非抑制电导阳离子色谱法同时测定矮壮素和缩节胺

1、非抑制电导阳离子色谱法同时测定矮壮素和缩节胺摘要：采用离子交换非抑制电导检测法同时测定矮壮素和缩节胺。在流速为0.80mL/min，淋洗液为5.00mmol/L甲基磺酸和25%（体积分数，下同）乙腈的混合液时能够快速稳定出峰，且与其他干扰离子充分分离，矮壮素和缩节胺的检测下限分别为0.2093mg/L和0.2983mg/L，具有良好的线性关系和重现性。对实际样品进行测定，矮壮素和缩节胺的回收率分别为96.55±0.1572%和95.54±1.2804%，结果令人满意。 关键词 非抑制；离子交换；矮壮素；缩节胺 矮壮素(Chlormequat chloride)和缩节胺(Me

2、piquat chloride)均是广谱、高效、低毒的植物生长调节剂，广泛地用于农作物和园艺作物提高抗逆性，大幅增加产量1。矮壮素和缩节胺均为季铵盐类化合物，极性和水溶性强，在土壤中具有强吸附性，容易污染地下水，会给环境造成一定的污染。矮壮素和缩节胺早期的分析方法包括薄层色谱法、比色分析法、和气相色谱法等2-4。测矮壮素早期的气相色谱法一种是将矮壮素热分解产生氯甲烷进行检测；另一种方法是使矮壮素在碱性条件下分解产生乙炔进行检测。后来出现了衍生化气相色谱法。这几种气相色谱法都存在干扰作用强、净化程序复杂、易出现假阳性和回收率低等问题。矮壮素和缩节胺的弱挥发性和强极性决定了其适合采用液相色谱法进行

3、检测，但因其分子结构简单，不含有发色基团，也需要衍生化后才能进行紫外检测，而衍生化过程也会造成回收率低、干扰物质增加、易产生假阳离子等问题，给定性和定量带来困难。采用质谱检测5,6则可以解决这一问题，所以目前大都采用色谱质谱联用技术，但质谱的成本高昂，提高了矮壮素和缩节胺常规检测的成本。用离子色谱的方法测定矮壮素和缩节胺7,8，虽然灵敏度没有气质或液质高，但该方法具有操作简单、快速、实用等特点，能满足矮壮素和缩节胺的常规检测，且离子色谱仪器及其操作的成本较质谱低，实际推广性更强。 目前，用离子交换非抑制电导检测法同时测定矮壮素和缩节胺的方法未见报道。笔者用甲基磺酸和乙腈作为流动相，离子交换非抑

4、制电导检测法同时测定矮壮素和缩节胺。实际样品的检测表明，该方法操作简便、快速、准确，且回收率高。 1 实验部分 1.1 仪器与试剂 仪器：Dionex ICS900离子色谱仪，Abel Industries NG6000柱温箱，Dionex IonPac . SCG1(4×50mm，P/N 061523)保护柱，Dionex IonPac . SCS1(4×250mm，P/N 061521)分离柱，Dionex Chromeleon 6.8色谱工作站。 试剂：甲基磺酸(>98.0%)，乙腈(>99.9%)，矮壮素(>95%)，缩节胺(>95%)，试剂

5、均为分析纯或色谱纯。所需溶液都采用二次去离子水(18.2M·cm)配置而成。 1.2 色谱条件 淋洗液为5.00mmol/L甲基磺酸+25%乙腈的混合液，流速为0.80mL/min，进样量为25L。分离柱柱温为30，检测器温度为35。 2 结果与讨论 2.1 实验条件的优化 在离子交换非抑制电导检测的条件下，矮壮素和缩节胺的分离度良好，提高信噪比成为实验优化的主要目的。笔者分别用2.50mmol/L、5.00 mmol/L、10.0 mmol/L、15.0mmol/L的甲基磺酸和5%、10%、15%、20%、25%、30%（体积分数）的乙腈作为淋洗液，做了全面实验。结果发现，甲基磺酸

6、浓度越低，乙腈的体积分数越大，信噪比越高。当甲基磺酸为5.00mmol/L和乙腈为25%时，信噪比达到最高。但是当乙腈体积分数超过25%时，信噪比反而下降。因为过高的乙腈会给流动相带来更多的气泡，从而使基线噪音增大，降低信噪比。因此，该实验选择淋洗液为5.00mmol/L甲基磺酸和25%乙腈的混合液。图1为最优化条件下20mg/L的矮壮素和缩节胺的离子色谱图。图2为在最优化条件下9种胺的离子色谱图。由图1和图2可以看出当5.00mmol/L甲基磺酸和25%乙腈的混合液作为淋洗液时，矮壮素和缩节胺的峰形和分离度较好，且保留时间较适中，能与其他杂质峰完全分离。 2.2 线性关系和检测下限 淋洗液为

7、5.00mmol/L甲基磺酸和25%的混合液，流速为0.80mL/min,进样量为25L的实验条件下，在一定的浓度范围内（1.0100mg/L）测定矮壮素和缩节胺的线性关系见表1。由表1可以看出，在最优化的实验条件下，线性良好，且将噪音的3倍带入峰高的线性方程算得，矮壮素和缩节胺的检测下限分别为0.2093mg/L和0.2983mg/L。 表1 矮壮素和缩节胺的线性关系2.3 重现性 对质量浓度为40.00mg/L的矮壮素和10.00mg/L的缩节胺混标连续进样10次 ，考察其检测重现性。测试结果表明，矮壮素的峰面积变异系数RSD为0.5457%，缩节胺的峰面积变异系数RSD为1.832%。实

8、验结果表明重现性较好。 2.4 实际样品测定和回收率自种黄瓜幼苗，在其茎叶上喷洒一定量的矮壮素和缩节胺，5天后测其残留。取一定量的黄瓜苗将其捣碎后移入烧杯中，加入40mL去离子水，超声波提取30min后离心过滤，取上清液，经0.22m的滤膜过滤后，再经过RP柱净化，样品颜色明显变澄清，进样，其离子色谱图见图3。按1:1加标，其矮壮素和缩节胺的回收率分别为96.55±0.1572%和95.54±1.2804%。3 结论 采用5.00mmol/L甲基磺酸+25%乙腈的混合液作为流动相，非抑制电导检测离子色谱方法，可以快速、准确地测定实际样品中的矮壮素和缩节胺。该方法的样品前处理

9、方法简单，重现性良好，成本更低，可以满足矮壮素和缩节胺的定性、定量分析的需求，具有实际应用价值。如果需要更低的检测下限，可以通过增大定量环或浓缩样品来解决。 参考文献 1 汪俏梅, 郭得平. 植物激素与蔬菜的生长发育M. 北京: 中国农业出版社, 2001, 97-104. 2 Allender W J. Determination of chlormequat residues in colon seed by gas chromatography J. Pestic Sci, 1992, 35: 265-269. 3 Tafuri F, Businelli M. Gas-chromatog

10、raphic determination of chlorcholine chloride residues in natural tomato juice J. Analyst, 1970, 95: 675-679. 4 赵永信, 宋国良, 张晶, 等. 气相色谱/质谱法测定粮食中矮壮素残留J. 2008, 35(6), 1064-1066. 5 Sonja R, Heinrich O, Natalia V, et al. Determination of chlormequat and mepiquat in pear, tomato, and wheat flour using on-l

11、ine solid-phase extraction (Prospekt) coupled with liquid chromatography-eletrospray ionization tandem mass spectrometry J. Chromatogr. A, 2002, 966(1): 15-23. 6 王金花, 卢晓宇, 黄梅, 等. 超高效液相色谱-质谱法快速分析番茄及其制品中矮壮素和缩节胺残留量J.分析化学, 2007, 35(10): 1509-1512. 7 Marie C P, Isabelle D, Jozef C, et al. Simple ion chromatographic method for the determination of chlormequat residues in pears J. Journal of Chromatography A , 2001, 920(1-2): 255-259. 8 Fegert