盐酸恩诺沙星制备及结构确证

1、1999, 33(2 :2931 姚凤云等中国兽药杂志29斑点均比012m g m l 的对照液主斑点浅, 由于供试液所用样品为未精制的粗品, 故应选用供试液杂质斑点深于对照液主斑点的量为供试液点样量, 因此, 确定供试液的量为25m g 点样10l 。m l 、4实验结果实验结果表明, 二甲苯胺噻唑原料, 供试品溶液所显主斑点集中, 无拖尾现象, 无杂质斑点产生; 且对照液所显斑点的最低浓度为012m g m l , 与表1结果一致。通过上述试验, 有关物质检查具体方法为:取本品加无水乙醇制成每1m l 含25m g 的溶液, 作为供试品溶液, 精密量取供试液适量, 加无水乙醇稀释成每1m

2、l 含012m g 的溶(中国兽药液, 作为对照液, 照薄层色谱法典90版一部附录20页 试验, 吸取上述两种溶液各10l , 分别点于同一硅胶GF 254薄层板上, 以正己烷2无水乙醚2甲醇2氨水(6 3 014 0104 为展开剂, 展开后晾干, 置紫外灯(254nm 下检视。供试品溶液如显杂质斑点, 其荧光强度与对照溶液的主斑点比较, 不得更深。参考文献:1中华人民共和国农业部1兽药质量标准(第一册 S ,1996, 521取850603、850604、8506093批二甲苯胺噻唑原料, 加无水乙醇制成每1m l 含25m g 的溶液为供试液; 再取一定量加无水乙醇稀释成不同的浓度作为对

3、照液, 点样10l , 结果见表3。表33批样品检测结果样品供试品溶液3对照品溶液浓度(m g m l 2551015012011005主斑点+杂质斑点-微显-3850603, 850604, 8506093批结果一致。盐酸恩诺沙星制备及结构确证姚凤云1, 王付华2, 王树槐3(11辽宁省药物研究院, 沈阳110015; 21郑州兽药厂, 郑州450045; 31中国兽药监察所, 北京100081 收稿日期1998202209文献标识码B 文章编号100221280(1999 20220029203恩诺沙星(En rofloxacin 是德国拜尔公司率先开发的氟喹诺酮类兽医专用抗菌药,-其抗菌

4、谱广、抗菌活性强, 对G +、G 菌均有很强的抗菌活性。具有低毒、高效、体内组织分布广, 对各种畜禽致病菌和支原体均有强大的杀灭作用。口服吸收快, 组织穿透力强, 该药已成为畜禽抗感染的主导药物。恩诺沙星的水溶性小使用不便, 但恩诺沙星属二性化合物, 可与酸或碱作用形成酸式盐和碱式盐从而增加水溶性。依据恩诺沙星的化学性质, 研制了盐酸恩诺沙星并进行了化学结构分析。1盐酸盐的制备111粗制将恩诺沙星溶于1 20倍的水中加热至90, 加盐酸作用30m in , 调pH 34, 热滤除杂质。用盐酸调至pH 1, 冷却析出结晶, 离心得恩诺沙星盐酸盐。112精制取盐酸恩诺沙星粗品溶于适量蒸馏水中, 加

5、4%活性炭脱色后过滤, 自然结晶后, 于80干燥10h , 得盐酸恩诺沙星纯品。113理化特性精品为白色粉末, 易溶于热水, 微溶于甲醇、丙酮。302化学结构确证中国兽药杂志1999, 33(2 :2931 姚凤云等CH 2的C 2H 的伸缩振动和弯曲振动, 2691为211元素分析使用Carlo 2E rba 1106元素分析仪, 用燃烧法测C 、H 、N 元素。21111测试结果见表1。表1盐酸恩诺沙星元素分析结果元素C H N铵盐的特征吸收, 1723为COO H 的C =O 伸缩振动, 1287为氟代苯中的C 2F 的特征吸收峰, 890的吸收证明有孤立氢存在。从图谱分析可知结构中含有

6、F 2p h 、CH 2、COO H 、R 3N H 、p h =O 等基团与盐酸恩诺沙星的结构一致。213核磁共振采用B ruker 2公司D PX 2400超导核磁共振仪进行测定。D 2O 作溶剂,理论值55. 146. 0910. 15测定值1测定值2测定值354. 635. 8910. 2155. 235. 9010. 3455. 375. 7310. 31平均值55. 085. 8410. 29分析结果表明测定值与理论值相同, 证明样品中所含C 、H 、N 元素的组成与分子式中的元素组成相同。212红外吸收光谱(I R 用PE 2FT I 730红外光谱仪和KB r 片法测定。212

7、11测试结果见表2, 图1。表2盐酸恩诺沙星红外吸收测定结果吸收频率(c m 3504344229752691172316281496145613411287890氢谱(1H 2NM R 测定以水4176作内标; 碳谱(13C 2NM R 测定以1, 42二氧六环6710作内标, 结果见表3、表4。表31H 2NM R 测定数据化学位移(ppm 81287122形状单峰双重峰(J =6. 8H Z 质子数111221652归属H 23H 26H 29H 211H 212H 217H 213, H 214, H 215H 218, H 216219振动类型V O 2H V O 2H V C 2H

8、 V N 2H V C=O基团COOH COOH峰强度强强中中强强强强中强中71033180316331493125-31201131-11181101双重峰(J =12. 8H Z 2CH 22R 3N H C =O (COOH C =C (与羰基共轭phC=CV C=C多重峰多重峰宽单峰多重峰多重峰宽单峰C 2H C 2NV C 2F2CH 22A r N HR 3F 2ph 2表413C 2NM R 测定数据(ppm 归属(ppm 归属(ppm 归属176. 1C 1119. 0C251. 3C 15169. 0C 20111. 2C946. 9C 11, C 12148. 5144.

9、6C 3C 7139. 3C 552. 7C13, C147. 8C 18, C 19C 2H注:ph 为苯环 。106. 9106. 1C636. 5C 17C108. 9C 16214质谱采用岛津Q P 25000质谱仪。其测定条件为E I 源电子能量:70eV ; 离子源温度:320。解析样品分子中离子峰m e 359, 与盐酸恩诺沙星的碱基部分C 19H 22O 3FN 3相符,图1样品红外吸收图谱+m e 344为M 脱去CH 3后的碎片, m e 315为+M 脱羧后的碎片。21212数据分析3504和3442为羧基上的O 2H 的伸缩振动, 2975和1456分别为脂肪族3结构分

10、析及确认1999, 33(2 :3132 刘同民等中国兽药杂志31311质谱图中的分子离子峰m e 359与恩诺沙星C 19H 22O 3FN 3相符, 元素分析进一步证明了分子式C 19H 22O 3FN 3 HC l H 2O 的正确性。312质谱图中的分子离子峰m e 315脱羧碎片, 红外图谱中的1723吸收以及13C 2NM R 中的169证明了COO H 的存在。313红外图谱中的2691以及元素分析的结果证明了该化合物为胺盐。3141H 2NM R 谱中的7122(J =618H Z 和7103(J =1218H Z 处的双重峰表明了氟的存在和位置, 红外1287处的吸收亦证明了

11、分子中C 2F 键的存在。3151H 2NM R 谱中的1130处的三重峰和3124处的四重峰, 质谱m e 344, m e 300, m e 287等碎片离子峰均证明了乙基的存在。3161H 2NM R 谱中的1101, 1129, 3149和13C 2NM R 谱中7187(CH 2 , 3615(CH 和13C 2NM R 得到了证实。4讨论依据恩诺沙星的二性性质合成了盐酸恩诺沙星, 经红外、质谱、核磁和元素分析确证了其化学结构为含有一个结晶水的盐酸盐。经稳定性实验证实用盐酸恩诺沙星制备的可溶性粉, 除随放置时间的延长外观色泽由类白色逐渐变为类黄色外, 其内在化学性质没有发生变化。体外

12、M I C 测试结果表明盐酸恩诺沙星的体外抑菌效果与恩诺沙星一致, 即成酸式盐后没有对恩诺沙星的抑菌效果产生影响。参考文献:1南京药学院主编1分析化学M 1人民卫生出版社,197812奚念朱主编1药剂学M 1人民卫生出版社, 199713杜念兴主编1兽医微生物实验指导M 1农业出版社,197914戴自英1临床抗菌药物学M 1人民卫生出版社,1985, 6221证明了环丙胺的存在, 质谱中的m e 80,m e 70, m e 300, m e 387, m e 244碎片离子峰证明了分子中哌嗪环的存在, 并在1H 2NM R碘醚柳胺含量测定方法的改进刘同民, 权仁子(吉林省兽药饲料监察所, 长春130062收稿日期1998207213文献标识码B 文章编号100221280(1999 20220031202碘醚柳胺(R afoxan ide 为抗蠕虫药物, 主要用于治疗牛、羊肝片吸虫病。英国兽药(1985年版 、(第一册 1典兽药质量标准均收载此药。其含量测定方法均为在中性溶剂“二氧六环”溶解条件下, 用氢氧化钠滴定液(011m o l 按这两种标准测定含L 滴定。量, 发现测得结果过高(10510%10610% 。为了使测定的结果符合实际, 笔者用“丙酮”代替“二氧