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文档简介
1、实验六 维生素C含量的测定2, 6-D滴定法一、目的意义o人类营养中最重要的维生素之一。缺乏时引人类营养中最重要的维生素之一。缺乏时引起坏血病。起坏血病。o果蔬质量的重要目的之一。果蔬质量的重要目的之一。o不同栽培条件,不同成熟度都可以影响水果、不同栽培条件,不同成熟度都可以影响水果、蔬菜中维生素蔬菜中维生素C C的含量。的含量。o水果、蔬菜保鲜贮藏必需测定维生素水果、蔬菜保鲜贮藏必需测定维生素C C含量,含量,了解果蔬质量量的高低。了解果蔬质量量的高低。测定方法:滴定管活塞操作滴定操作2.6-2.6-二氯酚靛酚滴定法二氯酚靛酚滴定法滴定操作2.6-2.6-二氯酚靛酚滴定法二氯酚靛酚滴定法o维
2、生素维生素C: 强的复原性强的复原性o将染料将染料2.6-D 复原成无色的复原成无色的2.6-Do2.6-二氯酚靛酚二氯酚靛酚:强的氧化性强的氧化性o中性中性/碱性碱性: 蓝色蓝色o酸性酸性:红色红色复原型复原型抗坏血酸抗坏血酸氧化型氧化型2.6-2.6-二氯酚靛酚二氯酚靛酚 红色红色复原型复原型2.6-2.6-二氯酚靛酚二氯酚靛酚 无色无色氧化型氧化型2.6-2.6-二氯酚靛酚蓝色二氯酚靛酚蓝色 O =C |HO C HO C | H C |HO CH | CH2OHO O =C | O = C | O = C | H C |HO CH | CH2OHO脱氢脱氢抗坏血酸抗坏血酸=NO-Cl
3、|O= |Cl=NOHCl |O= |ClNOHCl |HO |Cl |HH+OH-三、操作步骤三、操作步骤1. 1. 样品提取样品提取 2. 2.染料标定及样品中染料标定及样品中VcVc测定测定试剂ml空白染料标定1染料标定2样品测定1样品测定22%草酸100000规范Vc 0101000样品提取液00010102, 6-D滴定值y1Vy0l y1- y1-滴定空白所用染料滴定空白所用染料mlml数数l y0- y0-滴定样品所用染料滴定样品所用染料mlml数数l A-1mL A-1mL染料溶液相当的抗坏血酸的染料溶液相当的抗坏血酸的mgmg数数四、结果计算样品重样品重(g) 1001001
4、0抗坏血酸含量抗坏血酸含量mg/100g mg/100g 鲜重鲜重 = =y0-y1A从上述标定求出从上述标定求出五、本卷须知1. Vc1. Vc不稳定,在空气中易被氧化,研磨时,尽能够要快,不稳定,在空气中易被氧化,研磨时,尽能够要快,以减少以减少VcVc的氧化。的氧化。2. 2% 2. 2% 草酸可以有效抑制草酸可以有效抑制VcVc氧化酶活性。假设用样品含有大氧化酶活性。假设用样品含有大量量Fe2+Fe2+,可用,可用8%8%醋酸溶液提取,因在醋酸溶液提取,因在2%2%草酸中草酸中Fe2+ Fe2+ 仍仍可以复原可以复原2,6-D, 2,6-D, 改用改用8%8%醋酸溶液提取,醋酸溶液提取
5、,Fe2+Fe2+不会很快与不会很快与染料起作用。染料起作用。3. 3.维生素维生素C C提取时要避光、防止与铜铁接触,以免提取时要避光、防止与铜铁接触,以免VcVc氧化。氧化。4. 样品提取液定容时假设泡沫太多,可加几滴乙醚或样品提取液定容时假设泡沫太多,可加几滴乙醚或辛酸、丁醇消除泡沫后再定容。辛酸、丁醇消除泡沫后再定容。5. 当样品本身带有颜色时,可以用白陶土脱色。当样品本身带有颜色时,可以用白陶土脱色。6. 滴定时间普通不超越滴定时间普通不超越2分钟,滴定终点以淡红色存分钟,滴定终点以淡红色存在在30秒为准。由于样品中某些杂质亦能复原秒为准。由于样品中某些杂质亦能复原2,6-D,但速度较但速度较Vc慢,假设滴定速度过慢,其它物质也会慢,假设滴定速度
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