HBVDNA HBVPreS及HBeAg联合检测对慢性乙型肝炎的临床价值

1、HBV?DNA HBV?PreS及HBeAg联合检测对慢性乙型肝炎的临床价值    摘 要 目的：了解HBV?DNA、HBV?PreS1及HBeAg与乙肝病毒复制的关系，分析其在慢性乙型肝炎(CHB)诊断与治疗中的临床价值。方法：采用酶联免疫吸附实验(ELISa)法和荧光定量PCR法对300例CHB患者血清进行HBV?DNA、HBV?PreS1、HBeAg及肝功能检测，分析其相互关系，评价其联合检测的价值。结果：HBV?DNA及HBV?PreS1阳性率分别为76%和73%，P>0.05，HBeAg阳性率为67%，三者一致性较好。同时HBeAg阳性组

2、及阴性组差异均无显著性，P>0.05，ALT测定结果显示，ALT正常组中PreS1及HBV?DNA阳性检出率分别为30%和85%，P<0.01。结论：HBV?DNA、HBV?PreS1、HBeAg均能反映CHB患者病毒复制情况。HBV?PreS1与肝脏功能损害密切相关，上述各项指标结合ALT联合检测可以更好的反映病毒复制的真实情况，对感染状态及病变活动性做出准确的分析，为临床提供更高的参考价值。 关键词 DNA；PreS1；乙型肝炎；病毒复制HBV感染时，宿主对HBV的免疫应答与病毒清除和发病机制有关。主要是通过CTL、Th、巨噬细胞、NK及其他细胞因子的活化，导致免疫病理损害，并

3、清除病毒而肝功能出现反复异常。对于慢性乙型肝炎(CHB)，其预后主要取决于病变活动性的程度和持续时间。抗病毒治疗的基础是抑制嗜肝DNA病毒复制，同时抑制感染细胞中靶抗原的表达，以缓解炎症应答，但HBV运行的是保守复制，在停药后又可能恢复复制1，因此，判定病毒的复制情况，对感染状态和病变活动性做出分析，在CHB的诊断与临床治疗中乃预后都具有重大意义。1 对象和方法1.1 标本来源 300份CHB患者血清均选自我院传染科肝病门诊及住院患者，其诊断均符合乙型病毒性肝炎的诊断标准及处理原则(卫生部GB15990?1995)的诊断标准。1.2 试剂和仪器 HBV?DNA采用荧光定量PCR法，试剂盒由上海

4、复星公司提供，仪器：上海复星公司SLAN自动荧光PCR仪，PreS1和HBeAg采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法双抗体夹心法，试剂分别由上海阿尔法生物技术有限公司和北京万泰生物药业有限公司提供，ALT采用全自动生化分析仪测定，试剂由上海复星长征医学科学有限公司提供，仪器：日本奥林巴斯Au?640。1.3 统计学处理 采用2检验和t检验，P<0.05为差异有显著性意义。2 结果2.1 HBV?DNA PCR定量分析及HBVPreS1?AgELISA法定性测定结果 HBV?DNA检测下限为1×103copies/ml，结果显示，在300例血清中HBV?DNA阳性者228例，HB

5、V PreS1?Ag阳性者219例。同时HBV?DNA( )/HBVPreS1?Ag(?)者24例，HBV?DNA(?)/HBV PreS1?Ag( )者6例，二者阳性检出率分别为76%和73%，差异无显著性，P>0.05。2.2 HBeAg检测结果 显示阳性者201例，阴性者99例，阳性检出率为67%，HBeAg、HBV?DNA、HBVPrS1?Ag三者检测结果关系见表1。HBeAg( )与HBeAg(?)组差异均无显著性，P0.05。表1 CHB患者血清HBeAg、HBV?DNA、HBVPreS1?Ag三者检测结果关系（略）2.3 300份血清ALT测定结果与HBV?DNA及HBVP

6、reS1关系 其中ALT(?)组HBV?DNA( )与PreS1( )间差异显著，P<0.05，见表2。表2 300份血清ALT测定结果与HBV?DNA及HBVPreS1关系（略）3 讨论HBV?DNA通常被认为是诊断乙肝、提示病毒复制的金标准2，基于PCR的高灵敏性，可以检测出极低水平的病毒复制。PreS1蛋白是因HBV基因组开放读码框S区编码合成的病毒蛋白，是构成HBV的外膜蛋白成分，它具有很高的免疫原性，不仅与病毒复制密切相关，而且在感染宿主细胞过程中起着关键作用。在急性HBV感染时，PreS1抗原及其抗体同时反映病变的活动和对病毒的清除，若HBV?PreS1?Ag持续存在将发展至

7、慢性并可能导致肝功能损害3。本研究对300例CHB患者血清同时做HBV?DNAPCR定量分析及HBVPreS1?AgELISA法定性分析。二者阳性检出率分别为76%和73.7%，无差异有显著性(P>0.05),两种检测方法有较好的一致性，同时，也发现二者存在一定的交叉性和交叉阳性现象。因此，二者可协同检测相互补充。HBeAg是HBV核心成分，是临床上判断病毒复制及传染性的重要血清标志物。本研究中，HBeAg( )组中HBV?DNA及HBVPreS1?Ag阳性率分别为88%及85%，三者具有较好的一致性。在HBeAg(?)组中，DNA及PreS1阳性检出率分别为42%及37%，提示单以HB

8、eAg判断HBV的复制情况并不全面。据文献报道，即使在抗HBe( )的慢性活动性肝病，多数仍有低水平复制，且常是病变持续活动的原因3。血清转氨酶ALT对肝细胞损害极为敏感，可以反映病变的活动性。在本研究中ALT异常组中HBV?DNA与PreS1阳性检出率分别为85%、82%，二者差异无显著性(P>0.05)。在ALT正常组中，二者阳性率分别为38%、32%，结果差异有显著性(P<0.05)，提示PreS1与肝脏功能损害的相关性优于HBV?DNA。但是，在慢性乙肝患者中，PreS1的阳性检出率随病变的发展而降低3，同时，在反映肝脏功能损害时，ALT尽管灵敏性高，但特异性不高，检测慢性病变不如急性病变3，因此，在判断CHB患者的病变活动性时，应结合多种检查及临床表现，对病毒复制情况及病变活动性做出全面分析，为治疗评估预后提供正确的信息。本组研究显示，在CHB患者对HBV?DNA、PreS1蛋白、HBeAg及肝功能检查中各有优势。在实际工作中应联合检测，互相补充，这样对CHB的诊断与治疗会有更高的临床价值。参考文献:1 骆抗先.乙型