前列腺增生的组织形态及其PCNA表达的定量研究

1、    前列腺增生的组织形态及其PCNA表达的定量研究        【摘要】目的探讨前列腺增生(BPH)手术标本的组织形态及其细胞增殖状态的区域分布特征。方法应用HE染色和免疫组化染色结合计算机辅助像分析方法，对24例BPH手术标本的三个区域中组织构成和增殖细胞核抗原(PCNA)表达进行定量分析。结果间质面积百分比和间质/上皮比值在尿道周围区、中间区和包膜下区中均依次递减(P0.01)，而上皮和腺腔面积百分比则依次递增(P0.01)；三区间腺腔/上皮比值差异无显著性。尿道周

2、围区PCNA指数高于其它两区(P0.05)。结论BPH的组织构成和细胞增殖状态存在着区域分布差异。【关键词】前列腺增生,免疫组织化学,增殖细胞核抗原 Regional morphosis and quantitative distribution of the index of PCNA in benign prostatic hyperplasiaXIE Qingxiang,PEI Faguang MENG Jiarong,et al.Department of Urology,the 175 Hospital of PLA,Zhangzhou 363000【Abstract】Objecti

3、veTo explore the regional distribution characteristic of morphosis and cellular proliferation in benign prostatic hyperplasia(BPH).MethodsThe HE staining and immunohistochemistry combining with computer-assisted quantitative image analysis system were adopted to examine the mean percent area densiti

4、es of stroma,epithelium and glandular lumen and the index of PCNA among periurethral zone,intermediate zone and supcapsular zone of prostate specimens from 24 patients with BPH.Results Both the area density of stroma and the ratios of stroma to epithelium were the highest in the periurethral zone an

5、d the lowest in the supcapsular zone. While the area density of epithelium and glandular lumen in the periurethral zone was significantly lower than those of peripheral zones.The ratios of glandular lumen to epithelium among three zones were not statistically different. There were significant differ

6、ences of the index of PCNA among three zones.ConclusionsRegional distribution differences of morphosis and PCNA index in BPH tissues were observed.【Key words】Prostatic hypertrophy,Immunohistochemistry,Proliferating cell nuclear antigen应用HE染色和免疫组化结合计算机像分析的方法对24例前列腺增生(BPH)组织的72份标本进行了组织形态学和增殖细胞核抗原(PCNA

7、)表达的定量研究。材料与方法一、组织标本耻骨上经膀胱前列腺摘除标本24例，均为两侧叶增大，6例伴中叶显著增大。年龄5180岁，平均66岁。所有标本均在离体后10分钟内于10%中性缓冲甲醛液固定46小时。与尿道纵轴平行纵向切取一侧叶的尿道周围区(尿道粘膜下)、中间区和包膜下区3份标本。石蜡包埋、切片厚4m，常规HE染色。均经病理组织学证实为BPH。二、免疫组化SP方法PCNA为鼠抗单克隆抗体，稀释度150。DAB显色，苏木素复染。PBS替代一抗作为阴性对照。三、组织构成成分所占面积百分比的检测应用医学真彩色像处理系统对HE染色切片进行像分析。每张切片随机测量510个视野(×100)，分

8、别计算间质、上皮和腺腔所占的面积百分比。四、PCNA指数的计算高倍镜下(×400)通过像处理系统显示屏放大，随机检测1020个视野，计算阳性细胞所占百分比、即PCNA指数，其中至少分别计数500个上皮细胞和500个间质细胞。五、统计方法应用万道统计软件(SDAS)统计分析，三样本之间比较采用完全随机配伍组方差分析，相关分析采用直线相关回归分析。结果光镜下见大多数尿道周围区标本中的腺体分布较稀疏、腺腔小、上皮细胞层次相对较多；包膜下区腺体增多、腺腔膨大、分布上相对密集呈腺瘤样增生结节，中间区处于两者之间。各组织中构成成分面积百分比、间质/上皮和腺腔/上皮比值见表1。尽管上述各指标个体差

9、异较大，但大多数标本的区域组织间各成分百分比和间质/上皮比值呈一定规律性分布，即由尿道周围区向包膜下区呈递增或递减趋势。腺腔/上皮比值在三者之间则无显著性差异。每份标本的间质和上皮均阳性表达PCNA，个体间也存在着差异。上皮中表达率及染色程度均高于间质，部分病例中基底细胞染色较腺上皮细胞多且深。三个区域之间的上皮和间质的PCNA指数均有显著性差异(表1)。相关回归分析发现PCNA指数与间质和上皮面积百分比、间质/上皮比值和腺腔/上皮比值之间均无显著相关性(P0.05)。表1前列腺区带组织中构成成分百分比、间质/上皮和腺腔/上皮比值(<"xx3 (840 bytes)"

10、 src="/med/cano/201003/20100312192113977" 12 15>±s)组织构成成分百分比(%)间质/上皮腺腔/上皮PCNA指数间质上皮腺腔间质上皮尿道周围区59.7±10.415.2±5.025.1±9.14.6±2.71.9±0.5816.3±11.624.4±15.9中间区55.8± 8.017.9±4.526.3±9.03.3±1.01.6±0.5211.4± 7.417.4±12.

11、3包膜下区50.4± 9.318.4±4.631.2±8.13.0±1.51.8±0.4813.7± 9.920.2±13.7P值0.00000.00330.00260.00130.08650.00150.0003讨论BPH是由间质和上皮依不同比例混合增生的疾病。本组对BPH组织中不同区域的构成成分进行定量分析，发现三区域之间的间质比例差异有显著性，尿道周围区最高、包膜下区最低，提示BPH组织中各区域间质增生的程度并不一致，与Sciarra等1的结果类似。本组发现尿道周围区的间质/上皮比值显著高于其它两区，提示尿道周围区的间

12、质增生程度高于其它两区，该区间质增生程度也高于腺上皮增生，表明BPH是以间质增生为主的增殖性疾病，间质增生是BPH发生的第一步。虽然BPH组织内各区域间诸成分增生的程度并不一致，但本组三区域的间质/上皮比值均较正常前列腺的1.8为高2，提示相对于上皮细胞增生程度而言，间质增生程度更为显著，进一步表明BPH是以间质增生为主的疾病。BPH的临床症状与组织构成比例和间质/上皮比值之间密切相关，有症状的BPH间质比例为62%、间质/上皮比值为4.6，均显著高于无症状的54%和2.73。本组结果提示尿道周围区对BPH临床症状的影响较其它区域更大。Kaplan等4研究也表明移行区指数即移行区与前列腺总的体

13、积比值与BPH症状得分密切相关。本组结果显示BPH三区域中上皮和腺腔比例由内向外逐渐递增，提示BPH组织中各区域的上皮增生和腺腔扩大的程度也不一致，表明包膜下区域腺上皮细胞增生较尿道周围区更为显著，推测当尿道周围区的BPH间质结节形成后并向外发展时，通过间质-上皮相互作用等机制，不断诱导及促进上皮、间质增生。在此过程中腺上皮增生程度相对增高而间质增生程度相对降低，其原因是否与调控因子分布差异有关，有待于深入研究。夏同礼等5研究也认为BPH发生发展过程中间质和上皮呈非同步性分化与增生。本组三区域间的腺腔/上皮的比值并没有明显差别，提示BPH各区域中上皮增生和腺腔扩大的程度基本上呈同步变化。但三个

14、区域的腺腔比例均显著高于邓方明等2报道的正常前列腺的19%，而且各自腺腔/上皮比值也高于正常的0.7。但西方人的BPH组织中腺腔比例并没有比正常的增多，提示腺腔显著扩张是中国人BPH的一个重要特征。应用免疫组化方法检测PCNA表达能较好地反映细胞增殖状态。本组发现无论是间质还是上皮组织，三区域组织之间PCNA指数均存有差异，提示各区域中细胞增殖状态分布并不一致，而且在BPH发生发展的不同阶段细胞增殖所起的作用也不相同，这可能与组织中多肽生长因子及雄激素等调节因素分布差异有关1。鉴于尿道周围区是BPH主要起源部位，本组发现该区PCNA指数显著高于其它区域，提示该区细胞增殖活跃，表明细胞增殖的增加

15、在BPH的发生、发展过程中起到重要作用，此点与Claus等6的研究结果一致。但本组PCNA指数与间质及上皮比例及其它指标之间均无相关性，可能与BPH的发生、发展涉及到细胞增殖和凋亡两因素有关，单一细胞增殖不能确切反映BPH增生的程度。 作者单位：谢庆祥、汪鸿、缪友仁(363000 漳州，解放军第一七五中心医院泌尿外科)裴发光、孟家榕(病理科)参考文献1Sciarra F,Montis,Adamo MV,et al.Regional distribution of epidermal growth factor,testosterone and dihydrotesterone in benig

16、n prostatic hyperplasia tissue.Urol Res,1995,23387-390.2邓方明，夏同礼，顾方六，等. 正常前列腺和前列腺增生的组织形态学定量研究. 中华泌尿外科杂志，1995,16708-710.3Shapiro E,Becich MJ,Hartanto V,et al.The relative proportion of stromal and epithelial hyperplasia is related to the development of symptomatic benign prostate hyperplasia. J Urol,1992,1471293-1297.4Kaplan SA,Te AE,Pressler LB,et al. Transition zone index as a method of assessing benign prostatic hyperplasia:correlation with symptoms,urine flow a