乙型肝炎病毒血清前S1抗原的检测及其临床意义 (1)

1、乙型肝炎病毒血清前S1抗原的检测及其临床意义 (1)    【摘要】 目的 探讨乙型肝炎病毒与前S1抗原的相关性。方法 采用ELISA检测296例乙型肝炎病毒感染者血清中的前S1抗原。结果 在55例HBeAg阳性标本中前S1抗原阳性的47例,阳性率85.4%;178例HBeAg阴性而抗HBeAb阳性的标本中前S1抗原阳性的115例,阳性率64.6.0%;63例HBeAg和抗HBe均阴性的血清中前S1抗原阳性仅39例,阳性率61.9%;前S1抗原在血清学表达上与HBeAg的阳性符合率高达85.4%。结论 乙型肝炎病毒前S1抗原与HBeAg阳性高度相关,血清

2、前S1抗原是乙肝病毒在体内复制的可靠标志。 【关键词】 乙型肝炎病毒;前S1抗原;ELISA Determination and Clinical Significance of PreS1Ag of Hepatitis B Virus YU Mei-hua. Maternity and clild care hospital of zibo,Shandong 255029,China 【Abstract】 Objective To discuss the recationship between PreS1 and hepatitis B virus.Methods The adoption

3、 ELISA determines the PreS1 296 cases of the patients of hepatitis B virus in fected in serum.Results 47 cases of PreS1 antigen positive were found in 55 cases,its preS1 positive rate was 84.4%,115 cases of 178 were positive.Its PreS1 positive rate was64.6，only 39 cases were found in serum of the pa

4、tiens that HBeAg and Antr HBe both were negative，The prescontigen match the rate with HBeAg on the serum learn to express high amount to 85.4.Conclusion PreSl Ag of HBV is highly recated to HBeAg.PreS1 is the recicabce marker of hepatitis B virus. 【Key words】 Hepatitis B Virtus；PreSl antigen；ELISA 据

5、估计,全世界现有乙肝病毒携带者3.5亿,其中我国有1.2亿。乙型肝炎的流行不仅影响整个民族的健康素质,也给社会带来沉重的经济负担,已成为我国目前最为突出的公共卫生问题之一。目前诊断乙型肝炎最常用的指标是检测乙肝病毒(HBV)血清学标志物(广泛用于临床的为两对半)。用酶联免疫吸附试验(ELIS)法检测血清学标志物只能反映人体对HBV的免疫反应状态,不能直接反映HBV在患者体内的复制情况,也不能作为判断患者是否具有传染性的直接证据,而HBV-DNA含量是判断病毒复制活跃和具有传染性的直接和考证据但其对其试验室条件操作人员等的要求高,作为常规检验有一定困难。乙型肝炎病毒前S1抗原、前S2抗原和HBs

6、Ag三者共同构成乙型肝炎病毒外壳大蛋白。乙型肝炎病毒前S1抗原是乙型病毒肝炎的表面抗原(HbsAg)组成成分之一。有研究表明,前S1抗原的存在反映病毒活动性复制和肝损害。前S1抗原抗体系统影响病情的发展和HBV感染的预后,与HBV复制关系密切。HBV血清免疫学标志检查是目前临床分析乙肝患者病程和传染性的重要实验依据之一。本文采用ELIS法对HBV感染者血清进行检测,进一步证实血清前S1抗原与乙型肝炎血清标志物的存在关系。前S1抗原除具有增进HbsAg免疫性的作用外,也有助于HBV吸附到肝细胞的作用。酶联免疫吸附试验(ELIS)具有快速、准确、敏感性强的检测手段,应用此法对296例HBV血清五项

7、指标(简称乙肝五项)阳性者进行前S1抗原检测,并分析比较,探讨前S抗原与HBV五项标志物之间的关系及检测前S1抗原的意义。 1 材料与方法 1.1 标本来源 随机收集HbsAg阳性三种模式:HBsAg(+)HBeAg(+)HBeAb(-),HBsAg(+)HBeAb(-)HBeAb(+);HBsAg(+)HbeAg(-)HBeAb(-)血清296例,男176,女120,年龄480岁,平均42岁。HBsAg阴性136例,来自医院健康体检者。 1.2 试剂 乙型肝炎血清标志物、HBVPreS1抗原的检测采用ELIS,试剂厦门新创技术有限公司。仪器为北京生产的96GS酶标仪 1.3 方法 用ELIS

8、A法检测乙肝五项和前S1抗原,试验按相关试剂盒说明书严格操作。 1.4 统计学分析 采用统计学资料的2检验进行分析。 2 结果 2.1 HbsAg阳性血清前S1抗原的阳性率 296例HBsAg阳性血清前S1抗原阳性201,总阳性率为67%。29 6例HBsAg阳性三种模式为:HBsAg(+)HBeAg(+)HBeAb(-);HBsAg(+)HBeAg(-)HBeAb(+);HBsAg(+)HBeAg(-)HBeAb(-)。其前S1抗原阳性率分别为85.3%(47/55),64.6%(115/178),61.9%(39/63),经2检验,P>0.05,三种模式之间的差异无统计学意义。 2.

9、2 HBsAg阳性血清 HBeAg和前S1抗原的阳性率,HbsAg阳性血清HbeAg阳性55例,阳性率11.2%;前S1抗原的阳性率167例,阳性率66.2%。经2检验,P<0.01,有非常显著性差异,即前S1抗原的阳性率明显高于HbeAg阳性率。 3 讨论 3.1 前S1抗原与HbeAg的关系 HBV是一种嗜肝DNA病毒科的正嗜肝细胞病毒1。HBeAg是HBV核心内部成分,传统观点认为:HbeAg转为阴性,其传染性即变弱或无。而近几年的研究发现,HBV基因C区点突变广泛存在,吴瀟研究发现前C区和C区内的基因突变可能使HbeAg不能表达,HBV为了逃避宿方的免疫反应发生了基因突变或基因整

10、合,使作为病毒复制标志的HbeAg检测不能如实反映病毒的存在和复制。此时即使HbeAg阴性,但病毒复制仍然存在。在本文63例HBeAg阴性血清中,与HBeAg阳性一样,PreS1蛋白在HBVDNA检测阳性的标本中仍具有较高的检出率,故作PreS1能避免HBeAg变异而产生的阴性误导。有研究报道2,PreS1蛋白作为HBV外壳蛋白的主要部分,还有干细胞膜受体,具有高度的免疫原性,在HBV感染肝细胞和机体免疫应答方面其重要作用。研究发现前S蛋白出现在感染的最早期,甚至在HBVDNA出现之前,常在HbsAg消失之前消失,是病毒消失的最早迹象3。若患者血清中HBVPreS1-Ag持续阳性,则提示病情向

11、慢性发展且可能有肝功能损害。本实验检测了296例HbsAg阳性血清的HBeAg和前S1抗原。结果HBeAg的阳性率明显低于前S1抗原的阳性率,差异有非常显著性意义。本次实验HBeAg的阳性率很低,也证实了由于病毒变异科导致HBeAg阳性率低,与资料报道相符,因此认为前S1抗原作为新的HBV标志物,比HBeAg更能反映了HBV的复制情况。 3.2 HBeAg三种模式前S1抗原的阳性率虽略有差异,但无统计学意义。HBeAg阴性的两种模式,前S1抗原的阳性率同样高达64.6和61.9,说明在HBeAg阴性感染者中,有相当部分具有更高的HBV-DNA复制活力。本次实验也再次证实了由于病毒变异导致HBe

12、Ag合成障碍,出现血清学检测阴性,而病毒仍在复制,原因可能是因为HBV基因组最重要的介导部位是前S1蛋白的氨基酸(AA)2147片段,变异的病毒只要这一区段完好就有传染性。提示机体内含有HBV就有前S1抗原。还有,因HBV病毒变异导致逃逸机体对HBV的免疫应答,是病毒在体内长期存在,而造成肝细胞持续破坏和突变,成为肝癌发生的启动因子。因此,我们认为将前S1抗原作为HBV血清标志物常规检测项目之一,可避免这种因病毒变异而产生的HBeAg阴性的误导,以利于流行病学调查和临床观察病情发展的情况,同时,在条件允许时进行HBV-DNA定量检测,并将前S1抗原检测结果与HBV-DNA检测结果对照4。 3.

13、3 前S1抗原与HBeAg的关系 本次实验对204例HBeAg阳性和121例HBeAg阴性血清检测了前S1抗原,结果只在HBeAg阳性血清中检测出前S1抗原阳性,而HBeAg阴性的血清标志物,无论组成模式如何变化,前S1抗原全部为阴性5。表明前S1抗原只存在于HBeAg阳性血清中,与文献的结果相一致。但是,前S1抗原与HBeAg的阳性率并不是完全一致,原因可能与HBV表面蛋白结构中HBeAg和前S1抗原的数量有关系,也与在人体血液内存在大量的主要由HBeAg组成的HBV小球型颗粒有关。也有文献报道,因前S区具有复杂拓扑结构,导致前S1多肽为免疫源的单抗检出率较低,而使用包被针对构象前S区的单抗实际检测HBV表面大蛋白能更好地反映HBV复制情况,这一方面还有待于进一步探讨和研究。总之,目前检测前S1抗原在流行病毒学调查和临床上具有重要的意义。 参 考 文 献 1 胡亚萍,陈明洪,陈秉宇.血清乙型肝炎病毒前S1抗原检测及其他肝病慢性化的关系.浙江实用医学,2006,6(1):16. 2 赵受英,孙永祥.203份HBV无症状携带者血清