例例不同稀释液的平均菌落数不同稀释液的平均菌落数两个稀释两个稀释度菌落数度菌落数之比之比菌落总数菌落总数（CFU/mLCFU

7、/mL）报告方式报告方式 （CFU/mLCFU/mL）1010-1-11010-2-21010-3-32 22760276029529566661.61.6377503775038 00038 0003 32890289027127160602.22.2271002710027 00027 0004 4 150 150 30308 8 2 2 1500 1500 1500 1500不同稀释度的选择及报告方法动物检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定 只若所有稀释度的平均菌落数均大于只若所有稀释度的平均菌落数均大于300300，则应按稀释度，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀

8、释倍数报告之最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表中实例（见表中实例5 5）实实例例不同稀释液的平均菌落数不同稀释液的平均菌落数菌落总数菌落总数（CFU/mLCFU/mL）报告方式报告方式 （CFU/mLCFU/mL）1010-1-11010-2-21010-3-35 5多不可计多不可计16501650513513513000513000510 000510 000不同稀释度的选择及报告方法动物检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定 只有若所有稀释度的平均菌落数均小于只有若所有稀释度的平均菌落数均小于3030，则应按稀释，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之度最

9、低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表中实例（见表中实例6 6）实实例例不同稀释液的平均菌落数不同稀释液的平均菌落数菌落总数菌落总数（CFU/mLCFU/mL）报告方式报告方式 （CFU/mLCFU/mL）1010-1-11010-2-21010-3-36 62727 11 115 5270270270270不同稀释度的选择及报告方法动物检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定 若所有稀释度的平均菌落数均不在若所有稀释度的平均菌落数均不在3030030300之间，则应以之间，则应以最接近最接近3030或或300300的平均菌落数乘以稀释倍数报告之的平均菌落数乘以稀释倍数报告之

10、（见表（见表中实例中实例7 7）实实例例不同稀释液的平均菌落数不同稀释液的平均菌落数菌落总数菌落总数（CFU/mLCFU/mL）报告方式报告方式 （CFU/mLCFU/mL）1010-1-11010-2-21010-3-37 7多不可计多不可计3053051212305003050031 00031 000不同稀释度的选择及报告方法动物检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定 若所有稀释度的平板上均无菌落生长，则以未检出报告之 不要用“多不可计”报告不同稀释度的选择及报告方法动物检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定 菌落数在菌落数在100100以内时以内

11、时 按实有数字，以整数报告按实有数字，以整数报告 菌落数大于菌落数大于100100时时 第第3 3位数位数“四舍五入四舍五入”，取前，取前2 2位数字，后面用位数字，后面用0 0代替代替 也可用也可用1010的指数来表示的指数来表示 见表中见表中“报告报告方式方式”栏栏不同稀释度的选择及报告方法动物检疫检验技术专业教学资源库水中菌落总数测定水中菌落总数测定实例实例不同稀释液的平均菌落数不同稀释液的平均菌落数两个稀释度菌落两个稀释度菌落数之比数之比菌落总数菌落总数（CFU/mLCFU/mL）报告方式报告方式 （CFU/mLCFU/mL）1010-1-11010-2-21010-3-31 1136513651641642020-16 40016 40016 00016 000或或1.61.610104 42 22760276029529566661.61.6377503775038 00038 000或或3.83.810104 43 32890289027127160602.22.2271002710027 00027 000或或2.72.710104 44 4 150 150 30308 8 2 2 1500 150