肯定列表药品检测方法

1、肯定列表药品检测方法2，4，5涕检测方法   1仪器设备 带电子捕获检测器的气相色谱仪及气相色谱-质谱仪。 2. 试剂 除下列试剂外,使用附录2所列试剂。 乙腈：取300 mL乙腈，用磨口减压浓缩器进行浓缩，除去乙腈；残留物中加5mL正己烷溶解，取其5L用带电子捕获器的气相色谱进行检测，色谱中除正己烷的峰外，不得出现比2×1011g BHC更高的峰。 丙酮：取300 mL丙酮，用磨口减压浓缩器进行浓缩，除去丙酮；残留物中加5mL正己烷溶解，取其5L用带电子捕获器的气相色谱进行检测，色谱中除正己烷的峰外，不得出现比2×1011g BHC更高的峰。

2、 乙醚：取300 mL乙醚，用磨口减压浓缩器进行浓缩，除去乙醚；残留物中加5mL正己烷溶解，取其5L用带电子捕获器的气相色谱进行检测，色谱中除正己烷的峰外，不得出现比2×1011g BHC更高的峰。 氯化钠：特级，如含有对该农药等成分物质分析有干扰作用的物质时，用正己烷等溶剂洗涤干净后再用。 色谱用合成硅酸镁：将柱色谱用合成硅酸镁（粒径150250m），130加热处理12小以上，放干燥器中冷却。 硅藻土：化学分析用硅藻土 乙酸乙酯：取300 mL乙酸乙酯，用磨口减压浓缩器进行浓缩，除去乙酸乙酯；残留物中加5mL正己烷溶解，取其5L用带电子捕获器的气相色谱进行检测，色谱中除正己烷的峰外

3、，不得出现比2×1011g BHC更高的峰。 丁酯化试剂：取10三氟化硼乙基络合物溶解于25 mL正丁醇中。 正己烷：取300 mL正己烷，用磨口减压浓缩器进行浓缩至5mL，取其5L用带电子捕获器的气相色谱进行检测，色谱中除正己烷的峰外，不得出现比2×1011g BHC更高的峰。 水： 蒸留水, 如含有对该农药等成分物质分析有干扰作用的物质时，用正己烷等溶剂洗涤干净后再用。 无水硫酸钠：特级, 如含有对该农药等成分物质分析有干扰作用的物质时，用正己烷等溶剂洗涤干净后再用。 甲醇: 取300 mL甲醇，用磨口减压浓缩器进行浓缩，除去甲醇；残留物中加5mL正己烷溶解，取其5L用

4、带电子捕获器的气相色谱进行检测，色谱中除正己烷的峰外，不得出现比2×1011g BHC更高的峰。 3标准品 2,4,5涕：含2,4,5涕98以上，熔点为156。 4试验溶液的制备 a 提取方法 谷类、豆类和种子类 将样品粉碎，过420m标准筛；取10.0g已粉碎的样品，加20mL水，静置2小时。加入100mL丙酮、5mL 4mol/L的盐酸，均质3分钟后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入50mL丙酮，均质3分钟后，按上述同样操作，合并滤液于减压浓缩器中，40以下浓缩至约30mL。 将其移入预先注入100mL 10氯化钠溶液的300mL分液漏斗

5、中。用100mL 乙酸乙酯洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶，合并洗液于上述分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙酸乙酯层移入300mL三角瓶中。水层中加入50mL乙酸乙酯，按上述同样操作，合并乙酸乙酯层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL乙酸乙酯洗涤三角瓶，以此洗液洗涤滤纸上的残留物，重复操作二次。合并两次洗液于减压浓缩器中，40以下浓缩至约1 mL，在室温下用氮气流进一步吹干。 残留物中加入30mL正己烷，移入100 mL分液漏斗中。加入30 mL乙腈饱和正己烷，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙腈层移入200 mL分液漏斗

6、中。正己烷层中加入30 mL正己烷饱和乙腈，按上述同样操作，反复操作二次，合并乙腈层于上述分液漏斗中。加入50mL乙腈饱和正己烷，轻轻振荡混合后，静置，乙腈层移入磨口减压浓缩器中，40以下浓缩至约1 mL，在室温下用氮气流进一步吹干。 水果、蔬菜、末茶和啤酒花 水果和蔬菜：准确称取约1kg样品，必要时定量加入适量的水，搅碎混合均匀后，称取相当于20.0g样品的量。 末茶：称取5.00g样品，加入水20mL，放置2H。 啤酒花：将样品粉碎后，称取其5.00g，加水20mL，放置2小时。 加入100mL丙酮和5mL 4mol/L盐酸，搅拌3分钟后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸抽滤至磨后减压浓缩器中，

7、取出滤纸上的残留物，加入50mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，合并滤液于减压浓缩器中，40以下浓缩至约30mL。 将其移入预先注入100mL 10氯化钠溶液的300mL分液漏斗中。用100mL 乙酸乙酯洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶，合并洗掖于上述分液漏斗中，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙酸乙酯层移入300mL三角瓶中。水层中加入50mL乙酸乙酯，按上法同样操作，合并乙酸乙酯层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL乙酸乙酯洗涤三角瓶，以此洗液洗涤滤纸上的残留物，重复操作二次。合并二次洗液于减压浓缩器中，40以下浓缩至约1 m

8、L，在室温下用氮气流进一步吹干。 末茶以外的茶 将9.00g样品浸泡于540 mL 100水中，室温下放置5分钟后，过滤，移取360mL冷却后滤液于500mL三角瓶中。加入18g氯化钠和4mol/L的盐酸，调节pH1以下。将其移入预先注入100mL 乙酸乙酯的1000mL分液漏斗中，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙酸乙酯层移入300mL三角瓶中。水层中加入100mL乙酸乙酯，按上述同样操作，合并乙酸乙酯层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL乙酸乙酯洗涤三角瓶，以此洗液洗涤滤纸上的残留物，重复操作二次。合并二次洗液于减压浓缩器中

9、，40以下浓缩至约1 mL，在室温下用氮气流进一步吹干。 b 水解 在提取方法所得的残留物加入20mL甲醇溶解，移入100mL茄型瓶中，加入10mL1.5molL氯化钠溶液。装上回流冷却器，在80水浴加热30分钟后，放冷。将其移入磨口减压浓缩器中，40以下除去大部分甲醇。残留物用玻璃过滤器（孔径标号为G3）抽滤，滤液移入300mL分液漏斗（I）中；用少量丙酮和水洗涤玻璃过滤器上的残留物，合并洗液于上述分液漏斗中。加入50mL乙醚和100mL 10氯化纳溶液，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，水层移入300mL分液漏斗（II）中。加入4mol/L盐酸调节pH1以下，加入50mL乙酸乙酯，用振荡器激

10、烈振荡5分钟后，静置，乙酸乙酯层移入三角瓶中。水层中加入50mL乙酸乙酯，按上述同样操作，合并乙酸乙酯层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL乙酸乙酯洗涤三角烧瓶，以此洗液洗涤滤纸上的残留物，合并洗液于减压浓缩器中，40以下浓缩至约1 mL。 c 丁酯化 将b 水解所得的溶液转入20mL茄型瓶中，室温下用氮气流进一步吹干后，加入1mL丁酯化试剂。装上回流冷却器，90水浴加热30分钟后，放冷。将其移入预先注入50mL 10氯化钠溶液和50mL正己烷的200mL分液漏斗中，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，正己烷层移入200mL三角瓶中

11、。水层中加入50mL正己烷，按上述同样操作，合并正己烷层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用10mL正己烷洗涤三角烧瓶，以此洗液洗涤滤纸上的残留物，合并洗液于减压浓缩器中，40以下浓缩至约2 mL。 d 净化方法 在内径10mm，长300mm的色谱管中注入5g悬浮在正己烷中的柱色谱用合成硅酸镁，其上面再加入约5g无水硫酸钠,放出正己烷至柱上端留有少量正己烷。柱中注入c 丁酯化所得的溶液后，注入50ml乙醚：正己烷（119）混合溶液,弃去流出液。再注入150mL乙醚：正己烷（317）混合溶液，收集流出液于磨口减压浓缩器中，40以下浓缩至约

12、1 mL，在室温下用氮气流进一步吹干。残留物中加入正己烷溶解，准确至10 mL，此为试验溶液。 5操作方法 a 定性试验 按下列操作条件进行试验，试验结果应与标准品按4.试验溶液的制备中C 丁酯化同样操作所得的结果一致。 操作条件 柱：内径0.25mm，长30石英毛细管，涂布0.25m厚气相色谱用5苯基-甲基硅酮，老化。 柱温：在50保持1分钟，此后毎分钟升温25。到达125后，毎分钟升温10，到300后保持5分钟。 进样器温度：260 检测器温度：300 气体流量：以氮气或氦气作载气。调整使（2，4，5-三氯苯氧基）乙酸正丁酯约15分钟时流出。 b 定量试验 根据与a 定性试验相同操作条件所

13、得的试验结果，峰高法或峰面积法定量。 c 确证试验 按照与b 定量试验相同的操作条件，用气相色谱-质谱仪测定。试验结果应与标准品按4.试验溶液的制备中C 丁酯化相同操作所得的结果一致。此外，必要时用峰高法或峰面积法进行定量。 氯磺隆和甲磺隆检测方法   1分析目标化合物农药等成分物质 分析目标化合物氯磺隆 氯磺隆甲磺隆 甲磺隆2仪器设备带紫外分光光度检测器的高效液相色谱仪。3试剂使用附录2所列试剂。4标准品氯磺隆：含氯磺隆99以上，熔点174178。甲磺隆：含甲磺隆99以上，熔点159162。5试验溶液的制备a 提取方法 谷类和种子类样品粉碎通过420m标准网筛后

14、，称取其10.0g，加入20mL水，放置2小时。加入100mL丙酮，搅拌3分钟后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸，抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入50mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，合并滤液于减压浓缩器中，40以下浓缩至约30mL。将其移入预先加入100mL 10氯化钠溶液和1mL 0.5mol/L 盐酸的300mL 分液漏斗中。用100mL 乙酸乙酯洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶，合并洗液于上述分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5 分钟后，静置，乙酸乙酯层移入300mL 三角瓶中。水层中加入50mL 乙酸乙酯，按上述同样操作，合并乙酸乙酯层于上述三角瓶中，加入适量无水硫酸钠，不时摇

15、动、混合，放置15 分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL 乙酸乙酯洗涤三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上残留物，重复操作2 次。合并2 次洗涤液于减压浓缩器中，40以下除去乙酸乙酯。残留物中加入30mL正己烷，转移到100mL分液漏斗中。加入30mL正己烷饱和乙腈，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙腈层移入200mL分液漏斗中。正己烷层加入30mL正己烷饱和乙腈，按上述同样操作2次，合并乙腈层于上述分液漏斗中。加入30mL乙腈饱和正己烷，轻摇混匀后，静置，乙腈层移入磨口减压浓缩器中，40以下除去乙腈。残留物中加入2mL丙酮：正己烷(1：4)混合溶液溶解。 水果和蔬菜准确称取约1kg样品，必要时

16、定量加入适量水，搅碎混合均匀后，称取相当于20.0g样品的量。加入100mL丙酮，搅拌3分钟后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸，抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入50mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，合并滤液于减压浓缩器中，40以下浓缩至约30mL。将其移入预先加入100mL 10氯化钠溶液和1mL 0.5mol/L 盐酸的300mL 分液漏斗中。用100mL 乙酸乙酯洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶，合并洗液于上述分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5 分钟后，静置，乙酸乙酯层移入300mL 三角瓶中。水层中加入50mL 乙酸乙酯，按上述同样操作，合并乙酸乙酯层于上述三角瓶中。加入适量无水

17、硫酸钠，不时摇动、混合，放置15 分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL 乙酸乙酯洗涤三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上残留物，重复操作2 次。合并2 次洗涤液于减压浓缩器中，40以下除去乙酸乙酯。残留物中加入2mL 丙酮：正己烷(1：4)混合溶液溶解。b 净化方法 硅胶柱色谱法硅胶小柱(690mg)中注入10mL丙酮：正己烷(1：4)混合溶液，舍弃流出液。柱中注入a 提取方法所得的溶液后，注入10mL丙酮：正己烷(1：4)混合溶液，弃去流出液。再注入5mL丙酮：正己烷(1：1)混合溶液，收集流出液于磨口减压浓缩器中，40以下除去丙酮和正己烷。残留物中加入2mL丙酮：正己烷(3：1)混合溶液溶解

18、。 合成硅酸镁柱色谱法合成硅酸镁小柱(900mg)中注入10mL丙酮：正己烷(3：1)混合溶液，舍弃流出液。柱中注入硅胶柱色谱法所得的溶液后，注入15mL丙酮：正己烷(3：1)混合溶液，弃去流出液。再用20mL丙酮：甲醇(9：1)混合溶液，收集流出液于磨口减压浓缩器中，40以下除去丙酮和甲醇。残留物中加入水：甲醇(1：1)混合溶液溶解，准确至1mL，此为试验溶液。6操作方法a 定性试验按下列的操作条件下进行试验，试验结果应与标准品的一致。操作条件柱填充剂：十八烷基甲硅烷基化硅胶（粒径5m）。柱：内径4.6mm，长150mm不锈钢管。柱温：45。检测器：波长236nm。流动相：水：甲醇：乙酸（1

19、1：9：0.2）混合溶液，调整流速使甲磺隆约9分钟流出。b 定量试验根据与a 定性试验相同操作条件所得的实验结果，峰高法或峰面积法定量。7定量限氯磺隆：0.01 mg/kg甲磺隆：0.01 mg/kg8注意事项提取操作中加0.5mol/L盐酸酸化后，应迅速进行提取（转移提取至有机溶剂层）。另外，净化操作时，事先制作测试曲线,确认农药的溶出组分。9参考文献无。10类型A螺旋霉素检测方法   1分析目标化合物螺旋霉素，新螺旋霉素2、仪器设备带紫外分光光度检测器的高效液相色谱仪。3、试剂除下列试剂外，使用附录2所列试剂。强酸性阳离子交换树脂小柱（500mg）：在内径89

20、mm的聚乙烯管上填充500mg丙基苯磺酸甲硅烷基化硅胶或具有相同分离特性的其他物质。继代保存用培养基：使用由胨、肉汤、氯化钠、琼脂等组成的培养基，检査用平板：在800mL加温溶解后保持55的试验用培养基中，加入200mL试验菌液，混合均匀后。分别注入8mL于内径85mm的培养皿中，水平保持至凝固。试验菌液：在増殖用培养基中接种用继代保存用培养基继代培养的Micrococcusluteus ATCC 9341菌株，在3518小时培养的3代继代，3 代内的培养原液作为试验菌液。试验用培养基：使用由肉汤、酪蛋白氨基酸、可溶性淀粉、琼脂等组成的培养基。増殖用培养基：使用由胨、肉汤、氯化钠等组成的培养基

21、。圆盘：使用直径10mm，厚1.5mm 的牛津杯。磷酸缓冲液（pH2.5）：将7.80g磷酸二氢钠溶解在1000mL水中，用磷酸调节pH2.5。磷酸缓冲液（pH3.0）：将7.80g磷酸二氢钠溶解在1000mL水中，用磷酸调节pH3.0。4标准品螺旋霉素：含螺旋霉素99以上，熔点为134137。新螺旋霉素：含新螺旋霉素93以上，熔点为119120。5试验溶液的制备a 肌肉、肝脏和肾脏： 提取方法肌肉：尽可能除去脂肪层，搅碎混合均匀后，称取其5.00g。肝脏和肾脏：搅碎混合均匀后，称取其5.00g。加入35mL甲醇：1.2偏磷酸（1：1）混合溶液，搅拌均匀后，以每分钟3000转离心分离10分钟，

22、脱脂棉过滤。 净化方法（I）牛和鸡在强酸性阳离子交换树脂小柱（500mg）中顺次加入3mL甲醇和3mL水，弃去流出液。柱中注入 提取方法所得的溶液后，顺次注入3mL甲醇：磷酸缓冲液（pH3.0）（9：1）混合溶液、5mL水和3mL 0.1 molL磷酸氢二钾溶液，弃去流出液。注入10mL甲醇：0.1 molL磷酸氢二钾溶液（9：1）混合溶液，收集流出液于磨口减压浓缩器中，40以下除去甲醇和水。残留物中加入1.0mL乙腈：0.05molL磷酸氢二钾溶液（3：7）混合溶液溶解，此为试验溶液。（II）猪在强酸性阳离子交换树脂小柱（500mg）中顺次加入3mL甲醇和3mL水后，弃去流出液。柱中注入 提

23、取方法所得的溶液后，顺次加入3mL甲醇：磷酸缓冲液（pH3.0）（9：1）混合溶液、5mL水和3mL 0.1 molL磷酸氢二钾溶液，弃去流出液。加入10mL甲醇：0.1 molL磷酸氢二钾溶液（9：1）混合溶液，收集流出液于磨口减压浓缩器中，40以下除去甲醇和水。残留物中加入1.0mL0.05 molL磷酸氢二钾溶液溶解，此为试验溶液。b、脂肪 提取方法脂肪：尽可能除去肌肉层，搅碎混合均匀后，称取其5.00g。加入35mL甲醇：0.4偏磷酸（1：1）混合溶液，搅拌均匀后，以每分钟3000转离心分离10分钟，脱脂棉过滤。 净化方法采用a 肌肉、肝脏和肾脏中净化方法。c、奶 提取方法称取10.0

24、g样品，加入35mL甲醇：1.2偏磷酸（1：1）混合溶液，用振荡器激烈振荡5分钟后，以每分钟3000转离心分离10分钟，脱脂棉过滤。 净化方法采用a 肌肉、肝脏和肾脏净化方法中（I）牛和鸡的方法。d 鱼贝类 提取方法带壳的贝类：除去壳，搅碎混合均匀后，称取其5.00g。其它鱼贝类：搅碎混合均匀后，称取其5.00g。加入35mL甲醇：1.2偏磷酸（1：1）混合溶液，搅拌均匀，以每分钟3000转离心分离10分钟，脱脂棉过滤。 净化方法采用a 肌肉、肝脏和肾脏净化方法中（I）牛和鸡的方法。6、操作方法。a 牛、鸡、奶和鱼贝类 定性试验按下列操作条件进行试验，试验结果应与标准品的一致。操作条件柱填充剂

25、：十八烷基甲硅烷基化硅胶。柱：内径4.06.0mm、长150mm不锈钢管。柱温：40检测器：波长235nm。流动相：乙腈：磷酸缓冲液（pH2.5）（1：3）混合溶液。调整流速使螺旋霉素约10分钟流出。 定量试验根据与定性试验相同的试验条件所得的试验结果，峰高法或峰面积法定量。b、猪 定量试验将试验溶液吸附在园盘中，置于检测用平板上，在35培养18小时，与螺旋霉素标准品比较抑菌圈的直径进行定量。 确证试验按照与a 牛和鸡 定性试验相同的操作条件进行试验，试验结果应与标准品的一致。 7定量限牛的肌肉、脂肪、肝脏和肾脏：0.05mg/kg（分别以螺旋霉素和新螺旋霉素计）。鸡的肌肉、脂肪、肝脏和肾脏：

26、0.05mg/kg（分别以螺旋霉素和新螺旋霉素计）。奶和鱼贝类：0.05 mg/kg（分别以螺旋霉素和新螺旋霉素计）。猪的肌肉、脂肪、肝脏和肾脏：0.1mg/kg（以螺旋霉素计）。8注意事项(1)标准溶液的配制螺旋霉素标准品溶解在甲醇中作为螺旋霉素标准原液（螺旋霉素 1,000mgL）。本标准原液保存在04，3个月内稳定。新螺旋霉素标准品溶解在甲醇中作为新螺旋霉素标准原液（新螺旋霉素 1,000mgL）。本标准原液保存在04，3个月内稳定。用0.05molL磷酸氢二钾溶液递减稀释螺旋霉素和新螺旋霉素标准原液，配制成绘制标准曲线用的标准溶液。(2) 其它用本检测方法检出螺旋霉素时，最好用带紫外可

27、见多波长检测器和质量检测器的高效液相色谱仪确证。9参考文献无10.类型A咪草啶酸铵检测方法   1分析目标化合物咪草啶酸、咪草啶酸铵2仪器设备带紫外分光光度检测器的高效液相色谱仪及液相色谱-质谱仪。3试剂除下列试剂外，使用附录2所列试剂。盐酸溶液：500mL水中加入1molL 盐酸，调节pH2.5。4标准品咪草啶酸：含咪草啶酸97以上，熔点为165167。5试验溶液的制备a 提取方法将样品粉碎，通过420m标准网筛后，称取其10.0g。加入100mL 0.02mol/L盐酸：甲醇(2：3)混合溶液。搅拌3分钟后,用涂布1cm厚硅藻土的滤纸抽滤于磨口减压浓缩器。取出

28、滤纸上的残留物，加入50mL0.02mol/L盐酸和甲醇(2：3)混合溶液，搅拌3分钟后,按上述同样操作，合并滤液于上述减压浓缩器，50以下浓缩为约10mL。加入0.5g乙酸锌, 10秒内平稳摇匀，放置5 分钟后，用玻璃纤维滤纸抽滤。用10mL水洗涤减压浓缩器的茄型瓶，以此洗液洗涤滤纸上的残留物，抽滤，全部溶液合并于100mL的三角瓶中。b 净化方法 十八烷基甲硅烷基化硅胶柱色谱法十八烷基甲硅烷基化硅胶小柱(1,000mg)中注入5mL甲醇，弃去流出液。再注入5mL水，弃去流出液。柱中注入a 提取方法所得溶液后，注入5mL盐酸溶液，弃去流出液。再注入10mL盐酸：甲醇(1：1)混合溶液，收集流

29、出液于50mL三角瓶中。 苯磺酰基丙基甲硅烷基化硅胶柱色谱法苯磺酰基丙基甲硅烷基化硅胶小柱(1,000mg) 中注入5mL甲醇，弃去流出液。再注入5mL盐酸溶液，弃去流出液。柱中注入十八烷基甲硅烷基化硅胶柱色谱法所得的溶液后，注入5mL甲醇，弃去流出液。再注入30mL饱和氯化钾-甲醇溶液，收集流出液于100mL磨口减压浓缩器中。在40以下除去甲醇。残留物中加入10mL盐酸溶液溶解。 环己基甲硅烷基化硅胶柱及酰胺丙基甲硅烷基化硅胶柱色谱法环己基甲硅烷基化硅胶小柱(1,000mg)中注入5mL甲醇，弃去流出液。再注入5mL盐酸溶液，弃去流出液。注入苯磺酰基丙基甲硅烷基化硅胶柱色谱法所得溶液，弃去流

30、出液后，继续抽约1分钟，除去水分。另外，酰胺丙基甲硅烷基化硅胶小柱(1,000mg)中注入5mL甲醇，弃去流出液。此柱的上端连结环己基甲硅烷基化硅胶小柱，注入5mL甲醇，弃去流出液后，分离开环己基甲硅烷基化硅胶小柱。酰胺丙基甲硅烷基化硅胶小柱注入5mL甲醇，弃去流出液。再注入15mL氨水：甲醇(1：199)混合溶液，收集流出液于50mL磨口减压浓缩器中，在40以下除去甲醇。残留物中加入1mL甲醇和25mL乙腈溶解，移入100mL分液漏斗中，加入25mL乙腈饱和正己烷，激烈振荡5分钟。乙腈层移入磨口减压浓缩器中，40以下除去乙腈。残留物中加入水：甲醇(3：2)混合溶液溶解，准确至2mL，此为试验

31、溶液。6操作方法a 定性试验按下述操作条件进行试验，试验结果必须与标准品的一致。操作条件柱填充剂：十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒径5m)。柱：内径4.06.0mm，长250mm不锈钢管。柱温： 40检测器： 波长254nm流动相：甲醇：0.01molL磷酸(2：3)混合溶液。调整流速使咪草啶酸约18 分钟流出。b 定量试验根据与a 定性试验相同的操作条件所得的试验结果，峰高法或峰面积法定量，求得咪草啶酸的含量。再根据下式，求得咪草啶酸铵的含量。咪草啶酸铵的含量(mg/kg)咪草啶酸的含量(mg/kg)×1.06c 确证试验按照下列操作条件对5. 试验溶液的制备 b 净化方法所得的试验溶液

32、用液相色谱-质谱仪测定。试验结果必须与标准品的一致。此外，必要时用峰面积法进行定量。操作条件柱填充剂：十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒径5m)。柱： 内径2.0mm，长150mm的不锈钢管。柱温： 40流动相：水：甲醇(3：2)混合溶液，调整流速使咪草啶酸约6 分钟流出。7定量限0.01 mg/kg8注意事项对咪草啶酸进行定量，其含量乘以系数换算成咪草啶酸铵的含量，此为咪草啶酸铵的分析值。9参考文献无10类型A咪唑磺隆和苄嘧磺隆检测方法   1分析目标化合物农药等成分物质 分析目标化合物咪唑磺隆 咪唑磺隆苄嘧磺隆 苄嘧磺隆2仪器设备带紫外分光光度检测器的高效液相色谱仪。

33、3试剂使用附录2所列试剂。4标准品咪唑磺隆：含咪唑磺隆99以上，熔点为183184。苄嘧磺隆：含苄嘧磺隆99以上，熔点为181。5试验溶液的制备a 提取方法将样品粉碎，通过420m标准网筛后，称取其10.0g，加入20mL 0.1mol/L盐酸，放置2小时。加入100mL丙酮, 搅拌3分钟后,用涂布1cm厚硅藻土的滤纸抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入50mL丙酮，搅拌3分钟后,按上述同样操作，合并滤液于上述减压浓缩器中，40以下浓缩为约30mL。将其移入预先加入100mL 10氯化钠溶液的300mL分液漏斗。用100mL乙酸乙酯洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶，合并洗液于上述分液漏斗

34、中，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙酸乙酯层移入300mL的三角瓶中。水层中加入50mL乙酸乙酯，与上述同样操作，合并乙酸乙酯层于上述三角瓶。加入适量无水硫酸钠，不时振摇、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL乙酸乙酯洗涤三角瓶，以此洗液洗涤纸上的残留物，重复操作2次。合并2次洗涤液于减圧浓缩器中，在40以下除去乙酸乙酯。残留物中加入30mL正己烷，移入100mL分液漏斗中。加入30mL正己烷饱和乙腈，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙腈层移入磨口减压浓缩器中。正己烷层加入30mL正己烷饱和乙腈，按上述操作方法重复操作二次，合并乙腈层于减压浓缩器中，40以下除去乙腈。残留物

35、中加入1mL丙酮溶解。b 净化方法硅胶小柱(690mg)中注入5mL丙酮，弃去流出液。柱中注入a 提取方法所得的溶液后，注入10mL丙酮，收集流出液于磨口减圧浓缩器中，40以下除去丙酮。残留物中加入乙腈溶解，准确至5mL后，用孔径0.45m滤膜过滤，此为试验溶液。6操作方法a 定性试验按下述操作条件进行试验，试验结果必须与标准品一致。操作条件填充剂：十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒径5m)。柱： 内径4.6mm，长250mm的不锈钢管。柱温： 40检测器： 波长236nm流动相： 10乙酸：乙腈(3：2)混合溶液，调整流速使苄嘧磺隆在1015分钟流出。b 定量试验根据与a 定性试验相同的操作条件所得

36、的试验结果，峰高法或峰面积法进行定量。7定量限咪唑磺隆：0.01 mg/kg苄嘧磺隆：0.02 mg/kg8注意事项无9参考文献无10类型A咪唑菌酮检测方法（畜产品）   1分析目标化合物咪唑菌酮5-甲基-5-苯基-2,4-咪唑烷二酮(以下简称MPID)2仪器设备气相色谱-质谱仪(GCMS)。3试剂除下列试剂外，使用附录2所列试剂。咪唑菌酮标准品：含咪唑菌酮99以上，熔点为137。MPID标准品：含MPID99以上。苯乙烯二乙烯共聚物柱（500mg）：在内径89mm的聚乙烯管中装填500mg苯乙烯二乙烯共聚物或具有同等分离特性的物质。4试验溶液的制备1）提取方法肌

37、肉、脂肪、肝脏、肾脏和其他可食部分：搅碎混合均匀后，称取其5.0g。奶：称取20.0g样品。加50mL乙腈、50mL乙腈饱和正己烷和10g（奶为40g）无水硫酸钠，均质3分钟后，以每分钟3000转离心分离。收集乙腈层，正己烷层及残留物中加入50mL乙腈，按上述同样均质和离心分离。所得的乙腈层合并于前面的乙腈层中，40以下浓缩，除去溶剂。残留物中加入10mL水：甲醇(3：2)混合溶液溶解。2）净化方法 苯乙烯二乙烯苯共聚物柱色谱法和活性炭柱色谱法苯乙烯二乙烯苯共聚物小柱(500mg)中分别注入5mL甲醇和5mL水，弃去流出液。活性炭小柱(500mg)中注入5mL甲醇，弃去流出液。苯乙烯二乙烯苯共

38、聚物小柱中注入1)所得的溶液后，用10mL水：甲醇(3：2)混合溶液洗涤容器，洗液注入前面的柱中，弃去流出液。接着，在苯乙烯二乙烯苯共聚物小柱下面连接活性炭小柱，注入20mL甲醇。溶出液在40以下浓缩，除去溶剂。残留物中加入5mL乙酸乙酯：正己烷(1：19)混合溶液溶解。 酰胺丙基甲硅烷基化硅胶柱色谱法酰胺丙基甲硅烷基化硅胶小柱(1000mg)中注入5mL乙酸乙酯：正己烷 (1：19)混合溶液，弃去流出液。柱中注入所得的溶液后，用5mL乙酸乙酯：正己烷 (1： 19) 混合溶液洗涤容器，洗液注入前面的柱中，重复操作3次，弃去流出液。再注入20mL乙酸乙酯：正己烷(3：7)混合溶液，收集溶出液（

39、溶出液I）。接着注入10mL丙酮：正己烷(3：7)混合溶液，弃去流出液后，注入20mL丙酮：正己烷(3： 7)混合溶液，收集溶出液（溶出液II）。溶出液I在40以下浓缩，除去溶剂，残留物中加入丙酮溶解，准确至1mL作为咪唑菌酮的试验溶液。溶出液II同样浓缩，除去溶剂，残留物中加入丙酮溶解，准确至1mL作为MPID的试验溶液。5标准曲线的制作将咪唑菌酮标准品配制成0.12mg/L的丙酮溶液数点，将MPID标准品配制成0.050.5mg/L的丙酮溶液数点，分别注入2L于GCMS中，用峰高法或峰面积法绘制成标准曲线。6定量注入2L试验溶液于GCMS中，按5的标准曲线求出咪唑菌酮及MPID的含量。按下

40、式求出包括MPID的咪唑菌酮含量。咪唑菌酮(包括MPID)的含量(mg/kg)AB×1.64A：咪唑菌酮的含量(mg/kg)B：MPID的含量(mg/kg)7测定条件检测器：GCMS色谱柱：50三氟丙基甲基硅酮，内径0.25mm，长30m，膜厚0.25m。柱温：100(1分钟)20/分钟260(10分钟)进样器温度：250。载气：氦气。离子方式(电压)：EI(70 eV)主离子(m/z)：咪唑菌酮：311、268、238 ；MPID：175、104保留时间标准：咪唑菌酮约8.4分钟；MPID约7.4分钟。8定量限肌肉、脂肪、肝脏、肾脏和其他食用部分：咪唑菌酮 0.02mg/kg；MP

41、ID 0.01mg/kg。奶：咪唑菌酮 0.005mg/kg；MPID 0.003mg/kg。9注意事项1）分析值对咪唑菌酮及其代謝物MPID分别进行定量，将MPID的含量乘以系数后换算成咪唑菌酮的含量，它们的和为分析值。2）检测方法概述本方法用乙腈从样品中提取咪唑菌酮和MPID，用乙腈饱和正己烷洗净。经苯乙烯二乙烯苯共聚物小柱、活性炭小柱和酰胺丙基甲硅烷基化硅胶小柱净化后， GC/MS测定、确证。3）注意点 MPID试验溶液净化不完全时，可用硅胶小柱(1000 mg) 增加净化。操作概述如下：在用5mL丙酮：正己烷（3：17）混合溶液调湿的柱中，用5mL相同的（3：17）混合溶液负载MPID

42、组分，注入15mL相同的混合溶液洗净，用10mL乙酸乙酯：正己烷（1：1）混合溶液溶出。 咪唑菌酮及MPID的灵敏度在试验溶液注入前后发生大幅变化时，必须采取预先注入试验溶液数次，灵敏度充分稳定后进行测定等措施。 对于MPID的GCMS测定，在微量注射器和进样口会常设夹带（存储效应）。注入特别高浓度的MPID后，必须注入34次丙酮，洗净进样口，确证未检出MPID的峰后再进行试验溶液的测定。10参考文献无。11类型C(未确认)12其他对于小柱参考平成17年1月24日附厚生劳动省医药食品局食品安全部基准审查課事物联络关于食品中残留农药、饲料添加剂和兽药成分物质检测方法中分析方面的注意事项之附件。涕

43、灭威、乙硫甲威、杀线威、甲萘威、抗芽威、仲丁威和恶虫威检测方法   1分析目标化合物农药成分物质 分析目标化合物涕灭威 涕灭威乙硫甲威 乙硫甲威杀线威 杀线威甲萘威 甲萘威抗芽威 抗芽威仲丁威 仲丁威恶虫威 恶虫威2仪器设备带柱后衍生荧光检测器的高效液相色谱仪及液相色谱质谱仪。3试剂除下列试剂外，使用附录2所列试剂。荧光发生液： 在10mg邻苯二甲醛和5L 2巯基乙醇中加入0.05molL 硼酸钠溶液至100mL。磷酸缓冲液：约800mL水中加入1.75g氢氧化钠和11.7g磷酸二氢钠，溶解后，加水至1,000mL。4标准品涕灭威：含涕灭威99以上，熔点为9810

44、0。乙硫甲威：含乙硫甲威99以上，熔点为3334。杀线威：含杀线威99以上，熔点为100102。甲萘威：含甲萘威99以上，熔点为138140。抗芽威：含抗芽威99以上，熔点为9091。仲丁威：含仲丁威98以上，熔点为32。恶虫威：含恶虫威99以上，熔点为129130。5试验溶液的制备a 提取方法 谷类、豆类、水果、蔬菜、种子类、末茶和啤酒花谷类、豆类和种子类：将样品粉碎，通过420m 标准网筛后，称取其10.0g，加入20mL水，放置2小时。水果和蔬菜：准确称取约1kg样品，必要时定量加入适量的水，搅碎混合均匀后，称取相当于20.0g样品的量。末茶和啤酒花：称取20.0g样品。加入200mL丙

45、酮，搅拌3分钟后，用涂布1cm 厚硅藻土的滤纸，抽滤至磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入100mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，滤液合并于减压浓缩器中，40以下浓缩至约20mL。将浓缩液转移至预先加入200mL 5氯化钠溶液和100mL二氯甲烷(特级)的500mL分液漏斗中，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，二氯甲烷层移入500mL三角瓶中。水层中加入100mL二氯甲烷(特级)，按上述同样操作，合并二氯甲烷层于上述三角瓶中。加入适量的无水硫酸钠，不时振摇、混合，放置15分钟后，过滤至磨口减压浓缩器中。再用50mL二氯甲烷(特级) 洗涤三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物，重复操作3

46、次。合并洗涤液于减压浓缩器中，40以下浓缩约1mL，在室温下通氮气进一步吹干。残留物中加入25mL正己烷和30mL正己烷饱和乙腈溶解，转移至100mL分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙腈层移入200mL分液漏斗中。正己烷层中加入30mL正己烷饱和乙腈，按上述同样操作，重复2次，合并乙腈层于上述分液漏斗中。加入50mL乙腈饱和正己烷，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙腈层转移至磨口减压浓缩器中，40以下浓缩至约1mL，在室温下通氮气进一步吹干。残留物中加入甲醇溶解，准确至2mL。末茶以外的茶将9.00g样品浸泡于540mL 100水中，室温下放置5分钟后，过滤，移取360mL冷却的滤

47、液于500mL三角瓶中。加入4mL饱和乙酸铅溶液，振荡、混合10秒钟后，用涂布1cm 厚硅藻土的滤纸抽滤，滤液移入1,000mL分液漏斗。再用50mL丙酮洗涤上述三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物。合并洗涤液于上述分液漏斗中，加入100mL乙醚和100g氯化钠，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，将乙醚层移入300mL三角瓶。水层中加入100mL乙醚，按上述同样操作，合并乙醚层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，过滤至磨口减压浓缩器中。再用30mL乙醚洗涤三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物，重复操作3次。合并洗涤液于减压浓缩器中，40以下浓缩至约1mL，在室温下

48、通氮气进一步吹干。残留物中加入甲醇溶解，准确至2mL。b 净化方法取0.3mL a 提取方法所得的溶液，加入3mL稀盐酸，缓缓摇匀后，用孔径0.45m的膜滤器过滤，此为试验溶液。6操作方法a 定性试验 涕灭威、乙硫甲威、杀线威、甲萘威、仲丁威和恶虫威的试验按照下列操作条件进行试验。试验结果必须与同样操作条件下标准品的结果一致。操作条件柱填充剂：十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒径5m)柱： 内径3.9mm、长150mm 不锈钢管。柱温： 40检测器： 激发波长260nm ，发射波长445nm流动相：A：四氢呋喃；B：水；C：甲醇。调整流速使涕灭威约12 分钟流出。浓度梯度： 输送水：甲醇(22：3)混

49、合溶液0.1分钟后，浓度梯度从A：B(1：9)到(3：7)运行19.9 分钟。再输送四氢呋喃：水(3：7)混合溶液10分钟后，输送水：甲醇(22：3)混合溶液10 分钟。水解槽： 流动相中，注入0.05molL 氢氧化钠溶液。保持一定的注入量。水解槽温度： 80荧光反应槽：流动相中，注入荧光发生液。保持一定的注入量。 抗芽威的试验按照下列操作条件进行试验。用5试验溶液的制备中a 提取方法所得的溶液作为试验溶液，试验结果必须与同样操作条件下标准品的结果一致。操作条件柱填充剂：十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒径5m)柱： 内径4.0-4.6mm、长250mm 不锈钢管。检测器： 激发波长312nm ，发

50、射波长382nm流动相：水：甲醇：磷酸缓冲液（1：7：2）混合溶液。调整流速使抗芽威约5分钟30秒钟流出。b 定量试验根据与a 定性试验相同的操作条件下所得试验结果，峰高法或峰面积法定量。c 确证试验按照以下操作条件，进行气相色谱-质谱仪测定。用5试验溶液的制备中a 提取方法所得的溶液作为试验溶液，试验结果必须与标准品的一致。此外，必要时用峰高法或峰面积法进行定量。操作条件柱：内径0.25mm，长30m石英毛细管，涂有0.25m厚气相色谱用5%苯基-甲基硅酮，老化。柱温：60保持2分钟，此后毎分钟升温15。到180后保持3分钟。再毎分钟升温8，到210后，保持2分钟。再以毎分钟升温5，到225

51、后，毎分钟升温25，到280后，保持5分钟。进样器温度：250进样方式： 不分流气体流量：用氦气作载气，调整流速使涕灭威约5分钟流出。7定量限涕灭威： 0.005 mg/kg；乙硫甲威： 0.005 mg/kg；杀线威： 0.005 mg/kg；甲萘威：无记载；抗芽威： 0.005 mg/kg；仲丁威：0.01 mg/kg；恶虫威： 0.005 mg/kg8注意事项1) 带柱后衍生荧光检测器的高效液相色谱仪装置的构成通常如下图。2) 对于柑桔类果肉等强酸性的样品同时提取抗芽威时，加入约5g碳酸氢钠可以醚菊酯检测方法   1分析目标化合物醚菊酯2仪器设备带紫外分光光

52、度检测器的高效液相色谱仪。3试剂使用附录2所列试剂。4标准品醚菊酯：含醚菊酯99以上，熔点为3638。5试验溶液的制备a 提取方法 谷类、豆类和种子类将样品粉碎，通过420m的标准网筛后，称取其10.0g，加入10mL水,放置2小时。加入100mL丙酮，搅拌3分钟后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸，抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入50mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，合并滤液于减压浓缩器中，40以下浓缩至约30mL。将其移入预先注入100mL 10%氯化钠溶液的300mL分液漏斗中。用100mL正己烷洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶，合并洗涤液于分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5分钟后

53、，静置，正己烷层移入300mL三角瓶中。水层中加入50mL正己烷，按上述同样操作，合并正己烷层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL正己烷洗涤三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物，重复操作二次，合并两洗涤液于减压浓缩器中，40以下除去正己烷。残留物中加入30mL正己烷，移入100mL分液漏斗。加入30mL正己烷饱和乙腈,用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙腈层移入磨口减压浓缩器中。正己烷层中加入30mL正己烷饱和乙腈，按上述同样操作二次，合并乙腈层于减压浓缩器中， 40以下除去乙腈。残留物中加入5mL正己烷溶解。水果、蔬菜、末茶和啤

54、酒花水果和蔬菜：准确称取约1kg样品，必要时定量加入适量的水，搅碎混合均匀后，称取相当于20.0g样品的量。末茶：称取其5.00g，加入20mL水,放置2小时。啤酒花：搅碎混合均匀后，称取其5.00g，加入20mL水,放置2小时。加入100mL丙酮，搅拌3分钟后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸，抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入50mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，合并滤液于减压浓缩器中，40以下浓缩至约30mL。将其移入预先注入100mL 10%氯化钠溶液的300mL分液漏斗中。用100mL正己烷洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶，合并洗涤液于分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5分钟后，静

55、置，正己烷层移入300mL三角瓶中。水层中加入50mL正己烷，按上述同样操作，合并正己烷层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL正己烷洗涤三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物，重复操作二次，合并两洗涤液于减压浓缩器中，40以下除去正己烷。残留物中加入5mL正己烷溶解。末茶以外的茶将9.00g样品浸泡在540mL 100的水中，室温下放置5分钟后，过滤，移取360mL冷却后的滤液于500mL三角瓶中。加入100mL丙酮和2mL饱和乙酸铅溶液，室温下放置1小时后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸抽滤，滤液移入1000mL分液漏斗中。再用50mL丙酮洗涤滤纸上的残留物，合并洗涤液于上述分液漏斗中。加入30g氯化钠和100mL正己烷，激烈振荡混合5分钟后，静置，正己烷层移入300mL三角瓶中。水层中加入100mL正己烷，按上述同样操作，合并正己烷层于上述三角瓶中。