高效液相色谱故障排除及维护 - 图文-

1、HPLC 常见故障排除与维护 色谱仪常见故障分析及排除-100液相系统示意图 色谱故障排除步骤确定故障现象从简单问题入手用基准的方法验证系统分析可能引起问题的因素用排除法寻找问题原因寻求帮助色谱故障排除经验规则确认问题至少发生两次以上。如果问题不重复出现,很难证实其确实存在。一次只变化一个因素,以使你能够确认所变因素与问题之间的关联。恢复原状。如果使用更换组件的方法来查找问题之所在,完毕后应将原有完好组件安装回原处。否则,换下来的组件将来很难再利用,造成浪费。尝试预测将来可能发生的问题。利用成功的故障排除经验。养成良好的记录习惯。将来利用记录可以帮助发现问题,强化预防保养工作。引起HPLC 发

2、生问题的潜在因素HPLC 常见故障因素环境电源接地线温度湿度清洁程度化学品色谱柱保护柱溶剂样品仪器泵进样器检测器数据处理单元HPLC 常见故障因素(工作环境工作环境的影响电源容量、稳定性地线系统统一电源,统一接地湿度对光学部件的影响尤为严重温度空调机的影响清洁不要轻视灰尘的影响HPLC 常见故障因素(化学品化学品的影响已损坏的保护柱、色谱柱所用溶剂、试剂的品质化学品使用不当带来的影响样品前处理方法不当带来的影响实验前的准备和结束后的收尾工作在使用前过滤溶剂完全润湿在运输中变干的色谱柱了解溶剂对样品的溶解性及分离的影响对含有保留性较强的杂质组分的样品要进行预处理清除柱填料的局限性pH温度化学兼容

3、性使用新鲜的水溶液,并考虑使用生物稳定剂(如叠氮化钠定期用强极性的溶剂清洗色谱柱储存色谱柱时,应冲净缓冲盐,并用有机溶剂保护色谱柱(乙腈避免外力损伤色谱柱:弯曲、跌落或将接头拧的过紧使用缓冲液的注意事项缓冲液可以提供离子平衡的反离子,并使流动相保持一定的离子强度和pH值,减少拖尾。但是使用缓冲液要注意几点:1、避免使用盐酸盐,盐酸盐对钢质有腐蚀作用。2、缓冲液最好要现配现用,往往缓冲液是良好的菌类培养液,隔天或放置长时间实验时会有很多怪现象发生。3、实验后不可用有机溶剂直接过度,有机溶剂会处使盐类析出,造成液路或色谱柱堵塞,可用95:5的水甲醇冲洗。4、使用缓冲液要及时掌握pH范围,做到胸中有

4、数。5、清洗液路和柱子时,有温控可加热到30摄氏度易于冲洗。6、长时间用缓冲溶液要注意观察接头处有无析出,若有白色盐类析出,可考虑一定周期用10%硝酸冲洗一下液路(拆下柱子,走30ml,再用5倍水冲洗可以避免液路的堵塞。7、选择缓冲液要用可靠的试剂,避免不纯的盐类造成不必要的麻烦。HPLC 常见故障因素(泵 LC-P100高压恒流泵HPLC 常见故障因素(泵正确使用您的色谱泵:使用高品质的溶剂溶剂过滤(注意滤膜的选择脱气溶剂柱塞杆清洗注意调节流量时的变化速度HPLC 常见故障因素(泵注意流动相组分的互溶性!使用正确的密封圈清洗溶剂!泵头泵腔体吸入阀 导通活塞向后运动泵座宝石活塞杆密封圈排出阀关

5、闭液流方向泵头泵腔体吸入阀关闭活塞向前运动泵座 宝石活塞杆密封圈排出阀导通液流方向HPLC 常见故障因素(泵头密封圈柱塞杆 HPLC 常见故障因素(泵头出口单向阀泵头进口单向阀泵头吸入阀宝石球与球坐粘连,吸入阀 不能导通活塞向后运动泵座排出阀关闭液流方向泵吸液过程有故障情况:吸入阀宝石球粘连泵腔体内没有液体流入宝石活塞杆密封圈排出阀导通泵座 宝石活塞杆密封圈吸入阀宝石球与球座之间有杂质,液体反向泄漏液流方向泵排液过程有故障情况:宝石球与球座之间有杂质反向泄漏液流方向反向漏液方向活塞向前运动HPLC 常见故障因素(单向阀 出口阀进口阀宝石球不能向上运动液流方向(正向无液流流出宝石球与球座粘连不能

6、向上运动使正向流动的液流宝石球与球坐粘连不能通过接触面处有杂质宝石球与球座之间宝石球与球座不能形成了液体的反向宝石球与球座之间有杂质液流方向(反向紧密接触有杂质泄漏1、没有压力显示,没有流动相流动原因解决方法1电源问题接通电源,开机2保险丝被烧坏更换保险丝3控制器设定不正确或设定失败a、采取恰当的设定b、修理或更换控制器4柱塞杆折断更换柱塞杆5泵头内有空气溶剂脱气、启动泵抽出空气6流动相不足a、补充流动相b、更换入口滤头7单向阀损坏更换单向阀8漏液拧紧或更换手紧接头2、流动相流动正常,但没有压力显示原因解决方法1仪表损坏更换仪表2压力传感器损坏更换压力传感器3、压力持续偏高原因解决方法1流速设

7、定过高调整流速设定2柱前筛板堵塞a、在允许情况下反冲色谱柱b、更换筛板c、更换色谱柱3流动相使用不当或缓冲盐结晶沉淀a、使用恰当的流动相b、冲洗色谱柱4色谱柱选择不当选择恰当的色谱柱5进样阀损坏清洗或更换进样阀6柱温过低提高温度7控制器失常修理或更换控制器8保护柱阻塞清洗或更换保护柱9在线过滤器阻塞清洗或更换在线过滤器、压力持续偏低原因解决方法1流速设定过低调整流速2系统漏液确定漏液位置并维修3色谱柱选择不当选择恰当的色谱柱4柱温过高降低温度5控制器失常维修或更换控制器、压力波动原因解决方法1泵中有气体a、溶剂脱气b、从泵中除去气体2单向阀损坏或沾污更换或清洗单向阀3泵密封损坏更换泵密封4脱气

8、不充分a、溶剂脱气b、改变脱气方法(使用在线脱气法等5系统漏液确定漏液位置并维修6使用梯度洗脱由于流动相粘度的变化引起的压力波动流动相一定要用0.45m的滤膜过滤。避免使泵长期不工作,使流动相干枯。避免使用高粘度的流动相。使用带缓冲盐的流动相后,一定要充分清洗。 定期对流动相过滤头进行清洗。单向阀的故障现象,极大多数出现在吸入单向阀上。可以将吸入单向阀从泵头上拆下,接上专用针头,用蒸馏水冲洗即可(冲水时注意手指要按住吸入阀头部白色垫圈,防止内部零件冲出。泵头吸入阀关闭泵座 宝石活塞杆密封圈排出阀导通液流方向(压力下降密封圈泄漏产生的故障现象:密封圈与宝石杆之间存在间隙,导致漏液和压力下降泵腔体

9、活塞向前运动要用优质的流动相。色谱柱的压力不要太高。即不要使用受污染、老化的色谱柱。使用带缓冲盐的流动相后一定要用纯水充分清洗。避免使用高粘度的流动相。避免在没有流动相时运行泵(建议:在泵进行检测工作时设定最小压力。HPLC 常见故障因素(泵附件参比阀抽液阀右泵头左泵头压力传感器废液溶剂过滤头HPLC 常见故障因素(进样器7725i PN:201000119 进样请选用型号正确并完好的注射器X 请正确安装手动进样器! 请选择正确的转子类型!详情请参考Rheodyne公司网站:www. HPLC 常见故障因素(检测器LC-UV100紫外检测器废液输出流动相输入高压恒流泵色谱柱高压恒流输出液晶显示

10、器键盘主机板串行接口板USB接口RS232接口RS485接口样品注入氘灯电源氘灯透镜反光镜组件流通池光敏二极管与前置放大器样品输出紫外检测器进样器定量环栅模拟信号输出HPLC 常见故障因素(检测器错误信息氘灯启动失败解决:检查电源检查氘灯使用时间波长校验失败解决:清洗检测池错误信息:机内时钟电路的位置日期时间显示错误原因:电池耗尽或电路损坏解决:更换机内12887时钟电路重新校正仪器注意:关闭并断开电源防止静电损伤注意:关闭并断开电源防止静电损伤检测器更换氘灯氘灯HPLC 常见故障因素(检测器检测器使用和维护的其它注意事项不要挡住检测器散热风扇和通风孔不要随意更改检测器进、出口管路长时间停用检测器时,应在检测池中充满甲醇或乙腈,必要时密封检测器进、出口管路HPLC 常见故障因素(色谱柱连接优质劣质PEEK 接头PN: PSL 613315X X性能维护套件介绍性能维护套件