培养基使用标准

1、 1. 目的 规范本中心微生物实验室培养基的使用和管理。 2. 适用范围 本规程适用于培养基的储存、融化和废弃等。 3. 职责 3.1 检验人员：按照本规程规范使用培养基、定期检查培养基是否失效。 3.2 科室负责人：负责指导、监督检验人员规范使用培养基。 4. 使用程序 4.1 培养基的储存 4.1.1 除特殊说明和标准规定，通常情况下基础培养基（如营养琼脂培养基）应在 4 C 冰箱中保存不超过 3 个月，或在室温（20 C）下保存不超过一个月1。 4.1.2 灭菌后的培养基应置适当条件下保存至规定的有效期，并对保存条件进行确证 , 详见表 1。 表 1 培 养基 28 C条件保存期限23

2、培养基种类 保存条件 保存时间 予土匚冷 K 甘 不密封 2 周 平板培养基 密圭寸 68 周 试管培养基 不密封 24 周 （棉塞） 密圭寸 810 周 试管培养基 不密封 8 周 （软木塞或腊封） 密圭寸 1618 周 4.2 琼脂培养基的融化 4.2.1 将培养基放到沸水浴中或采用有相同效果的方法 （如高压锅中的蒸汽，如 105 C） 使之融化。经过高压的培养基应尽量减少重加热时间，避免过度加热。 4.2.2 培养基融化后放入 47 C2 C的恒温水浴锅或恒温培养箱中保温，直至使用。 4.2.3 融化后的培养基应尽快使用，放置时间一般不应超过 4h，不可二次融化。 4.3 培养基的脱气

3、必要时，将培养基在使用前放到沸水浴或蒸汽浴中加热 15min，加热时松开容器的盖 子；加热后盖紧，并迅速冷却至使用温度。 4.4 添加成分的加入 Xx公司 作业指导书 编号：xxx/xx-xx-20 xx 培养基使用规程 版本/修改次：1/0 第 1 页 共 2 页 对热不稳定的添加成分应在培养基冷却至 47 C2C时再加入。灭菌的添加成分在加入 Xx公司 作业指导书 编号：xx/xx-xx-20 xx 培养基使用规程 版本/修改次：1/0 第 2 页 共 2 页 期等内容。 4.5.4 对于采用表面接种形式培养的固体培养基。应先对琼脂表面进行干燥：揭开平皿 盖，将平板倒扣于烘箱/培养箱中（温

4、度设为 25 C50 C）；或放在有对流风的无菌净化台 中，直到培养基表面的水滴消失为止。注意不要过度干燥。商业化的平板琼脂培养基应按 照厂商提供的说明使用。 4.6 培养 4.6.1 培养时每垛最多堆放六个平板，平板间要留有空隙以保证空气流通，使培养物的 温度尽快与培养箱温度达到一致。 4.6.2 在培养过程中，培养基会损失水分。当水分损失的里大于培养基总里的 15%时， 就会影响微生物的生长。造成培养基水分损失的因素较多，如培养基成分，平皿中培养基 总量和培养箱的类型等（如使用带风扇的培养箱，培养箱中的湿度偏低，平板在培养箱中 位置靠近培养箱内壁等），操作时应注意避免。 4.7 培养基的弃置 培养基废弃前，实验室米用 121 C、15 分钟蒸汽灭菌，或煮沸消毒 30 分钟。 5 .参考文献 5.1 SN/T1538.1-2005.培养基制备指南 第一部分：实验室培养基制备质量保证通则 S. 5.2 王宏明.微生物检验技术操作规程与质量控制及检测数据分析处理实用手册 M 北 京：卫生科技出版社，2007