索氏抽提法测粗脂肪

1、索氏抽提法测粗脂肪作者 XX2、脂类组成及分类食品中脂肪的存在形式有游离态的， 如动物性脂肪和植物性油脂； 也有结合态的， 如天 然存在的磷脂、糖脂、脂蛋白及其某些加工食品（如焙烤食品、麦乳精等）中的脂肪与蛋白 质或碳水化合物等形成结合态。脂类是脂肪酸和醇所组成的酯类及其衍生物。 他包括脂肪、 蜡、磷脂、 糖脂、 类固醇等， 其元素组成主要是碳、氢、氧，有的还有氮、磷、硫。按脂类的化学组成，可将其分成三类。（1）单脂类单脂类大由脂肪酸与醇类所形成的脂。 脂肪酸与甘油所形成的酯称为脂肪， 脂肪酸与高 级一元醇形成的酯称为蜡。（2）复合脂类 复合脂类是有脂肪酸、醇和其他基团组成的酯。重要的复合脂类

2、有磷脂、糖脂、硫脂和 蛋白脂等。（3）脂肪伴随物指能溶于油脂的非酯物质， 因常与油脂伴随在一起而得名。 比较重要的有脂肪酸、 高级 醇类、色素和脂溶性维生素等。二、脂类的提取及样品预处理脂类不溶于水， 但能溶于有机溶剂， 脂类的测定大多是利用脂类的这一化学性质进行的。 由于脂类包括单脂类、 复合脂类和脂肪伴随物， 其化学性质及在各种食品中的存在状态不同。 因此， 对于不同种类、 性状的食品所选用的有机溶剂也不同。 对于结合态脂类或由于被食品 中其他组分所包裹不易被有机溶剂直接提取的脂类， 需要在提取前经过一定的预处理， 破坏 结合态或分解包裹组分， 使脂类游离出来。提取脂类常用的有机溶剂有乙醚

3、、石油醚、 氯仿 -甲醇等。1、提取剂的选择（ 1）乙醚对脂肪的溶解能力强，是脂肪测定的最常用的试剂。但乙醚中约含2%的水分，含水乙醚回同时食品中的非脂类物质 （如糖类等） 提取出来， 使结果偏高， 所以测定时应使 用有、 无水乙醚，待测样品应预先干燥。 乙醚只适于游离态脂肪的提取，对于复合脂类的提 取效果不是很好，对于结合态脂肪则需要先将结合态破坏，游离出脂肪，再用乙醚提取。（ 2）石油醚提取脂肪的能力低于乙醚。 用石油醚作提取剂时， 允许样品中含有微量水分， 它没有胶溶现象， 不会夹带胶态的淀粉、 蛋白质等物质。 石油醚也只适于游离态脂肪的提取。（3）氯仿 -甲醇是提取磷脂、 蛋白脂、 脂

4、蛋白的有效溶剂， 适用范围很广， 特别适用于鱼、 肉、家禽、蛋等食品中脂类的测定。2、样品的预处理（ 1）乙醚提取脂肪时，样品应预先干燥。乙醚渗入细胞中的速度与样品的含水量有关， 样品很潮湿时，乙醚不能渗入组织内部，而且样品被水分饱和后，提取脂肪的效率降低。（ 2）对于面粉及其焙烤制品，如点心、鸡蛋面等，由于脂类被淀粉包裹，乙醚不能充分 渗入样品内部， 或由于脂肪与蛋白质、 糖类形成结合脂， 不能用非极性溶剂直接提取。 因此， 需将包裹的糖类水解，或将结合脂破坏（ 3）牛乳中的脂肪并不呈溶解状态。 而是以脂肪球呈乳浊液状态存在， 它周围有一层膜，使脂肪球得以在乳中保持乳浊液的稳定状态。用浓硫酸

5、可破坏脂肪球膜，使脂肪游离出来。乳的胶体性状及脂肪球膜还可利用氨-乙醇溶液将非脂成分溶于氨-乙醇溶液中，使脂肪 游离出来。一、目的脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中，测定脂肪的含量，可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。脂肪含量的测定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和 核磁共振法等。目前国内外普遍采用抽提法，其中索氏抽提法(Soxhlet extractor method)是公认的经典方法，也是我国粮油分折首选的标准方法。通过本实验的学习，掌握索氏抽提法测定粗脂肪含量的原理和操作方法。二、原理本实验采用索氏抽提法中的残余法，即用低沸点有机溶剂(乙醚或石油醚)回流抽提， 除去样

6、品中的粗脂肪，以样品与残渣重量之差，计算粗脂肪含量。由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外，还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质，因而抽提法测 定的结果只能是粗脂肪。三、实验材料、主要仪器和试剂 1实验材料油料作物种子、中速滤纸2. 仪器：冷凝管滤纸筒抽提管虹桥管(1 )索氏脂肪抽提器(图)(2) 干燥器(直径1518cm，盛变色硅胶)(3) 不锈钢镊子(长 20cm)(4) 培养皿(5 )分析天平(感量 0.001g)(6)称量瓶(7 )恒温水浴(8) 烘箱(9) 样品筛(60 目)3. 试剂无水乙醚或低沸点石油醚(A.R.)四、操作步骤1将滤纸切成8cmX8cm，叠成一边不封口

7、的纸包，用硬铅笔编写顺序号，按顺序排列在培 养皿中。将盛有滤纸包的培养皿移入105+2C烘箱中干燥2h,取出放入干燥器中， 冷却至室温。按顺序将各滤纸包放人同一称量瓶中称重(记作a)、称量时室内相对湿度必须低于70%。2.包装和干燥在上述已称重的滤纸包中装入3g左右研细的样品，封好包口，放入105+2C的烘箱中干燥3h,移至干燥器中冷却至室温。按顺序号依次放入称量瓶中称重(记作b)。3抽提 将装有样品的滤纸包用长镊子放入抽提筒中，注入一次虹吸量的 1.67 倍的无水乙醚，使样 品包完全浸没在乙醚中。连接好抽提器各部分，接通冷凝水水流，在恒温水浴中进行抽提，调节水温在7080C之间，使冷凝下滴的

8、乙醚成连珠状（120150滴/min或回流7次/h以上），抽提至抽取筒内的乙醚用滤纸点滴检查无油迹为止（约需612h）。抽提完毕后，用长镊子取出滤纸包，在通风处使乙醚挥发（抽提室温以1225C为宜）。提取瓶中的乙醚另行回收。4称重待乙醚挥发之后，将滤纸包置于105±2C烘箱中干燥2h,放入干燥器冷却至恒重为止（记作c）。五、结果与计算粗脂肪含量（%） =（ b c）/（b a）为 式中：a：称量瓶加滤纸包重（g）b：称量瓶加滤纸包和烘干样重（g）c：称量瓶加滤纸包和抽提后烘干残渣重（g）六、附 注（ 1 ）测定用样品、抽提器、抽提用有机溶剂都需要进行脱水处理。这是因为：第一，抽提 体

9、系中有水，会使样品中的水溶性物质溶出，导致测定结果偏高；第二，抽提体系中有水， 则抽提溶剂易被水饱和（尤其是乙醚，可饱和约2 的水） ，从而影响抽提效率；第三，样品中有水，抽提溶剂不易渗入细胞组织内部，结果不易将脂肪抽提干净。（ 2）试样粗细度要适宜。试样粉末过粗，脂肪不易抽提干净；试样粉末过细，则有可能透 过滤纸孔隙随回流溶剂流失，影响测定结果。（3） 索氏抽提法测定脂肪最大的不足是耗时过长，如能将样品先回流 12 次，然后浸泡在 溶剂中过夜，次日再继续抽提，则可明显缩短抽提时间。（4） YG-n型油分测定器容量大，适合于样品较多的选种鉴定工作使用，温度控制在70 C 左右， 8h 可提取完

10、毕。（ 5）必须十分注意乙醚的安全使用。抽提室内严禁有明火存在或用明火加热。乙醚中不得 含有过氧化物， 保持抽提室内良好通风， 以防燃爆。乙醚中过氧化物的检查方法是：取适量 乙醚，加入碘化钾溶液，用力摇动，放置1min，若出现黄色则表明存在过氧化物，应进行处理后方可使用。处理的方法是：将乙醚放入分液漏斗，先以1/5乙醚量的稀 KOH 溶液洗涤23次，以除去乙醇；然后用盐酸酸化，加入1/5乙醚量的FeSO4或Na2SO3溶液，振CaCl2摇，静置，分层后弃去下层水溶液，以除去过氧化物；最后用水洗至中性，用无水或无水 Na2SO4 脱水，并进行重蒸馏。七、思考题1如何利用残余法测定油料作物种子中的粗脂肪含量？残余法测定油料作物种子中的粗脂肪含量，是用低沸点有机溶剂（乙醚或石油醚）回流 抽提，除去样品中的粗脂肪，以样品与残渣重量之差，来计算粗脂肪含量。2测定过程中为什么需要对样品、抽提器、抽提用有机溶剂都要进行脱水处理？进行脱水处理的原因有三：第一，抽提体系中有水，会使样品中的水溶性物质溶出，导 致测定结果偏高；第二，抽提体系中有水，则抽提溶剂易被水饱和（尤其是乙醚，可饱和约 2的水），从而影响抽提效率；第三，样品中有水