逆转录-聚合酶链反应及放射免疫法对5785例献血员丙型肝炎病毒RNA复检分析

1、逆转录-聚合酶链反应及放射免疫法对5785例献血员丙型肝炎病毒RNA复检分析我国职业献血员尤其是单采血浆还输红细胞的献血员(单采浆血员)，丙型肝炎病毒(HCV)的感染率高达30%1。我中心收集自1995年8月1997年5月，市中心血站送我院经酶联免疫吸附试验(ELISA)检测丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)均为阴性的待输血及血浆标本5 785份，采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及放射免疫法(RIA)进行复检，现将检测结果报告如下。 对象与方法x结果一、RT-PCR检测5 785例献血员结果见表1。表1RT-PCR检测5 785例献血员HCV RNA结果日期HCV RNA全血血浆检测 例数

2、阳性例数百分比(%)检测例数阳性例数百分比(%)1995年812月7816686111996年15月7201549461996年612月1 36561589111997年15月8064734411 由表1可见，随丙型肝炎的流行和时间的推移，携带HCV的献血者(绝大多数是职业献血员)也日见增多，在所统计的近2年中我院待输血(浆)HCV RNA阳性率增长明显，全血由0.77%增长至5.83%，血浆由1.21%增长至3.20%。二、RT-PCR、RIA、ELISA三种方法检测结果对比我们随机抽检了800份血浆，用RIA法进行抗-HCV检测，再与RT-PCR及ELISA法检测结果相比较。RT-PCR法

3、共检出13例阳性标本，RIA法检出22例阳性标本，而ELISA法未检出阳性标本。由此可看出，RIA法检测的阳性例数虽比RT-PCR法检测的略高，但差异无显著性(P0.05)，RIA法检测x讨论目前筛选献血员HCV感染最常用的方法是ELISA法检测抗-HCV，但这种检测方法存在一定的漏检率，临床上也常见因输入ELISA法检测阴性血而导致受血者感染上丙型肝炎。文献报道24多次受血及接受不同献血员血液制品的患者，如血友病病人，抗-HCV阳性率可达59.0%90.0%，在英国高达85.0%。现检测抗-HCV多用的是第二代复合抗原酶联免疫试剂(ELISA-2)，检测的敏感性及特异性都较第一代酶免疫试剂略

4、高，当ELISA-2检测的S/C比值5时，91.0%被RIBA-2(重组免疫印迹试验)证实，82%为HCV RNA阳性，但人体感染HCV后抗体产生较晚，因此抗-HCV检测不能用于早期诊断，也不能对传染和病毒复制情况作出早期判断。综上所述，用抗体检测技术筛选抗-HCV不能完全杜绝携带HCV的献血员。国外在对肝炎患者的HCV RNA检测研究中亦曾有类似的发现5。RT-PCR法检测技术可直接从血清(浆)中检测HCV的核酸，具有早期诊断，特异性强和敏感性高等特点，是筛选献血员是否携带HCV最可靠的方法。我们用RT-PCR法检测的同时，又用RIA法随机抽检了800份血浆，结果表明RIA法与RT-PCR法

5、检测有较好的相关性。RIA法操作简单，计数值稳定，试剂盒价格也可被各血站接受，不失为一种很好的筛选HCV的方法。我国因输入被HCV感染的全血或血浆所导致的丙型肝炎患者逐渐增多，由表1可见，在不到二年的时间里，我院待输血(浆)HCV的阳性率由0.77%增长到5.83%，究其原因就在于检测手段落后。RT-PCR法是检测HCV的首选方法，但试剂盒价格较昂贵，操作较繁琐，且容易产生污染出现假阳性，不适合献血员的大量筛选；RIA法操作简单，试剂盒价格合理，敏感性较高。我们建议，用RIA法取代ELISA法来筛选献血员，可疑者再用RT-PCR法复检，避免漏检，从而保障受血者的安全，减少医院院内的交叉感染。)

6、作者单位：丁九立（150036哈尔滨，黑龙江省医学放射免疫检测中心）张昌秋（150036哈尔滨，黑龙江省医学放射免疫检测中心）白天旭（150036哈尔滨，黑龙江省医学放射免疫检测中心）刘江莹（黑龙江省医院检验科）参考文献1，唐时幸.河北省固定县北斜村HCV感染者三年随访研究.中华流行病学杂志，1996，17：145-147.2，杜国有.广西百色地区肝病患者及受血者HCV感染现状调查.中华流行病学杂志，1994，15：278-281.3，蔺淑梅.丙型肝炎病毒感染标志检测临床意义的研究现状.国外医学微生物学分册.1994，17：102-104.4，陈莹.丙型肝炎病毒的结构，检测及献血者丙型肝炎病毒检测的意义.国外医学输血及血液学分册，1994，17：3