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文档简介

1、第一章第一章菌种的制造菌种的制造l 菌种的制造是食用菌栽培的前菌种的制造是食用菌栽培的前提和重要环节,菌种的优劣直接关提和重要环节,菌种的优劣直接关系到食用菌的产量和质量,甚至关系到食用菌的产量和质量,甚至关系到消费的成败。系到消费的成败。 l l 菌种是指经人工培育并可供进一步繁衍或栽培运用的食用菌菌丝体,经常包括供菌丝体生长的基质在内,共同组成繁衍资料。 食用菌的菌种类型主要分固体菌种和液体菌种两类。我国目前食用菌栽培中所用的菌种绝大部分为固体菌种,液体菌种尚未大面积运用。 食用菌的菌种分三级,即母种、原种和栽培种。食用菌的菌种分三级,即母种、原种和栽培种。母种是具有结实性的菌丝体纯培育物

2、,也称一级种或母种是具有结实性的菌丝体纯培育物,也称一级种或试管种。试管种。原种是由母种转接到木屑、棉籽皮、麦草、谷粒等为原种是由母种转接到木屑、棉籽皮、麦草、谷粒等为主的培育基上扩展培育而成的菌丝体纯培育物,也主的培育基上扩展培育而成的菌丝体纯培育物,也称二级种。称二级种。栽培种是由原种转接、扩展到一样或类似的培育基上栽培种是由原种转接、扩展到一样或类似的培育基上培育而成的菌丝体纯培育物,直接运用于消费,也培育而成的菌丝体纯培育物,直接运用于消费,也称三级种。称三级种。 l通常分别或购买的母种数量有限,通常分别或购买的母种数量有限,难以满足消费需求,因此,必需难以满足消费需求,因此,必需进展

3、扩展繁衍。进展扩展繁衍。一、培育基的制备一、培育基的制备一常用的母种培育基配方用量一常用的母种培育基配方用量/1000 ml 马铃薯葡萄糖琼脂培育基马铃薯葡萄糖琼脂培育基PDA 马铃薯去皮马铃薯去皮200 g, 葡萄糖葡萄糖 20 g, 琼脂琼脂 18-20 g,pH值自然。值自然。 二母种培育基的配制二母种培育基的配制 去皮马铃薯去皮马铃薯200克,切成克,切成1cm见方的小块或见方的小块或2 mm厚的薄片,加厚的薄片,加水约水约1000 ml煮沸,再用文火煮煮沸,再用文火煮2030 min,并适当搅拌,并适当搅拌,用四层或八层预湿的纱布过滤,取滤液并加水至用四层或八层预湿的纱布过滤,取滤液

4、并加水至1000 ml。 向滤液中参与琼脂和葡萄糖,小火加热,搅拌至琼脂完全溶化。向滤液中参与琼脂和葡萄糖,小火加热,搅拌至琼脂完全溶化。分装试管。分装试管。18 mm180 mm或或20 mm200 mm的玻璃试管,分的玻璃试管,分装量掌握在试管长度的装量掌握在试管长度的1/4-1/5,原那么上是摆放成斜面后,原那么上是摆放成斜面后,斜面的长度为试管长度的斜面的长度为试管长度的1/2-2/3。塞棉塞。塞棉塞。 母种培育基灭菌时,需用1.051.1 kg/cm2的压强,温度为121,灭菌坚持12130 min。母种培育基制造流程母种培育基制造流程1. 分装试管分装试管 2. 塞棉塞塞棉塞 3.

5、 打捆打捆 4. 灭菌灭菌 5. 摆斜面摆斜面二、母种的转接二、母种的转接母种转接,也称转管、母种的继代培育。母种转接,也称转管、母种的继代培育。由于分别或引进的原始母种数量有限,不能满由于分别或引进的原始母种数量有限,不能满足消费所需,因此,需进展扩展培育,通常原足消费所需,因此,需进展扩展培育,通常原始母种允许扩展转接始母种允许扩展转接次。次。母种的转管次数不宜过多,否那么会降低菌种母种的转管次数不宜过多,否那么会降低菌种的生活力,影响栽培效果。不具备条件和技术的生活力,影响栽培效果。不具备条件和技术的部门不应扩接母种。的部门不应扩接母种。接种室接种室紫外灯紫外灯 2. 日光灯日光灯 3.

6、 任务台任务台 4. 凳子凳子 5. 瓶架瓶架 6. 窗户窗户 7. 拉门拉门 8. 衣帽衣帽钩钩接种箱单位:接种箱单位:cmcm母种的转接母种的转接三培育三培育 菌种培育关键是控制好环境的温度、湿度、菌种培育关键是控制好环境的温度、湿度、空气和光线等条件,其中以温度最为重要。空气和光线等条件,其中以温度最为重要。 空气相对湿度坚持在空气相对湿度坚持在60%左右,培育室的湿度左右,培育室的湿度过低时,可适当喷水,湿度过高时,应加强过低时,可适当喷水,湿度过高时,应加强通风排湿,或向地面洒生石灰吸潮,以防杂通风排湿,或向地面洒生石灰吸潮,以防杂菌繁殖污染棉塞或培育基;同时避光并坚持菌繁殖污染棉塞

7、或培育基;同时避光并坚持空气新颖,从而使菌丝生长强壮。空气新颖,从而使菌丝生长强壮。 2-3d后,检查菌丝的生长及杂菌污染情况,后,检查菌丝的生长及杂菌污染情况,假设在远离接种块的培育基外表出现独立的假设在远离接种块的培育基外表出现独立的小菌落或奶油状小点,即为污染,应立刻淘小菌落或奶油状小点,即为污染,应立刻淘汰;汰; 普通母种经普通母种经7-10d 可长满培育基,然后用于进可长满培育基,然后用于进一步扩繁或置一步扩繁或置4冰箱中冷藏备用。冰箱中冷藏备用。 四优质母种的普通规范四优质母种的普通规范菌种纯粹,无杂菌污染。菌种纯粹,无杂菌污染。菌丝洁白浓密,气生菌丝量多。菌丝洁白浓密,气生菌丝量

8、多。菌丝不老化变色,培育基不萎缩失菌丝不老化变色,培育基不萎缩失水。水。菌龄要适宜,普通室温保藏不超越菌龄要适宜,普通室温保藏不超越15d,4下冷藏不超越下冷藏不超越3个月。个月。 菌种分别:采用无菌操作,将某种食用菌菌种分别:采用无菌操作,将某种食用菌从混杂的微生物群体中分别出来进展纯从混杂的微生物群体中分别出来进展纯培育,从而获得纯菌丝体的方法,称为培育,从而获得纯菌丝体的方法,称为菌种分别,分别所得的纯菌丝体即为原菌种分别,分别所得的纯菌丝体即为原始母种。始母种。根据分别资料的不同,菌种分别的方法可根据分别资料的不同,菌种分别的方法可分为三类,即孢子分别法、组织分别法分为三类,即孢子分别

9、法、组织分别法和基内菌丝分别法。和基内菌丝分别法。 组织分别组织分别 组织分别是指在双核菌丝的组织体上切取一组织分别是指在双核菌丝的组织体上切取一块组织,使其在培育基上萌生而获得纯菌丝块组织,使其在培育基上萌生而获得纯菌丝体的方法,属于无性繁衍。体的方法,属于无性繁衍。 组织分别法可分为子实体组织分别、菌核组组织分别法可分为子实体组织分别、菌核组织分别和菌索组织分别。织分别和菌索组织分别。 组织分别的特点组织分别的特点简单易行简单易行 组织分别取材广泛,操作简便,组织分别取材广泛,操作简便,分别胜利率高。分别得到的菌种经出菇分别胜利率高。分别得到的菌种经出菇实验后可用于消费。实验后可用于消费。

10、子实体组织分别的方法(1) 种菇的选择 (2) 接种场地的消毒 同母种的转接。留意不要熏蒸和用紫外线照射种菇。(3) 种菇的外表消毒 普通用75%酒精棉球擦拭即可。四、孢子分别 孢子是食用菌的有性繁衍单位,能自动从成熟的子实体上弹射出来。 孢子分别法是指在无菌条件下,使食用菌产生的孢子在适宜的培育基上萌生,长成菌丝体而获得纯菌种的方法。 孢子分别法的优点孢子分别法的优点1有性孢子具有双亲的遗传特性,变异性大,有性孢子具有双亲的遗传特性,变异性大,是选育新菌株和杂交育种的好资料,可供选是选育新菌株和杂交育种的好资料,可供选择优良菌株的时机较多。择优良菌株的时机较多。2孢子的生命力强,所得菌种生活

11、力旺盛。孢子的生命力强,所得菌种生活力旺盛。因此,又常被用作菌种复壮的手段。因此,又常被用作菌种复壮的手段。分别到的菌株要经过出菇实验才干确定其能否分别到的菌株要经过出菇实验才干确定其能否好的菌种。好的菌种。孢子分别分为单孢分别法和多孢分别法两孢子分别分为单孢分别法和多孢分别法两种。种。 对于异宗结合的食用菌,大都采用多孢分对于异宗结合的食用菌,大都采用多孢分别法来获得结实性菌种;别法来获得结实性菌种; 单孢分别法主要运用于菌株的挑选和杂交单孢分别法主要运用于菌株的挑选和杂交育种等任务。育种等任务。二孢子分别的方法二孢子分别的方法 孢子的采集孢子的采集 整菇插种法整菇插种法 钟罩法采集伞菌类孢

12、子钟罩法采集伞菌类孢子 三角瓶钩悬法三角瓶钩悬法 菌褶贴附法采集孢子菌褶贴附法采集孢子1. 1. 菌褶或耳片菌褶或耳片 2. 2. 试管试管 3. 3. 培育基培育基 印模法采集孢子印模法采集孢子菌褶或耳片菌褶或耳片 2. 2. 试管试管 3. 3. 培育基培育基多孢分别法多孢分别法 多孢分别法是将多个孢子接种在同一培育多孢分别法是将多个孢子接种在同一培育基上,使其萌生,自在交配而获得纯菌种基上,使其萌生,自在交配而获得纯菌种的方法。的方法。 单孢分别法单孢分别法 单孢分别法是在采集到大量孢子的根底上,单孢分别法是在采集到大量孢子的根底上,经过稀释或运用单孢分别器等方法,使孢子经过稀释或运用单

13、孢分别器等方法,使孢子之间相互分开,各个孢子单独萌生出菌丝而之间相互分开,各个孢子单独萌生出菌丝而获得纯菌种的方法,常用于杂交育种和其它获得纯菌种的方法,常用于杂交育种和其它研讨。研讨。 原种由母种扩展繁衍而成,主要用于制造栽培种,也可直接用于接种栽培袋。原种由母种扩展繁衍而成,主要用于制造栽培种,也可直接用于接种栽培袋。 原种培育基常以谷粒、棉子壳、锯木原种培育基常以谷粒、棉子壳、锯木屑、蔗渣和粪草等天然营养物质作屑、蔗渣和粪草等天然营养物质作为主料,以麸皮、玉米粉、蔗糖及为主料,以麸皮、玉米粉、蔗糖及石膏等作为辅料,培育基配方种类石膏等作为辅料,培育基配方种类很多,有通用的,也有公用的很多

14、,有通用的,也有公用的, ,不同不同种类的食用菌应选择本身适宜的原种类的食用菌应选择本身适宜的原种培育基配方。种培育基配方。 原种的制备过程普通包括配料、装瓶原种的制备过程普通包括配料、装瓶 ( (袋袋) ) 、灭菌、接种、灭菌、接种、培育等工艺流程。培育等工艺流程。一、谷粒原种一、谷粒原种 谷粒原种是指以小麦、大麦、燕麦、高粱、谷子等为主谷粒原种是指以小麦、大麦、燕麦、高粱、谷子等为主要原料制备的菌种,其中以小麦最为常用。要原料制备的菌种,其中以小麦最为常用。 谷粒菌种具有菌丝生长快、生活力强、播种速度快等优谷粒菌种具有菌丝生长快、生活力强、播种速度快等优点,但由于其营养丰富,容易污染杂菌,

15、而且还要留意防点,但由于其营养丰富,容易污染杂菌,而且还要留意防止鼠害。止鼠害。一常用谷粒原种培育基配方一常用谷粒原种培育基配方 1麦粒培育基麦粒培育基 小麦或大麦、燕麦小麦或大麦、燕麦 98% 石膏粉或碳酸钙石膏粉或碳酸钙 2% 适用于大多数食用菌原种的消费,尤其适宜适用于大多数食用菌原种的消费,尤其适宜于双孢蘑菇。于双孢蘑菇。 二培育基的制造二培育基的制造 容器容器 菌种瓶或聚丙烯塑料袋菌种瓶或聚丙烯塑料袋制造过程制造过程 选定配方选定配方 谷粒预处置谷粒预处置 谷粒清水洗净,浸泡谷粒清水洗净,浸泡12 h左右稻谷需用水浸泡左右稻谷需用水浸泡23 h 加水,煮开加水,煮开小小火再煮火再煮2

16、030 min,使谷粒充分煮透,胀而不破,掰开后无白心即可,用,使谷粒充分煮透,胀而不破,掰开后无白心即可,用水冷却后晾干外表水分。水冷却后晾干外表水分。 拌料拌料 参与石膏粉或碳酸钙并混匀参与石膏粉或碳酸钙并混匀 分装分装 均匀装料,松紧适度,约装瓶身的均匀装料,松紧适度,约装瓶身的1/23/4。 封口封口 如用棉塞,还需用牛皮纸包扎瓶口。如用棉塞,还需用牛皮纸包扎瓶口。 母母种种扩扩接接为为原原种种五培育五培育 培育室的大小和床架数量应根据消费规模来培育室的大小和床架数量应根据消费规模来定。定。留意:适温培育,对多数食用菌而言,可保留意:适温培育,对多数食用菌而言,可保 持持2325定期检

17、查杂菌。定期检查杂菌。 二、木屑原种和棉籽皮原种二、木屑原种和棉籽皮原种 阔叶树木屑或棉籽皮阔叶树木屑或棉籽皮78%,米糠,米糠或麸皮或麸皮20%,蔗糖,蔗糖1%,碳酸钙,碳酸钙或石膏粉或石膏粉1%,含水量,含水量60%。 适宜于木腐菌菌丝的生长,为木腐菌适宜于木腐菌菌丝的生长,为木腐菌通用培育基。通用培育基。木屑和棉籽皮原种的制造过程木屑和棉籽皮原种的制造过程 先将蔗糖溶于水,其它原料混合干拌,再把先将蔗糖溶于水,其它原料混合干拌,再把水溶液倒入,搅拌均匀。水溶液倒入,搅拌均匀。装瓶下松上实;装至瓶肩处;用锥形木棒在瓶或装瓶下松上实;装至瓶肩处;用锥形木棒在瓶或袋的中央打一个洞。袋的中央打一

18、个洞。 打洞有三个方面的作用,一是能提高灭菌效果;二打洞有三个方面的作用,一是能提高灭菌效果;二是处理瓶袋下部的通气问题,有利于菌丝沿孔是处理瓶袋下部的通气问题,有利于菌丝沿孔洞向下蔓延,能加速菌丝生长;三是作接种穴用,洞向下蔓延,能加速菌丝生长;三是作接种穴用,能固定住菌种块。能固定住菌种块。4. 灭菌和接种同麦粒原种灭菌和接种同麦粒原种5. 培育培育 适温下约适温下约3040 d长满瓶袋,菌丝长满长满瓶袋,菌丝长满后,再继续培育后,再继续培育35 d。 优质原种的规范:优质原种的规范:1菌种纯粹,无杂菌污染。菌种纯粹,无杂菌污染。2菌丝洁白,不变色,不吐黄水。菌丝洁白,不变色,不吐黄水。3

19、菌丝粗壮,生长势强。菌丝粗壮,生长势强。4菌丝生活力强,转接到新培育基上后,吃料快。菌丝生活力强,转接到新培育基上后,吃料快。5培育基潮湿,与瓶壁紧贴而不干缩。培育基潮湿,与瓶壁紧贴而不干缩。6菌龄要适宜,普通室温下保藏不超越菌龄要适宜,普通室温下保藏不超越15 d,不能,不能有原基和幼菇出现有原基和幼菇出现 栽培种是把原种转接到一样或类似的培育栽培种是把原种转接到一样或类似的培育基上扩展培育而成的,直接运用于消费栽基上扩展培育而成的,直接运用于消费栽培。培。运用量较大,不易长期保管,因此制种的运用量较大,不易长期保管,因此制种的时间和数量必需根据消费季节和消费规模时间和数量必需根据消费季节和消费规模方案进展。方案进展。栽培种的容器和制造过程与原种的类似或栽培种的容器和制造过程与原种的类似或一样,消费量大时需求大型灭菌锅。一样,消费量大时需求大型灭菌锅。 大型灭菌锅大型灭菌锅二、接种二、接种 普通每瓶原种可扩接栽培种

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