实验22细菌的芽孢染色ppt课件

1、实实 验验 2-2细菌的芽孢染色细菌的芽孢染色 细菌的染色和细菌细胞构造的察看 目的要求目的要求 染色原理染色原理 实验资料实验资料 实验程序实验程序 思索题思索题目的要求目的要求 无菌操作无菌操作 微生物涂片微生物涂片 掌握细菌的芽孢染色枯草杆菌掌握细菌的芽孢染色枯草杆菌 熟炼显微镜运用熟炼显微镜运用实验资料实验资料 涂片染色用的细菌培育物涂片染色用的细菌培育物 芽孢染色枯草杆菌芽孢染色枯草杆菌24-48h的斜面培育物。的斜面培育物。 5%孔雀绿水溶液、孔雀绿水溶液、0.5%番红水溶液番红水溶液 显微镜、镜头油、擦镜纸、吸水纸等。显微镜、镜头油、擦镜纸、吸水纸等。细菌的芽孢染色原理细菌的芽孢

2、染色原理 细菌的芽孢具有厚而致密的壁，透性低，不易着色，细菌的芽孢具有厚而致密的壁，透性低，不易着色，假设用普通染色法只能使菌体着色而芽孢不着色芽假设用普通染色法只能使菌体着色而芽孢不着色芽孢呈无色透明状。芽孢染色法就是根据芽孢既难以孢呈无色透明状。芽孢染色法就是根据芽孢既难以染色而一旦染上色后又难以脱色这一特点而设计的。染色而一旦染上色后又难以脱色这一特点而设计的。一切的芽孢染色法都基于同一个原那么：除了用着色一切的芽孢染色法都基于同一个原那么：除了用着色力强的染料外，还需求加热，以促进芽孢着色。当染力强的染料外，还需求加热，以促进芽孢着色。当染芽孢时，菌体也会着色，然后水洗，芽孢染上的颜色

3、芽孢时，菌体也会着色，然后水洗，芽孢染上的颜色难以渗出，而菌领会脱色。然后用对比度强的染料对难以渗出，而菌领会脱色。然后用对比度强的染料对菌体复染，使菌体和芽孢呈现出不同的颜色，因此能菌体复染，使菌体和芽孢呈现出不同的颜色，因此能更明显地烘托出芽孢，便于察看。更明显地烘托出芽孢，便于察看。 Schaeffer与与Fulton氏染色法氏染色法 ，改良的，改良的Schaeffer和和Fulton氏染色法氏染色法 芽孢染色的方法和步骤芽孢染色的方法和步骤1.涂片、枯燥、固定：待涂片晾干后在酒精灯火焰上经过23次。2.染色：加染色液：加5%孔雀绿水溶液于涂片处染料以铺满涂片为度，然后将涂片放在铜板上，

4、用酒精灯火焰加热至染液冒蒸汽时开场计算时间，约维持5-10min。加热过程中要随时添加染色液，切勿让标本干涸。加热时温度不能太高。水洗：待玻片冷却后 ，用水悄然地冲洗，直至流出的水中无染色液为止。复染：用蕃红液染色1-2min。3.水洗、晾干或吸干。4.镜检：察看：芽孢菌体颜色、外形、着生位置、芽孢囊特征等。 简约流程简约流程 涂片枯燥固定涂片枯燥固定5%孔雀孔雀绿水溶液，加热至染液冒蒸汽，约维绿水溶液，加热至染液冒蒸汽，约维持持5min勿干勿干冷却冷却水洗水洗番红液染色番红液染色1-2min水洗水洗晾干或吸干晾干或吸干镜检镜检记录记录 录像演示录像演示 思考题思考题 芽孢染色法蕃红为什么用水溶液？芽孢染色法蕃红为什么用水溶液？ 芽孢染色法为什么运用孔雀绿？芽孢染色法为什么运用孔雀绿？实实 验验 2-22-2结结 束束染色简约流程染色简约流程 荚膜染色荚膜染色 制片制片枯燥空气中晾干或用冷风吹干枯燥空气中晾干或用冷风吹干复红染色液染色复红染色液染色3-5min水洗水洗枯燥晾枯燥晾干干涂苯胺黑薄层涂苯胺黑薄层风干风干镜检镜检记录记录 芽孢染色芽孢染色 涂片枯燥固定涂片枯燥固定5%孔雀绿水溶液，孔雀绿水溶液，加热至染液