安捷伦1260高效液相色谱仪再确认方案分析

1、Q/TJT-QCAVR·002-2013-00安捷伦1260高效液相色谱仪再确认方案第 13 页 共13页安捷伦12600高效液相色谱仪再确认方案文件编码Q/TJT-QCAVR002-2013-00发放编号颁发部门总工室起草人日 期年 月 日审核人日 期年 月 日审核人日 期年 月 日批准人日 期年 月 日执行日期年 月 日 历次修订的原因、目的：分 发 部 门厂 长 室 总 工 室 综 合 办 生 产 部 质 量 部 储 运 组 工 程 部 制剂车间 前提车间 外包车间 G M P 办 检测中心 集采中心 5.内容5.1安装确认5.1.1仪器基本信息的确认（见表1）表1 仪器基本信

2、息确认记录仪器基本信息仪器名称Agilent1260高效液相色谱仪仪器编号制造商检测器型号检测器序列号购入时间安装时间安装地点维修服务单位名称联系电话地 址联系人备件供应单位联系电话技术资料检查名称确认结果备注Agilent1260高效液相色谱仪说明书有 无Agilent1260高效液相色谱仪采购合同有 无装箱单有 无计量检定证书（应在计量检定周期内）有 无再确认时应具备Agilent1260高效液相色谱仪SOP有 无再确认时应具备按采购合同对装箱单所列内容进行确认品名型号及序列号数量确认结果有 无有 无有 无有 无有 无有 无有 无有 无有 无检查人： 日期： 年 月 日5.1.2安装环境条

3、件的确认表2 安装环境条件的确认记录环境条件要求检查结果位置应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，排风良好符合 不符合台面仪器应平稳地放在工作台上，周围无强烈机械震动和电磁干扰源，仪器接地良好。符合 不符合环境温度15-30 符合 不符合湿度室内湿度在20%一85% RH范围内。符合 不符合空调有温湿度控制措施符合 不符合排风通风良好符合 不符合电路电源电源电压为(220士22)V，频率为(50土0.5)Hz符合 不符合接地符合 不符合不间断电源符合 不符合检查人： 日期： 年 月 日5.2运行确认严格按Agilent-1260高效液相色谱仪标准操作规程进行操作，对仪器进行运行试验，确认其运转

4、性能，并将检查结果填于下表3表3 运行确认记录操作步骤合格标准检查结果开机进入系统符合 不符合系统值设置符合 不符合打印机符合 不符合退出系统关机符合 不符合检查人： 日期： 年 月 日5.3性能确认5.3.1试验条件的确认表4 试验条件的确认记录品名要求确认结果电子分析天平最大称量不小于100g，最小分度不大于1mg。计量检定。符合 不符合容量瓶校验符合 不符合刻度吸管校验符合 不符合秒表分度值不大于0.1s符合 不符合数字温度计测量范围为0100 ，最小分度不大于0.1。符合 不符合标准物质蒸发光的标准物质 氢化可的松符合 不符合其他色谱甲醇、超纯水、分析纯丙酮、异丙醇等。符合 不符合检查

5、人： 日期： 年 月 日5.3.2性能确认的内容及可接受标准表5 性能确认的内容及可接受标准确认项目可接受标准泵流量误差流量设定值ml/min0.51.02.0测定次数333流动相收集时间/min1055泵流量设定值误差SS5%3%2%泵流量稳定性误差SR3%2%2%紫外-可见光检测器基线噪声不超过5×10-4AU基线漂移不超过5×10-3AU/h最小检测浓度萘/甲醇溶液的最小检测浓度不大于1×10-7g/ml整机性能定性测量重复性（6次测量）RSD61.5%定量测量重复性（6次测量）RSD63.0%数据处理系统能正常采集、保存、处理数据1.工作站能正常设置采集方

6、法的参数2.工作者设置的采集方法能正常保存3.压力超过限定时工作站能自动报警4.漏液时工作站能自动报警5.设置错误的参数时工作站能自动报警6.修改原有方法后重新保存时有提示7.工作站能正常编辑样品系列表和单个进样信息8.点击开始后工作站能正常进行样品分析9.样品分析的数据能正常保存10.能使用工作站对保存的数据进行处理12.能正常打印数据处理结果5.3.3 性能确认检定方法5.3.3.1泵流量设定值误差SS与泵流量稳定性误差S R的确认表6 泵流量设定值误差SS和泵流量稳定性误差SR的可接受标准流量设定值ml/min0.51.02.0测定次数333流动相收集时间/min1055允许误差泵流量设

7、定值误差SS5%3%2%泵流量稳定性误差SR3%2%2%注: 最大流量的设定值可根据用户使用情况而定。 对特殊的、流量小的仪器，流量的设定可根据用户使用情况选大、中、小三个流量，流动相的收集时间则根据情况适当缩短或延长。将仪器各部分连接好，以超纯水为流动相，分别设定0.5、1.0和2.0ml/min三个流速，在流动相排出口用事先清洗、干燥并已称重的容量瓶收集流动相，0.5ml/min时用秒表计时收集10分钟，1.0和2.0ml/min时用秒表计时收集5分钟，在分析天平上称重，每个流速测定3次，按式(1)、式(2)计算SS和SR，查水的密度表计算，即得。 SS = (Fm平Fs)/Fs×

8、;100% (1)SR = (FmaxFmin)/Fm平×100% (2)式中，FmFm（W2-W1）/(t.t),流量实测值，ml/min；W2容量瓶流动相的质量，g；W1容量瓶的质量，g；t实验温度下流动相的密度，g/cm；t 收集流动相的时间，min；Fm平同一组测量的算术平均值，ml/min；Fs流量设定值，ml/min；Fmax 同一组测量中流量最大值，ml/min；Fmin 同一组测量中流量最小值，ml/min；表7 泵流量设定值误差SS和泵流量稳定性误差SR测定记录Fs收集时间（分钟）W1W2FmFm平SsSR结论0.5105%3%符合规定不符合10101.053%2%

9、符合规定不符合552.052%2%符合规定不符合55注：实验温度 纯水的密度t：实验温度下超纯水的密度， g/cm 检查人 日期： 年 月 日5.3.3.2紫外-可见光检测器的检定5.3.3.2.1基线噪声和基线漂移的检定选用 C18色谱柱，以100%甲醇为流动相，流量为1.0ml/min，紫外检测器的波长选在254 nm，检测灵敏度调到最灵敏挡。开机预热，待仪器稳定后（约60分钟）记录基线60min，从30min内基线上读出噪音值；从60min基线上读出基线漂移值。（附图谱）由检测器的衰减倍数和测得的基线峰一峰高对应的记录仪标度，计算基线噪声，用检测器自身的物理量(AU)作单位表示NdKB式

10、中：Nd检测器基线噪声；K衰减倍数；B测得的基线峰-峰高对应的记录仪标度，AU。基线漂移用1h内基线偏离原点的值(AU/h)表示。表8 基线噪声和基线漂移的检定确认项目确认结果技术要求是否符合规定基线噪声AU5×104AU是 否基线漂移AU/h5×103AU/h是 否检查人 日期： 年 月 日5.3.3.2.2最小检测浓度在5.3.3.2.1的色谱条件下，由自动进样器或微量注射器注入1020ul，浓度为1×10-7g/ml的萘/甲醇溶液，记录色谱图，由色谱峰高和基线噪声峰-峰高，按下式计算最小检测浓度。 (按20ul进样量计算)。CL2NdCV/20H式中:CL最

11、小检测浓度，g/mL；Nd基线噪声峰-峰高，mm；C标准溶液浓度，g/mL；H标准溶液的色谱峰高，mm；V进样体积，ul。表9 最小检测浓度确认记录确认项目确认结果技术要求是否符合规定最小检测浓度萘/甲醇溶液 g/ml1×10-7g/ml是 否 g/ml检查人： 日期： 年 月 日5.3.3.3蒸发光检测器的检定5.3.3.3.1基线噪声和基线漂移的检定选用 C18色谱柱，以100%色谱乙腈为流动相，流量为1.0ml/min，漂移管温度设定为45°C，气体流速设定为1.5L/min检测灵敏度调到GAIN=1。开机预热，待仪器稳定后（约60分钟）记录基线60min，从30mi

12、n内基线上读出噪音值；从60min基线上读出基线漂移值。（附图谱）由检测器的衰减倍数和测得的基线峰一峰高对应的记录仪标度，计算基线噪声，用检测器自身的物理量(AU)作单位表示NdKB式中：Nd检测器基线噪声；K衰减倍数；B测得的基线峰-峰高对应的记录仪标度，AU。基线漂移用1h内基线偏离原点的值(AU/h)表示。表10 基线噪声和基线漂移的检定确认项目确认结果技术要求是否符合规定基线噪声MV0.5MV是 否基线漂移MV/H2MV/h是 否检查人 日期： 年 月 日5.3.3.3.2最小检测浓度在5.3.3.3.1的色谱条件下，使用氢化可的松标准品为样品，由自动进样器或微量注射器注入1020ul

13、，浓度为，记录色谱图，由色谱峰高和基线噪声峰-峰高，按下式计算最小检测浓度。 (按20ul进样量计算)。CL2NdCV/20H式中:CL最小检测浓度，g/mL；Nd基线噪声峰-峰高，mm；C标准溶液浓度，g/mL；H标准溶液的色谱峰高，mm；V进样体积，ul。表11 最小检测浓度确认记录确认项目确认结果技术要求是否符合规定最小检测浓度溶液 g/ml2.5×10-7g/ml（5ng的绝对进样量）是 否 g/ml检查人： 日期： 年 月 日5.3.3.4整机性能（定性、定量重复性）的确认将仪器各部分联接好，选用C18色谱柱，根据仪器配置的检测器，选择流动相和测量参数:紫外检测器和二极管阵

14、列检测器用100%甲醇为流动相，流量为1.0ml/min，检测波长为254nm，灵敏度选择在0.04左右，基线稳定后由自动进样器注入510ul、浓度为1×10-4g/ml的萘/甲醇标准溶液。蒸发光散射检测器选用C18色谱柱，用85%乙腈为流动相，流量为1.0ml/min，设定漂移管温度为45°C，气体流速为1.5L/min，连续测量6次，记录色谱峰的保留时间和峰面积，按下式计算相对标准偏差RSD6计算公式：式中:RSD6定性(定量) 定性(定量)测量重复性相对标准偏差;Xi第i次测得的保留时间或峰面积;X6次测量结果的算术平均值;i测量序号表12、整机性能（定性、定量重复性

15、）的确认记录标物名称萘浓度1×10-4g/ml进样量10ul波长254nm流动相甲醇流量1.0ml/min灵敏度选择序号123456平均值RSD6是否符合规定保留时间(min)是 否峰面积是 否标物名称氢化可的松浓度1×10-4g/ml进样量10ul气体流量/温度45°C 1.5L/min流动相85%乙腈流量1ml/min灵敏度选择GAIN=1序号123456平均值RSD6是否符合规定保留时间(min)是 否峰面积是 否6确认结果汇总表表13 确认结果汇总表确认项目检测结果*泵流量误差流量设定值ml/min0.51.02.0测定次数333流动相收集时间/min10

16、55泵流量设定值误差SS（±5%）（±3%）（±2%）泵流量稳定性误差SR（±3%）（±2%）（±2%）结论确认项目可接受标准确认结果紫外-可见光检测器*基线噪声不超过5×10-4AU*基线漂移不超过5×10-3AU/h*最小检测浓度萘/甲醇溶液的最小检测浓度不大于1×10-7g/ml蒸发光检测器基线噪声0.5MV基线漂移2MV/h最小检测浓度2.5×10-7g/ml（5ng的绝对进样量）*整机性能定性测量重复性RSD61.5%定量测量重复性RSD63.0%数据处理系统能正常采集、保存、处理数据1.工作站能正常设置采集方法的参数2.工作者设置的采集方法能正常保存3.压力超过限定时工作站能自动报警4.漏液时工作站能自动报警5.设置错误的参数时工作站能自动报警6.修改原有方法后重新保存时有提示7.工作站能正常编辑样品系列表和单个进样信息8.点击开始后工作站能正常进行样品分析9.样品分析的数据能正常保存10.能使用工作站对保存的数据进行处理12.能正常打印数据处理结果7.结果的处理7.1 凡带*号的确认项目全部达到规定技术要求的仪器为判为合格仪器，通过确认。7.2 只配一个检测器的仪器，任何一个带*号的项目不合格，该仪器为不合格仪器。7.3 配一个以上检测器的仪器，只要其中