CIK细胞免疫治疗对转移性肾细胞癌患者免疫功能的影响

1、·临床探讨·中国现代医生2014年10月第52卷第29期CHINA MODERN DOCTOR Vol.52No.29October 2014CIK 细胞免疫治疗被认为是新一代抗肿瘤过继细胞免疫治疗首选方案。研究表明,CIK 细胞在肾癌治疗中显示了良好的抗肿瘤作用1。肾癌具有多药物耐药基因,对化疗、放疗不敏感,生物免疫治疗有一定疗效。为了寻找治疗肾癌更为有效的方法,本研究采用CIK 细胞免疫治疗转移性肾细胞癌,观察治疗前后患者免疫功能指标的变化,了解其对转移性肾细胞癌患者免疫功能的影响。1资料与方法1.1一般资料70例转移性肾细胞癌患者为河南省中医院、河南省肿瘤医院、郑州市

2、中心医院2010年1月2012年2月住院观察病例,均经免疫组化病理证实。男48例,女22例;年龄3873岁,平均56岁。按入院先后均分为两组,其中肺转移26例,骨转移21例,肝转移8例,脑转移9例,其他部位转移6例。70例患者ECOG 分级级,预计生存期3个月。两组在年龄、性别、病程、病理类型等方面均无显著差异(P >0.05,具有可比性。1.2方法1.2.1治疗方案对照组采用常规治疗IL-2(5×106U/m 2,d 1、d 3、d 5和IFN-(3×106U/m 2,d 2、d 4、d 6,连用4周,停药2周,每6周为1个治疗周期。治疗组在常规治疗一个周期后采用C

3、IK 治疗,患者至少接受3个疗程CIK 治疗。1.2.2CIK 细胞的制备免疫表型的测定及细胞杀伤活性的检测见参考文献2-3。CIK 细胞免疫治疗对转移性肾细胞癌患者免疫功能的影响崔洪泉1赵俊峰1李保东2张林超31.河南省中医院泌尿外科,河南郑州450002;2.河南省肿瘤医院泌尿外科,河南郑州450008;3.郑州市中心医院泌尿外科,河南郑州450000摘要目的观察CIK 细胞免疫治疗对转移性肾癌患者免疫功能的影响。方法选取20102012年收治的转移性肾癌患者,在常规治疗措施的基础上联合应用CIK 细胞免疫方法进行临床治疗,治疗3个疗程后,监测治疗前后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+

4、/CD8+比值等免疫功能指标,进行统计学分析。结果治疗后患者外周血中CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平优于治疗前(P <0.05。结论采用CIK 细胞免疫治疗能有效提高转移性肾癌患者的免疫功能。关键词CIK 细胞;转移性肾细胞癌;免疫功能中图分类号R737.11文献标识码B文章编号1673-9701(201429-0132-02Effect of CIK cells immunotherapy on immunological function of patients with metastatic renal cell carcinomaCUI Hongquan 1Z

5、HAO Junfeng 1LI Baodong 2ZHANG Linchao 31.Department of Urology,Traditional Chinese Medicine Hospital of Henan Province,Zhengzhou 450002,China;2.Department of Urology,Cancer Hospital of Henan Province,Zhengzhou 450008,China;3.Department of Urology,Central Hospital of Zhengzhou City,Zhengzhou 450000,

6、ChinaAbstractObjective To study the effect of cytokine-induced killer(CIKcells immunotherapy on immunological function of patients with metastatic renal cell carcinoma.Methods A total of 70patients with metastatic renal cell carcinoma were randomly divided into 2groups,35cases of the treatment group

7、 were added with CIK cells,while the control group was given IL-2and IFN-,detected the immunological function of 70cases including the levels of CD3+,CD4+,CD8+T cells,ratio of CD4+/CD8+,one week before therapy of CIK cells and one month week after treatment.Results The levels of CD3+、CD4+cells,ratio

8、 of CD4+/CD8+in peripheral blood of patients with renal cancer of two groups were much higher than those before therapy (P <0.05,the levels CD8+was lower after treatment,there were significant changes (P <0.05.Conclusion CIK cells immunotherapy can enhance the immunological function of patient

9、s with metastatic renal cell carcinoma.Key wordsCIK cells;Metastatic renal cell carcinoma;Immunological function132中国现代医生2014年10月第52卷第29期CHINA MODERN DOCTOR Vol.52No.29October 2014·临床探讨·1.2.3细胞回输细胞培养完成后,用生理盐水离心洗涤两次,加入生理盐水中分2次静脉回输,每月接受1次CIK 回输,中间间隔1d,每次回输CIK 数量为(10.07±1.37×109,回输前

10、患者肌注盐酸异丙嗪,肌肉注射地塞米松。1.2.4免疫指标的检测观察治疗前1周及治疗后3个月患者外周血T 淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平变化。1.3统计学方法应用SPSS16.0统计软件对两组治疗前后各项免疫指标进行分析,计量资料以(x±s 表示,采用配对t 检验,P <0.05为差异有统计学意义。2结果两组治疗前后CD3+、CD4+和CD4+/CD8+比值上升(t =2.56、2.32、3.12、2.45、2.83、2.16,P <0.05,CD8+细胞比例下降(t =2.31、2.03,P <0.05,差异均具有显著性;并且治疗

11、组上升值或下降值明显大于对照组(t =3.31、2.02、2.53、2.19,P <0.05,差异具有统计学意义,见表1。表1两组治疗前后T 淋巴细胞亚群变化(x±s ,n =35注:与治疗前比较具有统计学意义(*P <0.05,与对照组治疗后比较具有统计学意义(P <0.053讨论肾细胞癌是起源于肾实质泌尿小管上皮系统的恶性肿瘤,占肾脏恶性肿瘤的80%90%4,转移性肾细胞癌为伴有远处转移,大约25%30%肾细胞癌患者在初次诊断时伴有远处转移,局限性RCC 行根治性肾切除术后约20%40%的患者将出现远处转移,在RCC 患者中30%50%最终将发展成为转移性RCC

12、 5。细胞因子诱导杀伤性细胞(cytokine-induce killercell,CIK其前体是T 细胞,1991年Stan-ford 大学的Schmidt-Wolf 培养出一个有强大抗肿瘤活性的细胞群6,利用人外周血分离获得单个核细胞,在体外用IFN-、抗人体CD3+抗体、IL-2共同培养后获得一群异质细胞7。CIK 细胞不是单一种类的细胞群,其增殖能力及杀瘤活性明显优于CD3AK 细胞,CIK 对A -549细胞的杀伤活性显著高于LAK 细胞8(P <0.05,具有较强的杀瘤能力;其细胞成分主要为CD3+CD56+细胞和CD3+CD8+双阳性细胞群,前者在培养体系中增殖倍数最多,杀

13、瘤活性最强,是主要的效应细胞,CIK 细胞具有较强的扩增和杀瘤能力,是肿瘤过继免疫治疗中更为有效的杀瘤效应细胞,是一种新型的广谱抗肿瘤免疫活性细胞,在临床中越来越受到重视。恶性肿瘤的预后与免疫功能密切相关,肾细胞癌为免疫性恶性肿瘤,外周血CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+等免疫指标是反映细胞免疫功能的重要指标,晚期患者可出现不同程度免疫功能抑制,在外周静脉血中表现为细胞亚群功能的异常,表现为CD3+、CD4+T 细胞的减少和CD8+T 细胞的增多,CD4+T/CD8+T 细胞比例的下降或倒置。本研究结果显示两组患者治疗后CD3+、CD4+比例均升高,CD8+比例下降,CD4+/C

14、D8+比值上升,与治疗前相比均有统计学意义(P <0.05。体外研究表明,CIK 可以增强肿瘤患者机体的免疫功能9,自体CIK 细胞治疗可以明显提高CD3T 细胞和NK细胞的比例,缓解CD4+/CD8+的免疫倒置,增强患者的细胞免疫功能10。亦有研究发现,CIK 细胞在治疗、期肾细胞癌患者5年PFS、OS 率明显高于对照组且中位PFS、OS 时间明显长于对照组,证实CIK 治疗可以改善、期肾细胞癌患者的预后,增加CIK 免疫治疗疗程可能获益更多11。抗肿瘤作用的主要机制包括两个方面,一是直接或间接杀伤抑制肿瘤细胞,二是通过促进T 淋巴细胞增殖活化,从而提高机体抗肿瘤免疫能力,清除肿瘤患者

15、体内微小残余病灶,诱导肿瘤细胞凋亡,同时能够防止肿瘤复发。CIK 细胞作为免疫治疗的方法之一,可以明显提高恶性肿瘤患者的免疫功能,抑制肿瘤的生长,同时其体内分布的广泛性表明,它可以用于身体各部位恶性肿瘤的治疗12,为治疗转移性肿瘤奠定了良好的基础,有报道增加CIK 治疗疗程数可以提高疗效10,并且CIK 细胞免疫治疗无外源细胞因子维持作用,副作用少,显示了良好的发展前景,尤其是近年来转基因技术的多种基因修饰功能,使CIK 细胞免疫治疗具有了更为广阔的应用前景。参考文献1Wang H,Zhou FJ,Wang QJ,et al.Efficacy of autologousrenal tumor

16、cell lysate -loaded dendritic cell vaccine in combination with cyto -kine -induced killer cells on advanced renal cell carcinoma-A report of ten casesJ.Ai Zheng,2006,25(5:625-630.治疗组对照组治疗前治疗后治疗前治疗后51.5±11.4664.25±10.12*52.3±12.2652.8±11.63*47.34±15.3055.01±12.20*46.6

17、77;10.6447.2±11.08*41.92±12.5340.26±8.64*41.8±12.1441.6±10.47*1.21±0.531.42±0.75*1.21±0.501.24±0.58*组别时间CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+(下转第136页133·临床探讨·中国现代医生2014年10月第52卷第29期CHINA MODERN DOCTOR Vol.52No.29October 20142Li H,Wang C,Yu J,et al.Dendritic cell

18、 -activated cytokine-induced killer cells enhance the anti-tumor effect of chemotherapy on non-small cell lung cancer in patients after surgeryJ.Cyto-therapy,2009,11(8:1076-1083.3Ren X,Yu J,Liu H,et al.Th1bias in PBMC induced bymulti-cycles of auto-CIKs infusion in malignant solid tumor patientsJ.Ca

19、ncer Biother Radiopharm,2006,21(1:22-33.4那彦群,孙则禹,叶章群,等.中国泌尿外科疾病诊断治疗指南M.北京:人民卫生出版社,2013:8-9.5Ljungberg B,Hanbury DC,Kuczyk MA,et al.Guidelineson renal cell carcinomaM.European Association of Urology,2008:10-12.6雷静,钱旻,吴芝莉,等.体外CIK 细胞的细胞因子表达谱研究的初步探讨J.中国免疫学杂志,2005,21(8:589-592.7匡志鹏,谢裕安,梁安民,等.细胞因子诱导的杀伤细胞的

20、生物学特性及抗肿瘤作用研究J.广西医学,2006,28(8:1149-1151.8王佳烈,马国强,包利清,等.细胞因子诱导的杀伤细胞体外扩增及其生物学特性的研究J.中国医药导报,2007,4(36:10.9Schmidt-Wolf IG,Lefterova P,Mehta BA,et al.Phenotypicchar -acterization and identification of effector cells involved in tumor cell recognition of cytokine-induced killercellsJ.Exp Hematol,1993,21(

21、13:1673-1679.10黄朝晖,王丰,华东,等.肿瘤患者自体CIK 细胞治疗及其对患者免疫功能的影响J.江南大学学报,2004,3(1:20.11张静,刘亮,于津浦,等.细胞因子诱导的杀伤细胞治疗肾细胞癌临床疗效的评价J.中国肿瘤生物治疗杂志,2011,18(5:480.12安秀梅,岳欣,李慧,等.应用结肠癌动物模型探讨CIK 细胞的抗肿瘤活性和体内分布特点J.中国中西医结合外科杂志,2008,14(3:260.(收稿日期:2014-05-29石清除效果,且未出现严重的失血及其他严重的并发症。我们认为,MPCNL 手术穿刺路径宜选择中盏及上盏,便于寻找肾盂口,进入输尿管上段甚至更低的位置;尽量将Peel-away 鞘通过扩张的输尿管上段贴近结石,既可以防止Peel-away 鞘脱出,又可以减少残石移动,且便于碎石吸出;对于大的结石碎块下移至输尿管中、下段的情况,可采用后退输尿管导管加压注水的方法,如不成功则改用URL 术11,12。综上,MPCNL 操作较复杂,有一定创伤,住院时间较长,可能发生大出血等严重并发症;而URL 更符合微创的要求,但碎石率低。因此我们认为,输尿管镜碎石术、微创经皮肾镜取石术在治疗复杂性输尿管上段结石中各具优势,临床医生可根据患者实际情况进行最佳选择。参考文献1程跃,严泽军.输尿管上段结石治疗首选输尿管软镜J.现代泌尿