应用绘制标准曲线及计算样本浓度

1、应用EXCEL绘制ELISA标准曲线及计算样本浓度整体思路：在ELISA实验结束后，我们得到的是经酶标仪读出的标准品以及样本 的0D值。其中，标准品的浓度，我们可以利用标准品的0D值及其相对应的 浓度，以ODfi为横坐标，浓度为纵坐标，做一条标准曲线，并用公式表示出来。 这样，我们把样本的0D值以X值代入，便可求出丫值，即样本浓度。下面我们就一步步来实现这个目标：1.首先，将数据整理好输入 Excel，分别为经酶标仪读出标准品的 0D值及其对应的浓度值。2.拖动鼠标选取完成的数据区，并点击图表向导，在图表类型中选“XY散点图，并选择子图表类型的“散点图第一个没有连线的。如下列图所示。12345

2、6789101112131415161Y标准品3值 标穂品痕度LE2 S510C11屯£ :里回宅?文件粽辑视圉插入Q胳式© 3© 数据Q窗口即帮勖Qp Aiobe PDFq _j丿交2 EU也3点击“下一步，出现如下列图界面。如是输入是如本例横向列表的就不用更改,如果是纵向列表就改选“列。21二5丈件嚟 詹®3扌卞准品灯3j1718在做ELISA标准曲线，并通过此曲线求样本浓度时，因样本 0D值是的，因 此，我们需要将0D值设为X。根据上图我们可以看到，横坐标 X值为0D值，纵 坐标丫为标准品浓度，这正是我们想要的。4.有时需要我们手动选择X值，这时可

3、以点击“系列来更改，如下列图2_31述.11 I12 'H1S1617ISJJBI 10(如果要对横坐标和纵坐标进行掉换，我们可以就点击X值和丫值文本框右边的小图标，结果如下列图:里文件® 编辑翅 视图电插入© 格式辺 工具Q ss ®掘口世峯助闔1Ac -(T)'£r6 11 tI" I ,123标准品0D值2- 8221.8550,459 0,3070,212o. lea4标准品派度10005002 B012562.5 31.2515. 625o.5A 2.S22B368卜Eh洋圖表向导4步廉之2图丢源致据E血 asyfab

4、s. com. on出现上图后，拖动鼠标选取正确的数据区域以调整X或Y。5.调好之后，然后点击“下一步出现图表选项界面，如下列图商龙件里1鋼辑QD I1SCK)桩式 工具的 魏据卸曾口电Id-JfhL-宀=皑一. ;=矗 2* 3221 1 F"B "I C DEFGH 1r i j闍茨佝5|涉UN 3；3r s i6r 7t 8 11 9 jupfnl12Lu141&16J7 .标准品浓用害疑題J 皿芫战燮)6点击“下一步，在弹出的窗口再点击“完成现在一张带标准值的完整散点 图就已经完成，如下列图。7.到了这一步，散点图便完成了。我们可能会问，曲线在哪里啊其实很简

5、单，先点击图上的标准值点记住一定要点选上 ，然后单击右键，点 击“添加趋势线。如下列图：8.弹出趋势线类型选择对话框，有线性，对数，多项等选项，如下列图9. 在选择之前，我们先对上图做一下肉眼观察，如果那些点能连成一条直线，或 接近直线，我们就选择“线性，意思就是出来的趋势线是一条直线，相应的该 直线的方程就是y=ax+b的形式。不过，一般的ELISA都不会是所有的标准点呈 完全的线性关系的，也就是说不是一条完全的直线，这时我们可以选择“多项式， 多项式后面还有“阶数的选项，也就是说求出来的方程是几次方，我们一般选“2阶，即出来的方程为y=ax2+bx+c.选择完毕后，弹出以下窗口10. 趋势线也就是标准曲线在此便显示出来了。接下来，我们需要将公式显示出 来，以根据样本的0D值计算其浓度值。在鼠标点选该线一定要选中，选中后 出现下列图的样子即线由很多点标识出来，单击鼠标右键，选择趋势线格式11. 我们在弹出的窗口中选择“选项选项卡，出现下列图，我们选择显示公式, 显示R方，即相关系数，这时公式与 R方值便都显示出来了。我们将样本的0D值作为