环氧乙烷灭菌再确认报告

1、；常州市益寿医疗器材有限公司报告文本环氧乙烷灭菌再确认报告文件编号： YWY/CE-MC-2015版本号 /修改状态： A/0编制：日期：审核：日期：批准：日期： .；目录序号文件编号名称11.0总则22.0重新验证方案33.0重新验证实施44.0验证结论5附件 12014 年灭菌批记录抽样记录6附件 2产品初始污染菌检测记录7附件 3环氧乙烷灭菌剂产品检验报告8附件 4环氧乙烷灭菌用生物指示剂检测报告9附件 5传感器、菌片、负载装载图10附件 6产品灭菌前、灭菌后的检测报告11附件 7环氧乙烷残留量方法与对比分析报告 .；第一章总则1. 1 目的根据 ENIS011135-1 标准医疗器材的

2、灭菌环氧乙烷灭菌的验证及日常控制的要求：对环氧乙烷灭菌器及其灭菌工艺重新验证应至少每年一次的规定， 进行重新确认，以保证满足本公司一次性医疗器材灭菌的要求。1. 2 范围本重新验证适用于本公司出厂编号为 080625 HMG-A-10M3的灭菌器及其相应的范围工艺；本重新验证的产品及其包装为： （A）纸塑包装的产品：一次性使用无菌导尿管、一次性使用胃管、一次性使用喂食管、一次性使用脐带夹、一次性使用吸痰管 ； （B）全塑 PE袋包装的产品：一次性使用体外引流袋、一次性使用婴儿肛袋 。1. 3 重新验证1. 3. 1 重新验证方案：由生产技术部制定，并经管理者代表确认后方可实施。1. 3. 2

3、重新验证实施：公司内部相关职能部门的人员组成验证小组并负责按重新验证方案组织实施。1. 3. 3 重新验证结论：由验证小组对再确认的过程和所取得的数据进行确认，并同YEY/CE-MC-2011报告中相关数据及结论进行比对，形成重新验证结论并会签。1. 3. 4 重新验证资料：所有有关重新验证的资料所取得的数据、表单和再验证报告应由生产技术部妥善保管、存档。第二章重新验证方案重新验证由以下部分组成：2. 1 灭菌器运行一年后的评估：通过有效的评估证实灭菌器运行后对安装精度无影响。2. 2 灭菌器运行一年来的灭菌操作评估：通过评估证实灭菌器能在设定范围内进行有效的运行。2. 3 灭菌器性能的重新确

4、认：包括物理性能确认和微生物性能确认。2. 3.1 物理性能重新验证：2. 3. 1. 1真空速率实验：（当温度恒定时）要求：预真空至 -15Kpa 的时间 6min预真空至 -50Kpa 的时间 30min2.3.1.2真空泄漏实验：（当温度恒定，保压时间为60min）要求：预真空 -50 Kpa泄漏速率 0.1 Kpa /min2.3.1.3正压泄漏实验：（当温度恒定，保压时间为60min）要求：正压 50 Kpa泄漏速率 0.1 Kpa /min2. 3. 1. 4加湿实验：（当温度恒定，真空 -25 50 Kpa）要求：温度明显变化并在 3080%RH范围内 .；2. 3. 1. 5灭

5、菌室空载箱壁温度均匀性实验：要求：控制温度 52±3，最大温差± 3条件：压力 常压15 点温度传感器分布见附图2. 3. 1. 6灭菌室空载空间温度均匀性实验：要求：控制温度 52±3，最大温差± 3并确定冷点位置条件：压力 常压15 点温度传感器分布见附图2. 3. 1. 7满载温度均匀性实验：要求：控制温度 52±3，最大温差± 10条件：压力 常压负载 81 箱，负载分布件附图2. 3. 2 微生物性能重新验证（半周期法）采用回顾性的验证：即采用原验证工艺的方法中灭菌时间为一半（240min）时，将灭菌生物指示剂 （枯草杆菌的

6、黑色芽孢变种 Atcc9372 ）在灭菌环境下进行培养， 检测有无微生物生长，有判定灭菌工艺的有效性，该试验重复两次。条件：（1）灭菌工艺灭菌温度 52±3预处理时间 180±20min 温度 52± 3，湿度 4080%RH保温时间 100min预真空 -20 -30Kpa保压时间 10min温度 4080%RH加药量 6.67Kg/10M3 .；灭菌时间 480min（重新确认试验时间）换气真空度 0 -5 Kpa换气次数 至少 5 次通风时间 2040 分钟解析时间 14 天（ 14 天后测 EO残留量）（ 2）灭菌生物指示片菌种：枯草杆菌的黑色芽孢变种（

7、Atcc9372 ）数量： 31 片（其中 1 片用于阳性对照）位置：见附图，菌片量与产品相同的小包装内（ 3）负载负载 81 箱（负载分布见附图）注：本公司所生产的一次性使用无菌医疗器材的包装目前分为两类：a)纸塑成型袋（ 65±5g 透折纸 /0.055mm的 PE复合膜）b) 全塑 PE袋（单层的厚度为 0.05mm）灭菌重新验证时采用负载为纸塑成型袋的第三章重新验证实施3. 1 验证小组经管理者代表批准，验证小组内以下成员组成：组长：成员：3. 2 验证实施前的准备3. 2. 1 灭菌器的评估3. 2. 1. 1 本公司灭菌器在 2014 年共计进行 62 次灭菌，每次使用前

8、均由操作工按照操作规程进行维护性检查，各管道、阀门及密封件安全可靠、无泄漏。3. 2. 1. 2 质检部按规定请法定计量部门对灭菌器的仪器、仪表进行校检：压力表、温湿度计、磅秤精度完好，符合使用要求。3. 2. 1. 3电器装置接地可靠。3. 2. 1. 4 电脑操作系统工作正常，记录装置能够正常工作，打印记录表单清晰、完整。3. 2. 2 灭菌器运行评估：随机抽取批号为（ E20140307 、 E20140411、 E20140619 ）等的灭菌批记录，其记录的参数均在灭菌工艺参数范围内。同时各批次的生物指示片经检测均无菌生长，灭菌器运行过程正常、有效。 （见附件 1共 6 页） .3.2

9、.3.1；随机抽取灭菌批记录与验证灭菌工艺比较表批次验证灭菌项目工艺预热（min）保温1（min）预真空-20 -30（Kpa）保压时间（min）10湿度4085（%RH）加药量6.67（ Kg）灭菌时间480（min）灭菌温度52± 3（）换气真空度0-5（ Pa）换气次数5（次）换气时间2040（min）解析时间14（天）3. 3. 3 产品、包装及其它初始污染菌E20140307E20140411E201406190-18.6 -26.8-18.5-25.1-18.2-23.010101065.4 70.858.463.458.665.36.687.07.04804804805

10、1.6 54.251.254.351.453.3555222222141414三组产品从净化车间移出至进入灭菌器进行灭菌的最长滞留时间均不超过10 小时，并由质监部门提供初始污染菌的化验报告。 （见初始污染菌检测报告） （附件 2共 3页）3.2.3.2产品三组产品（胃管、导尿管、喂食管 ）应在灭菌前按各自标准的要求检测相关的物理、化学性能，并提供报告（见三个产品灭菌前的检测报告）与灭菌后的物理、化学性能的报告（见三个产品灭菌后的检测报告）进行对比。 （见附件 3）3.2.3.3包装包装材料由于供方没有改变产品包装的材料及包装工艺均未发生改变，同时热合封口的工艺也没有变化。 .；3. 2. 3

11、. 4 环氧乙烷环氧乙烷供应商没有改变，环氧乙烷出厂的检测报告符合标准的规范。（见附件 4共 1 页）3. 2. 3. 5环氧乙烷灭菌生物指示剂灭菌生物指示剂的供应商没有改变，其生物指示剂的菌种为枯草芽孢杆菌黑色变种（ 9372）。芽孢含量为 2.5 ×106fu/ 片，供方的检测报告证实菌片符合ENISO11138-1.2：2006 的要求。（见附件 5共 1 页）3. 2. 3. 6加湿用水加湿用水本公司采用去离子水（纯化水）见检测报告保证使其才成为微生物资源。3. 3 再验证实施再验证的实施由验证小组按验证方案进行，并做记录。对再验证所取得的数据进行分析、处理，并与（ YWY-

12、CE-MC-2014）进行比对后，形成再验证报告、存档。第四章验证结论根据 ISO11135-1： 2007 标准的要求，验证小组对本公司 10M3环氧乙烷灭菌器及灭菌工艺按第二章所述的验证方案进行再验证。现将再验证结果汇总如下：4. 1 灭菌器评估根据“ 3. 2. 1. 1 ”、“ 3. 2. 1. 2 ”、“3. 2. 1. 3 ”、“3. 2. 1. 4 ”可以确认灭菌器系统完整，保持原安装精度。4. 2 灭菌器运行评估根据“ 3. 2. 2：可以确认灭菌器运行过程正常有效，同时验证小组分别对灭菌器电器控制系统、灭菌器计算系统、灭菌器辅助设备分别进行检查，其结果见表1、表 2、表 3.

13、灭菌器电器控制系统检查记录（表1）项目包括标准准确性功能准确性备注开关是否是否按键是否是否传感器是否是否仪表是否是否动力器具是否是否加热器件是否是否加湿器件是否是否安全属地是否是否验证人：记录人： .；灭菌器计算系统检查记录（表2）项目名称启动运行备注主机正常运行 30min 正常显示器正常运行 30min 正常UPS电源正常2 次当切断外接电源后能持续供电打印机及其连接正常3 次正常打印控制机箱正常30min 能保证与计算机的正常通讯和采样验证人：记录人：灭菌器辅助设备运行检查记录（表3）辅助设备运行时间噪音其他异常记录真空泵10min正常无空压机10min正常无水循吸泵20min正常加热系

14、统30min正常气化泵20min正常磅秤正常验证人：记录人：4. 3 灭菌器物理性能再确认根据“ 4. 1 ”、“ 4. 2 ”的结果证实灭菌器的安装，运行的正常可以进入物理性能再确认。根据第二章再验证方案，物理性能再确认包括真空速率实验、负压泄漏实验、正压泄漏实验、加湿实验、箱壁温度均匀性试验、空载温度均匀性实验和负载温度均匀性实验，实验结果标明。（见表 4、表 5、表 6、表 7、表 8、表 9、表 10）4. 3. 1 本套设备现真空度达到 -15Kpa、-50Kpa 的时间分别为 3min 和 16min，符合说明书中规定的小于等于 6min 和 30min 的真空速率要求。4. 3.

15、 2本套设备负压泄漏实验是在-50Kpa 条件下，保压 60min 时间内，灭菌器内压力变化最大值为0.3Kpa ，其真空泄漏速率为0.005Kpa/min ，符合负压泄漏速率0.1Kpa/min 的要求。4. 3. 3本套设备正压泄漏实验定在+50Kpa条件下，保压 60min 时间内，灭菌器压力变化最大值为 1.2Kpa，其正压泄漏速率为0.02 Kpa/min，符合正压泄漏速率 0.1Kpa/min 。 .；4. 3. 4 设备加湿系统实验在一定的真空条件下进行，经过加湿系统的作用，无菌器内的湿度产生明显变化，从灭菌器下的初始湿度问 47.2%RH，经过 15min 后， 4 个湿度传感

16、器分为为 78.2 、78.4 、77.8 、78.2 ，平均分值为 78.15%RH，其结果证实灭菌器的加湿系统是有效的。4. 3. 5 温度均匀性实验根据 ISO011135标准，在进行湿度均匀性实验时，采用均匀分布的15 个温度探测器（传感器）测量灭菌器内箱壁、空间和负载内部的温度分布，实验结果表明：a) 箱壁温度均匀性实验：当控制温度在50.5 时，灭菌器内15 个温度传感器记录的最高温度为50.2 ，最低温度为 48.5 ，温差为 1.7 ，符合最大温差± 3的要求。b)空载时无菌器空间温度均匀性实验：当控制温度为50.3 ，灭菌器内 15 个传感器记录的最高温度为 50.

17、4 ，最低温度为 48.2 ，温差为 2.2 ，符合最大温差 ± 3的要求。c) 负载温度均匀性实验：当控制温度为 49.6 ，灭菌器内 15 个传感器记录的最高温度为 50.1 ，最低温度为 49.8 ，温差为 0.3 ，符合最大温差 10的要求。灭菌器真空速率实验记录（表4）达到真空标准允许年份度所用时真空度开始时间结束时间值（ min） 结论间（ min）-15Kpa8:32:408:35:403 6合格2015-15Kpa8:32:408:51:401630合格-15Kpa13:32:3513:35:353 6合格2014-50Kpa13:32:3513:46:341430合

18、格验证人：记录人：注： 2015 与 2014 年比较灭菌器真空速率在标准值范围内。灭菌器负压泄漏实验记录（表5）保压保压压力泄漏速负压保压开始开始保压结束结束变化年率结Kpa时间压力时间压力值份Kpa/min论KpaKpaKpa2015-509:30:40-50.610:30:38-50.30.3-0.005合格2014-5013:47:35-50.914:47:34-50.6-0.3-0.005合格验证人：记录人：注： 2015 与 2014 年比较灭菌器负压泄漏速率相同均在标准值范围内。 .；灭菌器正压泄漏实验记录（表6）保压保压压力泄漏速负压保压开始开始保压结束结束变化年率结Kpa时间

19、压力时间压力值份Kpa/min论KpaKpaKpa20155011:32:3550.712:32:4049.51.20.02合格20145015:37:4250.916:37:4349.81.10.018合格验证人：记录：注：从两年情况比较灭菌器正压泄漏速率20152014，但均在标准值范围内（提示半年后应作灭菌器泄漏实验，如泄漏速率增加应更换柜门密封条）。灭菌器加湿系统实验记录（表7）年加湿开始时开始加湿加湿结束均衡时间最终湿度结份间度（ %RH）时间（ min）（ %RH）论20159:40:5047.29:55:521578.2 、78.4 、77.8 、合格78.2201411:38:

20、1449.611:52:121478.7合格验证人：记录人：注：两年情况比较灭菌器加湿系统运行正常，最终均能达到从30%RH加温至 80%RH的要求。 .；灭菌器箱壁温度均匀性实验记录（表8）温度升温升温开始时达到设定传感开始个点的温度温度的时间器时间（）编号219：10：20.430.111：11：245：47：20.430.128：56：30233022320.430.1420.430.1520.430.1620.430.1720.430.1820.430.1920.430.11020.430.11120.430.11220.430.11320.430.11420.430.11520.43

21、0.1验证人：达到设定温度时各点的温度（）48.248.350.150.048.448.348.348.350.050.050.050.050.050.050.050.050.050.050.050.048.448.350.050.050.050.048.648.749.249.4记录人：温度偏差（）2014控制温度控制温度TO=50.0TO=50.1最高温度最高温度TH=50.1TH=50.0最低温度最低温度TL =48.2TL =48.3上偏差上偏差=TH-T O=TH-T O=50.1-50=50-50.1=0.1=-0.1下偏差下偏差=TO- T L=TO- T L=50-48.2=5

22、0.1-48.3=1.8=1.8 =1.9 =1.9 .；灭菌器空间的温度均匀性实验记录（表9）温度升温升温开始时传感开始个点的温度器时间（）编号2123.327.4224.528.3323.327.4423.327.4524.228.1624.228.1714：24.228.109：802：08：24.228.19404228.324.41024.428.31123.026.21223.2271323.1271422.826.31522.726.3验证人：达到设定温度的时间15：10：14：18：3841达到设定温温度偏差度时各点的（）温度（）201449.849.650.350.2控制温度

23、控制温度O 50.5O 50.2T =T =49.849.6最高温度最高温度T =T =49.849.6H 50.3H 50.3最低温度最低温度50.149.9TL =49.8TL =49.650.149.9上偏差上偏差50.149.9=TH-T O=TH-T O50.149.9=50.3-50.5=50.3-50.250.350.2-0.20.1=50.350.2下偏差下偏差50.350.2=TO- T L=TO- T L50.450.3=50.5-49.8=50.2-49.60.70.6=50.450.3 0.9 0.7=50.350.250.049.7记录人： .；灭菌器负载温度均匀性实

24、验记录（表10）温度升温升温开始时传感开始个点的温度器时间（）编号2123.528.2223.228.1323.228.0423.228.0523.328.2623.328.2712：23.328.213：830：22：23.328.29154528.123.21023.228.01123.228.01223.228.01323.328.01423.428.11523.328.2达到设定温度的时间07：08：21：32：2544达到设定温温度偏差度时各点的（）温度（）201450.250.150.050.1控制温度控制温度O 50.2O 49.2T =T =50.150.1最高温度最高温度T

25、=T =50.150.1H 50.3H 50.1最低温度最低温度50.150.1TL =50.0TL =50.150.250.1最大温差最大温差50.250.1=TH- T L=TH-T O50.250.1=50.3-50.0=50.1-50.150.250.10.30=50.150.150.250.150.350.150.250.150.150.150.250.1验证人：记录人：从 a) 、b) 、c) 三个实验结果可以看出本灭菌器的温度均匀性是符合ENISO11135-2007标准中相对应的要求。结论根据“ 4.3.1 ”、“4.3.2 ”、“4.3.3 ”、“ 4.3.4 ”、“ 4.3

26、.5 ”得到的结果可以认定本灭菌器的物理性能符合 ISO11135-2007 标准的规定，可以进入下一过程灭菌器微生物性能在确认。4. 4 灭菌器微生物性能在确认4. 4. 1 微生物性能在确认前准备工作的记录 .；4. 4. 1. 1产品初始污染菌的检测生产批号初始污染菌检测报告cfu/ 件产品名称备注2014 年2014 年胃管42符合要求导尿管78符合要求喂食管40符合要求经检测三类产品的初始污染菌数量均在标准要求范围内。4. 4. 1. 2环氧乙烷灭菌生物指示剂项目抵抗性参数年日菌种芽孢含量D值生存时间灭活时间2015ATCC93722.5× 106cfu/片3.0分13.2

27、分31.2分2014ATCC93722.56片3.0分13.1分31.0分× 10 cfu/从上表环氧乙烷灭菌生物指示剂符合GB18281-1.2：2000、ENISO11138-1.2：2006 的要求。4. 4. 1. 3环氧乙烷灭菌剂抽取批号为 20150309030 与 20140508030 相比较。仅仅纯度有微小的差误，批号为 20140508 的纯度为 99.30%，而批号为 20150216 的纯度为 99.30%。结论：环氧乙烷灭菌剂符合要求。4. 4. 1. 4 负载装载方式和生物指示物布点位置（见附件 6）。负载装载方式和生物指示物布点位置见下图与 2011 年

28、度灭菌时负载装载方式和生物指示物布点位置完全相同。4. 4. 2 灭菌微生物性能确认按照再确认方案微生物性能确认采用回顾性验证。其灭菌工艺：灭菌温度 52±3预处理时间 180±20min保温时间 100min预真空 -20 -30Kpa保压时间 10min灭菌温度 （ 60%± 20%）RH加药量 6.67Kg/10M3 .；灭菌时间 480min换气真空度 0-5 Kpa换气次数 至少 5次通风时间 3040 分钟解析时间 14 天由于这次再验证采用回顾性验证， 直接采用半周期法灭菌时间为 240min。将前后两次为 240min 的灭菌时间的灭菌生物指示片在

29、灭菌环境下进行培养 14 天，其结果如下：灭菌作用时间接受测试样品数培养后菌生长样品数备注240min1515240min151514 天中 15 个样品无菌生长14 天中 15 个样品无菌生长而前后两次的阳性对照试验均有菌生长4. 5 灭菌后环氧乙烷残留量的检测根据 ENISO11135和 ENISO10993-7的相关规定，本公司对灭菌后产品环氧乙烷残留量的检测作如下的试验。4. 5. 1 环氧乙烷残留量测量方法当对比（见环氧乙烷残留量检测方法当对比报告） ，证实本公司采用比色分析法能有效的检测出产品灭菌解析后的环氧乙烷残留量同采用气相色谱法测定产品灭菌后的环氧乙烷残留量，结果相近。（见附

30、件 7）综合上述：经过对本套 10M3环氧乙烷灭菌器及其灭菌工艺再确认的过程符合 ENISO11135 标准的规定。 .；再确认有效的灭菌工艺：灭菌温度 52±3预处理时间 180±60min（在灭菌器内进行）保温时间 100min预真空 -20 -30Kpa保压时间 10min温度 （ 40%±85%）RH加药量 6.67Kg灭菌时间 480min换气真空度 0-5 Kpa换气次数 5 次解析时间 14 天 .；常州市益寿医疗器材有限公司灭菌效果检验原始记录YWY-8.2.3-034检验编号检验名称生物指示剂检验目的抽检检验进货批号灭菌日期检品数量31检验日期检验项目无菌完成日期检验依据中国药典 2010 年版无菌检查法培养基：营养肉汤培养基批号：阳性对照：未经灭菌的生物指示剂沉降菌检查：平均cfu/每皿（应 1 cfu/每皿）检查法：直接接种法营养肉汤培养基毫升/管培养基用量：营养肉汤培养基毫升/管（需、厌氧菌 35，真菌 25）检查结果