高效离子色谱法测定淀粉糖的组分

1、高效离子色谱法测定淀粉糖的组分摘要：本文建立了高效离子色谱法测定淀粉糖组分的方法。样品经稀释、过滤后直接进行色谱分析，以NaOH/NaOAc为流动相，流速1.0 mL/min，采用CarboPac PA10（250 4 mm）离子色谱柱分离，安培检测，外标法定量。结果表明，淀粉糖中测得了葡萄糖、异麦芽糖、麦芽糖、潘糖、麦芽三糖等组分，各种糖的线性范围为0.1 10 mg/L，相关系数为0.9999，回收率为93% 101%，相对标准偏差均小于2%。该方法前处理简便，用于淀粉糖组分的检测，结果令人满意。关键词：高效离子色谱法；淀粉糖；组分 淀粉糖是利用含淀粉的粮食、薯类等为原料，采用酸法、酸酶法

2、或全酶法制取的糖，包括麦芽糖、异麦芽糖、葡萄糖、果糖、果葡糖浆、山梨醇以及各种低聚糖等，统称淀粉糖。淀粉糖长期以来被广泛地应用于食品，医药，造纸等诸多行业，其消费领域广，消费数量大，是淀粉深加工的支柱产品，是农业产业化和粮食深加工的重要途径之一1。伴随着玉米深加工，食品工业的发展以及酶制剂等生物技术的进步和人们消费结构的变化，我国淀粉糖行业取得了显著的发展，2006年淀粉糖产量达560万吨，产量仅次于美国，居世界第二位。淀粉糖工业在我国国民经济发展中起着重要作用。同时酶法生产的淀粉糖中含有大量的低聚糖组分，低聚糖类对于消化系统的保健作用日益受到重视。 以往对于使用酸法制取的淀粉糖浆，人们使用葡

3、萄糖DE值反应淀粉的水解程度（DE值为淀粉糖品中还原糖按葡萄糖折算占干物质的百分数），以DE值作为淀粉糖品分类和分级的标准，进行生产控制。随着技术的进步，各种新型的酶法生产淀粉糖已成趋势。用酶法工艺生产出的淀粉糖其组成与酸法有所区别，具有相同DE值的糖会有糖分组成不尽相同2。目前常用的测定淀粉糖组分的方法是高效液相色谱视差折光检测法（HPLCRID）3-4，HPLC法通常需要两根色谱柱两次分析才能完成淀粉糖的分析，采用NaOH/NaOAc梯度淋洗安培检测器检测，一次进样可同时完成淀粉糖中常见的单糖、二糖和低聚糖分析，且操作简便，灵敏度高，重复性好5。 1. 实验部分 2.1 仪器、试剂与材料D

4、ionex ICS-3000离子色谱仪配安培检测器（美国戴安公司），Chromeleon色谱工作站，Barnstead-Nanopure纯水机， CarboPac PA10 (250 4 mm)色谱柱，0.22 m尼龙滤膜过滤头。 单糖、二糖、低聚糖标样（99%，进口分装），NaOH（50%，Fluka），NaOAc(Sigma，生化级别)实验用水均为大于18.2 M.cm的二次去离子水。 1.2实验步骤 1.2.1 标准溶液的配制 称取各种糖的标样，用水配制1000 mg/L各种糖的准溶液，保存于冰箱冷藏室中。临用时稀释成100mg/L，分别准确移取100 mg/L的各种糖的标准溶液各0.0

5、mL、1.0mL、2.0 mL、5.0 mL、10.0 mL、25 mL于100 mL容量瓶中，用水准确定容至刻度，配制成0、1.0、2.0、5.0、10.0 、25.0 mg/L不同质量浓度的标准工作溶液。 1.2.2 样品制备称取淀粉糖样品适量，稀释一定倍数，混匀，溶液过0.22 m尼龙滤膜过滤，取续滤液供色谱测定。中国色谱网 1.2.3 色谱条件淋洗液：NaOH/NaOAc梯度淋洗；流速为1.0 mL/min；进样体积25 L；积分脉冲安培检测；外标法定量。 2 结果与讨论 2.1 标准样品的谱图所选的色谱条件下，五种糖的分离谱图如下。见图1。 图1 五种糖的标准溶液色谱图(10.0 m

6、g/L)2.2 方法学考察 2.2.1 线性关系 取各种糖的标准工作溶液，按“1.2.3”节色谱条件进行测定。以峰面积Y对质量浓度X（mg/L）进行线性回归，其线性系数如表1。 表1 各种糖的的线性2.2.2 方法的重复性取同一样品，按“1.2.2”节样品制备方法平行处理8份样品，按“1.2.3”节色谱条件测定各样品，考察方法的重复性，各种糖的的保留时间、峰面积、峰高和含量的相对标准偏差均小于2%。 2.2.3 回收率准确称取淀粉糖样品，分别加入高、中、低三种不同浓度的5种糖的标准溶液，按“1.2.2”节样品制备方法制备样品，按“1.2.3”节色谱条件测定样品，计算回收率，结果各样品的回收率范围为90% 102%，相对标准偏差均小于3%。 2.3 样品测定按“1.2.2”样品制备的方法，对淀粉糖样品进行处理，按“1.2.3”节色谱条件测定其各种糖的的含量。该样品的色谱图见图2。 图2 淀粉糖样品的色谱图3 结论以NaOH/NaOAc梯度溶液为流动相，采用离子色谱分离，脉冲积分安培法检测，可对淀粉糖中的各种糖的含量进行测定。本方法快速、准确，样品处理步骤简单，分析周期短，不受杂质干扰，可用于监控酶法制备的淀粉糖的品质。 参考文献 1 张景楼，郑毅，宁彦东等，中国糖料，2009，4：77-78 2 黄立新，陈家明，中国标准化，2001，3：21-22 3 田艳玲，