红掌愈伤组织诱导和芽的分化

1、园艺学报2003, 30(1 :107109收稿日期:2001-12-10; 修回日期:2002-06-21基金项目:中国科学院“西部之光”项目资助(990302252144 ; 西南创新基地项目资助(2000205红掌愈伤组织诱导和芽的分化兰芹英1李启任2何惠英1张艳军1解星云3(1中国科学院西双版纳热带植物园, 勐腊666303; 2云南大学生物技术系, 昆明650091; 3云南省茶叶科学研究所,勐海666201摘要:对影响红掌愈伤组织诱导及芽分化的几个因素进行了研究。, 其叶柄愈伤组织诱导率、芽分化率、分化时间均明显优于叶片。有影响, 叶背向下放置, 光照时间24h/d 和10h/d

2、, 97对叶柄愈伤组织诱导无显著影响, 但光照24h/d 和10h/d 。叶柄培养以N 6, K C 和1/2MS 培养基为佳。叶片培养则以P , N 6, 从接种到丛芽分化共49d , 较已有报道提前1131d 关健词:红掌; 愈伤组织; ; 芽分化中图分类号:S A :05132353X (2003 01201072031目的红掌(Anthurium andraeanum Linden 又名花烛, 安祖花。本试验对影响红掌愈伤组织诱导和芽分化的因素进行研究, 为红掌试管苗的工厂化生产和规模化种植提供依据。取盆栽苗充分展开、半展开和未展开的叶片, 常规消毒灭菌后将叶片剪成0. 51cm 见方

3、小块,叶柄剪成长1cm 的切段接种在P 1+BA 2mg/L +2,42D 0. 2mg/L 培养基中, 诱导愈伤组织形成和芽分化, 研究叶片外植体成熟度的影响。待芽长成小苗后, 再用无菌小苗的叶片(0. 51cm 见方 和叶柄(长约1cm 作外植体进行不同放置方式、光照时间及培养基等的研究。培养温度(28±2 , 光强2000lx 。在芽的增殖和生长中常伴有根的形成, 因此, 发育正常的小苗可直接移栽, 若根生长不好的则转入1/2MS +I AA 0. 2mg/L 培养基中进行生根培养。2结果与讨论2. 1叶片外植体对愈伤组织的形成和芽分化的影响由表1结果可知, 叶柄的愈伤组织诱导

4、率高于叶片, 每块愈伤组织分化的芽数也高于叶片。半展开叶和未展开叶的叶柄愈伤组织诱导率都为100%, 展开叶片的叶柄愈伤组织诱导率为81. 87%。叶柄接种9d 后, 切口两端开始膨大, 28d 后愈伤组织分化芽。展开叶片的愈伤组织分化丛芽需91d , 而未展开叶共需49d 。2. 2叶片放置方式和光照时间对叶片愈伤组织诱导率的影响将长33. 5cm 的无菌小苗叶片作为外植体, 在光照0、10、24h/d 条件下, 叶片背面向上放置, 愈伤组织诱导率分别为43. 35%、47. 06%、54. 54%; 叶片背面向下时愈伤组织诱导率分别为56%、96. 55%、100%。因此, 我们认为叶背向

5、下, 光照10h/d 以上有利于愈伤组织的诱导(表2 。2. 3 光照时间对叶柄愈伤组织诱导及芽生长的影响无菌小苗叶柄外植体在P +BA 2mg/L +2,42D 0. 2mg/L 培养基和光照0、10和24h/d 条件下培养两个月的结果表明:光照对叶柄愈伤组织诱导没有影响, 但对丛芽的分化影响较大, 24h/d 光照芽分化最多, 黑暗条件下最少(表3 。2. 4基本培养基对叶片, 叶柄愈伤组织诱导和丛芽分化的影响外植体接种在MS 、1/2MS 、P 、N 6、B 5、K C 附加BA 2mg/L +2,42D 0. 2mg/L 培养基中, 光照10h/d , 两个月后统计结果(表4 所示:P

6、 、K C 、N 6和1/2MS 对叶片愈伤组织诱导效果较好; 芽数较多的为P 培养基。叶柄培养在P 、N 6、K C 、1/2MS 培养基中, 愈伤组织诱导率和芽分化率较高, MS 较低, B 5芽分化率为0; 芽数较多的是N 6、K C 、1/2MS 。表1外植体成熟度对愈伤组织的形成和芽分化的影响T able 1The effect of explant m aturity on inducing callus and differentiation of bud 外植体成熟度Explant maturity 接种数N o.explants诱导愈伤组织数N o. calli 愈伤组织诱导

7、率Callus induction Percent (% 分化芽的块数N o. of bud 芽分化bud 芽数/块N o. shoot/callus 未展开叶片F olded leave 18844. 4463314叶柄Petiole 24241001050半展开叶片Partly folded leave 22167340. 91228叶柄Petiole 191973. 68545展开叶片Un folded leave 24161041. 671021叶柄Petiole81. 1045. 46850表2T able 2of laying w ay leave and light timeon

8、 callus induction 放置方式Laying way 光照时间Light time(h/d 接种数N o. explants 诱导愈伤组织数N o. calli 诱导率N o. callus percent (% 叶背向上0341647. 06Abaxial of leave 10301343. 33facing up 24331054. 44叶背向下0251456. 00Abaxial of leave 10292896. 55facing down 242424100表3光照时间对叶柄愈伤组织诱导率的影响T able 3The effect of petiole on call

9、us induction in different light 光照时间Light time (h/d 接种数N o. explants 诱导愈伤组织数N o. calli 诱导率N o. callus percent (% 每块愈伤组织的芽数N o. buds 0494795. 92+10302893. 33+24323196. 86+表4不同基本培养基对叶片, 叶柄愈伤组织诱导和芽分化的影响T able 4The effect of leave and petiole on callus inductionand differentiation of bud in different b

10、ase mediu 外植体Explant 培养基M edium 愈伤组织Callus 诱导率Induction percent rate (% >0. 5cm (% 芽分化Bud differentiation 分化率Differentiation percent rate (% 芽数N o. buds 叶片MS 4252. 3861. 91+Leave 1/2MS 9649. 9256. 72+K C100500-N 697. 579. 4994. 92+P1009696+B 56835. 290-叶柄MS 505535+Petiole 1/2MS 9245. 6571. 74+K C

11、 97. 589. 789. 74+N 6100100100+P 1007276+B 575. 5600-自1974年Pierik 1首次培养红掌取得成功以来, 国内外对红掌愈伤组织诱导的绝大多数的研究报道是:外植体愈伤组织愈伤组织增殖芽完整植株15。从外植体诱导愈伤组织, 再分化出芽最快需6080d 6, 而我们的试验结果是, 未展开叶的叶柄作外植体, 一个月后愈伤组织诱导率为100%, 49d 后愈伤组织分化出丛芽, 比前人的结果提前了1131d 。本试验结果表明, 叶背向下, 光照有利于愈伤组织的诱导, 叶背向上光照对愈伤组织诱导率没有影响, 这可能与叶片的结构和功能有关。叶片和叶柄培养

12、在不同氨盐含量的培养基B 5(NH 4 2S O 4134mg/L 和MS (NH 4NO 31680mg/L 中, 愈伤组织诱导率较低。前人的研究结果表明, 低浓度的氨盐对很多红掌愈伤组织诱导有利, 206825mg/L 较为合适, 大于825mg/L 或小于206mg/L 将不利于愈伤组织的诱导2。本试验结果与前801园艺学报30卷人的相似。芽的分化及再生植株照片见插页4。参考文献:1Pierik R L M , S teegmans H H M , Van Der meys J A J. Plantlet formation in callus tissues Anthurium and

13、raeanum Lind. Scientia H orticulturae , 1974, 2:1931982Pierik R L M. Anthurium andraeanum plantlets produced from cultivated in vitro. Physiol. Plant , 1976, 37:80823K uehnle A R , Sugii N. Callus induction plantlet regeneration in tissue cultures of hawaiian anthuriums. H ortscience , 26(7 :9199214

14、苓益群, 蒋如敏, 邓志龙, 等. 安祖花离体增殖的形态发生与理化因子效应. 园艺学报, 1993, 20(2 :1871925浩仁塔本, 余伟莅. 安祖花的组织培养和快速繁殖. 植物生理学通讯, 1991, (6 :4326杨涛, 陈德海, 吴荔萍. 安祖花的组织培养及其细胞和叶绿体发育过程的电镜观察. 亚热带植物通讯, 1998, 27(1 :17The C allus I nduction of Anthurium andraeanum and Lan Qinying 1, Li Qiren 2, He Huiying 1, Zhang Y anjun 1, and 3(1Xishuan

15、gbanna Tropic Botanical Garden , The Academy o f Sciences , , China 2o f Biology Technology ,Kunming 650091, China ; 3Tea Reserch Institute o f Yunnan , , Abstract :The factors that in and bud differentiation of Anthurium andraeanum Linden were studied. results than blade in callus induction , bud d

16、ifferentiation and duration callus induction on blade was in fluenced by the way of placement on medium and period for , and highest percentage (100%and 97% for callus induction were recorded under the condition that downside of blade were against the medium and with 24h/d and 10h/d light. Differnet

17、 light treatments did not affect the callus induction of petiole significantly. H owever , the 24h/d and 10h/d light treatment obviously im proved the bud differentiation com pared to the treatment with no light. Promising results am ong several mediums tested were recorded :N 6, K C and 1/2MS for p

18、etiole and P , N 6and 1/2MS for blade , respectively. The time from explant to bud differentiation were 49d , which was 11-31d earlier than time previously reported.K ey w ords :Anthurium andraeanum Linden ; Inducing of callus ; Differentiating bud欢迎购阅下列新书4-1花卉无土栽培23元4-2花卉组织培养23元4-3花卉化学控制23元4-4花卉贮藏保鲜23元4-5月季27元4-6菊花29元4-7香石竹31元4-8球根类37元4-9多浆花卉48元4-10宿根花卉44元4-11温室花卉52元4-12藤蔓花卉37元4-13中小型苗圃林果苗木繁育实用技术手册25元4-14中国果树志枣卷56元4-15中国果树志李卷100元4-16中国果树志核桃卷76元4-17中国果树志山楂卷56元4-18中国果树志荔枝卷67元4-19中国果树志龙眼、枇杷卷80元4-21中国果树志苹果卷134元4-22中国果树志桃卷110元4-23中国木本植物种子200元4-24新型芽苗菜-体芽菜生产技术图册