生物化学：第二章 核酸的结构与功能

1、目录目录第二章第二章核酸的结构和功能核酸的结构和功能Structure and Function of Nucleic Acid核核 酸酸(nucleic acid) 是以核苷酸为基本组成单位的生物大是以核苷酸为基本组成单位的生物大分子，携带和传递遗传信息。分子，携带和传递遗传信息。n核酸的分类核酸的分类 存在存在于细胞核和于细胞核和线粒体线粒体 分布于细胞核、细胞质、分布于细胞核、细胞质、线粒体线粒体(deoxyribonucleic acid, DNA)(ribonucleic acid, RNA)脱氧核糖核酸脱氧核糖核酸 核糖核酸核糖核酸携带遗传信息携带遗传信息是是DNADNA转录的产物

2、，参与遗传信转录的产物，参与遗传信息的复制与表达。某些病毒息的复制与表达。某些病毒RNARNA也可作为遗传信息的载体也可作为遗传信息的载体第一节第一节核酸的化学组成以及一级结构核酸的化学组成以及一级结构The Chemical Component and Primary Structure of Nucleic Acidn分子组成分子组成碱基碱基(base)：嘌呤碱，嘧啶碱：嘌呤碱，嘧啶碱戊糖戊糖(ribose)：核糖，脱氧核糖：核糖，脱氧核糖磷酸磷酸(phosphate)一、核苷酸是构成核酸的基本组成单位一、核苷酸是构成核酸的基本组成单位目录目录碱基碱基(base)是含氮的杂环化合物。是含氮

3、的杂环化合物。碱基碱基嘌呤嘌呤嘧啶嘧啶腺嘌呤腺嘌呤鸟嘌呤鸟嘌呤尿嘧啶尿嘧啶胸腺嘧啶胸腺嘧啶胞嘧啶胞嘧啶n碱基碱基嘌呤嘌呤(purine，Pu) NNNHN123456789NNNHNNH2腺嘌呤腺嘌呤(adenine, A)NNHNHNNH2O鸟嘌呤鸟嘌呤(guanine, G)NNH132456嘧啶嘧啶(pyrimidine，Py)胞嘧啶胞嘧啶(cytosine, C)NNHNH2O尿嘧啶尿嘧啶(uracil, U)NHNHOO胸腺嘧啶胸腺嘧啶(thymine, T)NHNHOOCH3目录目录n碱基的互变异构体碱基的互变异构体 HNHNCNH2+O+HNNH2NNH2亚氨式氨式+ H+NCO

4、HNCO- -+ H+酮式烯醇式n戊糖戊糖（构成（构成RNA）1 2 3 4 5 OHOCH2OHOHOH-D-核糖核糖(ribose)（构成（构成DNA）OHOCH2OHOH-D-2脱氧核糖脱氧核糖(deoxyribose)目录目录n嘌呤嘌呤核苷核苷嘌呤嘌呤N-9与脱氧核糖（核糖）与脱氧核糖（核糖）C-1 通过通过-N-糖糖苷键苷键相连形成相连形成脱氧核苷。天然状态下一般形成反式脱氧核苷。天然状态下一般形成反式脱氧核苷。脱氧核苷。目录目录嘧啶嘧啶N-1 -1与核糖与核糖C-1C-1 通过通过 - -N- -糖苷键糖苷键相连形成相连形成核苷核苷。n嘧啶嘧啶核苷核苷H1NNNH21OOHOHHH

5、CH2OHH2目录目录核苷或脱氧核苷与磷酸通过核苷或脱氧核苷与磷酸通过酯键酯键结合构成结合构成核苷酸核苷酸或或脱氧核苷酸脱氧核苷酸。n核苷酸核苷酸(ribonucleotide)NNNN9NH2OO HO HHHHCH2H1 2OPO- -HOO糖苷键糖苷键酯键酯键目录目录n多磷酸核苷酸多磷酸核苷酸环化核苷酸：环化核苷酸：cAMP、cGMP，是细胞信，是细胞信号转导中的第二信使。号转导中的第二信使。NOCH2OOHONNNNH2POOHcAMPn核苷酸衍生物核苷酸衍生物目录目录生物氧化体系的重要成分，在传递质子或电子的生物氧化体系的重要成分，在传递质子或电子的过程中具有重要的作用。过程中具有重

6、要的作用。烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，nicotinamide adenine dinucleotide, NAD+），），目录目录n 构成构成RNA的核苷酸的核苷酸碱基碱基 核苷酸核苷酸A 腺苷一磷酸腺苷一磷酸adenosine monophosphate, AMPG 鸟苷一磷酸鸟苷一磷酸guanosine monophosphate, GMPC 胞苷一磷酸胞苷一磷酸cytidine monophosphate, CMPU 尿苷一磷酸尿苷一磷酸uridine monophosphate, UMP目录目录n 构成构成DNA的核苷酸的核苷酸碱基碱基 脱氧核苷酸脱氧核苷酸A脱氧腺苷

7、一磷酸脱氧腺苷一磷酸deoxyadenosine monophosphate, dAMPG脱氧鸟苷一磷酸脱氧鸟苷一磷酸deoxyguanosine monophosphate, dGMPC脱氧胞苷一磷酸脱氧胞苷一磷酸deoxycytidine monophosphate, dCMPT脱氧胸苷一磷酸脱氧胸苷一磷酸deoxythymidine monophosphate, dTMP目录目录5-末端末端3-末端末端CGA磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键二、二、DNA是脱氧核苷酸通过是脱氧核苷酸通过3 ,5 -磷酸二酯键磷酸二酯键连接形成的大分子连接形成的大分子目录目录三、三、RNA也是具有也

8、是具有3 , 5 -磷酸二酯键磷酸二酯键的线性大分子的线性大分子RNA也是多个核苷酸分子通过也是多个核苷酸分子通过3 ,5 -磷酸二酯键磷酸二酯键连接连接形成的线性大分子，也具有形成的线性大分子，也具有5 3 方向性方向性。 n定义定义核酸中核苷酸的排核酸中核苷酸的排列顺序。列顺序。由于核苷酸间的差由于核苷酸间的差异主要是碱基不同，所异主要是碱基不同，所以也称为以也称为碱基序列碱基序列。5 5 端端3 3 端端CGA四、核酸的一级结构是四、核酸的一级结构是核苷酸的排列顺序核苷酸的排列顺序 单链单链DNA和和RNA分子的大小常用核苷酸数目分子的大小常用核苷酸数目（nucleotide，nt）表示

9、；双链核酸分子的大表示；双链核酸分子的大小常用碱基小常用碱基(base或或kilobase)数目来表示。数目来表示。目录目录A G P5 P T PG PC PT P OH 3 n核酸的一级结构核酸的一级结构5 pApCpTpGpCpT-OH 3 5 A C T G C T 3 A C T G C T第二节第二节DNA的空间结构与功能的空间结构与功能Dimensional Structure and Function of DNA一、一、DNA的二级结构是双螺旋结构的二级结构是双螺旋结构目录目录l不同生物种属的不同生物种属的DNA的碱基组成不同的碱基组成不同l同一个体的不同器官或组织的同一个体

10、的不同器官或组织的DNA碱基组碱基组成相同成相同l 对于一特定组织的对于一特定组织的DNA，其碱基组分不随，其碱基组分不随年龄、营养状态和环境而变化年龄、营养状态和环境而变化lA = T，G = C Chargaff 规则规则（一）（一）DNA双螺旋结构的实验基础双螺旋结构的实验基础 获得了高质量的获得了高质量的DNA分子的分子的X射线衍射照片。射线衍射照片。目录目录两条多聚核苷酸链在空间两条多聚核苷酸链在空间的走向呈的走向呈反向平行反向平行。两条链围绕着同一个螺旋两条链围绕着同一个螺旋轴形成轴形成右手螺旋右手螺旋的结构。的结构。双 螺 旋 结 构 的 直 径 为双 螺 旋 结 构 的 直 径

11、 为2.37nm，螺距为，螺距为3.54nm。（二）（二） DNA双螺旋结构模型要点双螺旋结构模型要点1.1.DNA由两条多聚脱氧核苷酸链组成由两条多聚脱氧核苷酸链组成 脱氧核糖和磷酸基团组成脱氧核糖和磷酸基团组成的亲水性骨架位于双螺旋的亲水性骨架位于双螺旋结构的结构的外侧外侧，疏水的碱基，疏水的碱基位于位于内侧内侧。2. 核糖与磷酸位于外侧核糖与磷酸位于外侧 双螺旋结构的表面形成了一个双螺旋结构的表面形成了一个大沟大沟(major groove)和一个和一个小沟小沟(minor groove)。 3. DNA双链之间形成了互补碱基对双链之间形成了互补碱基对 碱基配对关系称为互补碱基对。碱基配

12、对关系称为互补碱基对。DNA的两条链则的两条链则互为互补链。碱基互补配对互为互补链。碱基互补配对: 鸟嘌呤鸟嘌呤/胞嘧啶，胞嘧啶， 腺嘌呤腺嘌呤/胸腺嘧啶胸腺嘧啶目录目录n碱基互补配对碱基互补配对: : 鸟嘌呤鸟嘌呤/ /胞嘧啶胞嘧啶目录目录n碱基互补配对碱基互补配对: 腺嘌呤腺嘌呤/胸腺嘧啶胸腺嘧啶 相邻两个碱基对会有重叠，产生了疏水性的相邻两个碱基对会有重叠，产生了疏水性的碱基堆积力碱基堆积力(base stacking interaction)。 碱基堆积力和互补碱基对的氢键共同维系着碱基堆积力和互补碱基对的氢键共同维系着DNA结构的稳定。结构的稳定。4. 碱基对的疏水作用力和氢键共同维

13、持着碱基对的疏水作用力和氢键共同维持着DNA双螺旋结构的稳定双螺旋结构的稳定 碱基对平面与螺旋轴垂直。碱基对平面与螺旋轴垂直。目录目录n碱基堆积作用力碱基堆积作用力目录目录（三）（三）DNA双螺旋结构的多样性双螺旋结构的多样性目录目录（四）（四）DNA的多链结构的多链结构 在酸性的溶液中，胞嘧啶的在酸性的溶液中，胞嘧啶的N-3原子被质子化，原子被质子化，可与鸟嘌呤的可与鸟嘌呤的N-7原子形成氢键；同时，胞嘧原子形成氢键；同时，胞嘧啶的啶的N-4的氢原子也可与鸟嘌呤的的氢原子也可与鸟嘌呤的O形成氢键，形成氢键，这种氢键被称为这种氢键被称为Hoogsteen氢键。氢键。 nHoogsteen氢键氢

14、键 Hoogsteen氢键，不破坏氢键，不破坏Watson-Crick氢键，氢键，由此形成了由此形成了CGC的三链结构的三链结构(triplex)。目录目录n三链结构三链结构n四链结构四链结构目录目录真核生物真核生物DNA3 3 - -末端末端是是富含富含GT的多次重复序的多次重复序列，因而自身形成了折叠列，因而自身形成了折叠的四链结构。的四链结构。二、二、DNA的高级结构是超螺旋结构的高级结构是超螺旋结构超螺旋结构超螺旋结构(superhelix 或或supercoil)DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。 正超螺旋正超螺旋(positive superco

15、il)盘绕方向与盘绕方向与DNA双螺旋方同相同。双螺旋方同相同。 负超螺旋负超螺旋(negative supercoil)盘绕方向与盘绕方向与DNA双螺旋方向相反。双螺旋方向相反。 （一）原核生物（一）原核生物DNA的环状超螺旋结构的环状超螺旋结构原核生物原核生物DNA多为环状多为环状的双螺旋分子的双螺旋分子 ，以，以负超螺旋的形式存在，平均每负超螺旋的形式存在，平均每200200碱基就有一个碱基就有一个超螺旋形成。超螺旋形成。（二）真核生物（二）真核生物DNA以核小体为单位形成高以核小体为单位形成高度有序致密结构度有序致密结构 真核生物真核生物DNA以非常有序的形式存在于细胞以非常有序的形式

16、存在于细胞核内。核内。 在细胞周期的大部分时间里，在细胞周期的大部分时间里，DNA以松散的以松散的染色质染色质(chromatin)形式存在，在细胞分裂期，形式存在，在细胞分裂期，则形成高度致密的染色体则形成高度致密的染色体(chromosome)。目录目录n双链双链DNA的折叠和组装的折叠和组装目录目录DNA经过多次折叠，被压缩了经过多次折叠，被压缩了800080001000010000倍，组装在直径只有数微米的细胞核内。倍，组装在直径只有数微米的细胞核内。 DNADNA是是生物遗传信息的载体生物遗传信息的载体，并为基因复制和转录，并为基因复制和转录提供了模板。它是生命遗传的物质基础，也是个

17、体提供了模板。它是生命遗传的物质基础，也是个体生命活动的信息基础。生命活动的信息基础。 基因基因是携带遗传信息的是携带遗传信息的DNADNA片段片段，它们的序列信息，它们的序列信息意义及其在意义及其在DNADNA整个分子上的排布特点将在第十三整个分子上的排布特点将在第十三章详述。章详述。 DNADNA具有具有高度稳定性高度稳定性的特点，用来保持生物体系遗的特点，用来保持生物体系遗传的相对稳定性。同时，传的相对稳定性。同时，DNADNA又表现出又表现出高度复杂性高度复杂性的特点，它可以发生各种重组和突变，适应环境的的特点，它可以发生各种重组和突变，适应环境的变迁，为自然选择提供机会。变迁，为自然

18、选择提供机会。 三、三、DNA是遗传信息的物质基础是遗传信息的物质基础第三节第三节 RNA的结构与功能的结构与功能Structure and Function of RNA目录目录 RNA与蛋白质共同负责基因的表达和表达过与蛋白质共同负责基因的表达和表达过程的调控。程的调控。 RNA通常以单链的形式存在，但有复杂的局通常以单链的形式存在，但有复杂的局部二级结构或三级结构。部二级结构或三级结构。 RNA比比DNA小的多。小的多。 RNA的种类、大小和结构远比的种类、大小和结构远比DNA表现出多表现出多样性。样性。目录目录 信使信使RNA(messenger RNA, mRNA)是细胞内合是细胞内

19、合成蛋白质的模板。成蛋白质的模板。 生物体内生物体内mRNA的的丰度最小丰度最小、种类最多种类最多、大小大小也各不相同也各不相同、寿命最短寿命最短。 mRNA的初级产物为的初级产物为不均一核不均一核RNA(hnRNA)，含有内含子含有内含子(intron)和外显子和外显子(exon)。 hnRNA经过剪切后成为经过剪切后成为成熟的成熟的mRNA。一、一、mRNA是蛋白质合成中的模板是蛋白质合成中的模板hnRNA 内含子内含子( (intron) )mRNA nmRNA成熟过程成熟过程 外显子外显子( (exon) )目录目录 成熟的成熟的mRNA由氨基酸编码区和非编码区构成。由氨基酸编码区和非

20、编码区构成。 5 -末端的帽子末端的帽子(cap)结构和结构和3 -末端的多聚末端的多聚A尾尾(poly-A tail)结构。结构。 53m7GpppAAAAn3非翻译区5非翻译区编码区AUGUAAn成熟的真核生物成熟的真核生物mRNA目录目录ONNNNNH2OOCH3OHHHCH2HOPO-OOHNNNOH2NNOOHHHHCH2HOHOPOO-CH3PO-O5235n帽子结构帽子结构: :m7GpppNm1. 真核生物真核生物mRNA的的5 -端有特殊帽结构端有特殊帽结构 mRNA的帽结构可以与的帽结构可以与帽结合蛋白帽结合蛋白(cap binding protein，CBP)结合。结合。

21、目录目录真核生物的真核生物的mRNA 的的3 -末端转录后加上末端转录后加上一段长短不一的聚腺苷酸。一段长短不一的聚腺苷酸。2. 真核生物真核生物mRNA的的3 末端有多聚腺苷酸尾末端有多聚腺苷酸尾mRNA的多聚的多聚A尾在细胞内与尾在细胞内与poly(A)结结合蛋白合蛋白（poly(A)-binding protein，PABP）结合存在。结合存在。 mRNA核内向胞质的转位核内向胞质的转位mRNA的稳定性维系的稳定性维系翻译起始的调控翻译起始的调控 n帽子结构和多聚帽子结构和多聚A尾的功能尾的功能目录目录3. mRNA碱基序列决定蛋白质的氨基酸序列碱基序列决定蛋白质的氨基酸序列 从从mRN

22、A分子分子5 5 末端起的第一个末端起的第一个AUG开始，开始，每每3 3个核苷酸为一组称为个核苷酸为一组称为密码子密码子(codon) 。 位于起始密码子和终止密码子之间的核苷酸位于起始密码子和终止密码子之间的核苷酸序列称为序列称为开放阅读框开放阅读框(open reading frame, ORF)，决定了多肽链的氨基酸序列，决定了多肽链的氨基酸序列 。 在在mRNA的开放读框的两侧，为非翻译序列的开放读框的两侧，为非翻译序列（untranslated region，UTR），即），即5 -UTR和和3 -UTR。目录目录 转运转运RNA(transfer RNA, tRNA)在蛋白质合成

23、在蛋白质合成过程中作为各种氨基酸的载体过程中作为各种氨基酸的载体, 将氨基酸转呈将氨基酸转呈给给mRNA。 由由7495核苷酸组成；核苷酸组成； 占细胞总占细胞总RNA的的15%； 具有很好的稳定性。具有很好的稳定性。二、二、tRNA是蛋白质合成中的氨基酸载体是蛋白质合成中的氨基酸载体目录目录1. tRNA中含有多种稀有碱基中含有多种稀有碱基稀有碱基稀有碱基（rare base）是指除是指除A、G、C、U外的一些碱基。外的一些碱基。目录目录tRNA具有局部的茎具有局部的茎环环(stem-loop)结构或结构或发卡发卡(hairpin)结构。结构。2. tRNA含有茎环结构含有茎环结构tRNA的

24、二级结构的二级结构三叶草形三叶草形氨基酸臂，氨基酸臂，DHU环，环，反密码环，反密码环，TC环，环，附加叉附加叉目录目录ntRNA的倒的倒L三级结构三级结构目录目录 tRNA的的3 -末末端为端为CCA结尾。结尾。 3 -末末端的端的A与氨基酸以与氨基酸以酯键相连酯键相连生成氨基酰生成氨基酰- -tRNA 。 不同的不同的tRNA结合不同的结合不同的氨基酸。氨基酸。 3. tRNA的的3 -末末端连接氨基酸端连接氨基酸目录目录 tRNA的反密码子环的反密码子环上 有上 有 反 密 码 子反 密 码 子(anticodon)。 tRNA上的反密码子上的反密码子通过碱基互补识别通过碱基互补识别mR

25、NA上的密码子。上的密码子。4. tRNA的反密码子识别的反密码子识别mRNA的密码子的密码子目录目录核糖体核糖体RNA(ribosomal RNA，rRNA)是细胞是细胞内含量最多的内含量最多的RNA(80)。r R N A 与 核 糖 体 蛋 白 结 合 组 成与 核 糖 体 蛋 白 结 合 组 成 核 糖 体核 糖 体(ribosome)，为蛋白质的合成提供场所。，为蛋白质的合成提供场所。三、以三、以rRNA为组分的核糖体是蛋白为组分的核糖体是蛋白质合成的场所质合成的场所目录目录n核糖体的组成核糖体的组成原核生物（以大肠杆菌为例）原核生物（以大肠杆菌为例）真核生物（以小鼠肝为例）真核生物

26、（以小鼠肝为例）小亚基小亚基30S40SrRNA16S1542个核苷酸个核苷酸18S1874个核苷酸个核苷酸蛋白质蛋白质21种种占总重量的占总重量的40%33种种占总重量的占总重量的50%大亚基大亚基50S60SrRNA23S5S2940个核苷酸个核苷酸120个核苷酸个核苷酸28S5.85S5S4718个核苷酸个核苷酸160个核苷酸个核苷酸120个核苷酸个核苷酸蛋白质蛋白质31种种占总重量的占总重量的30%49种种占总重量的占总重量的35%目录目录70S ribosome50S large subunit23S rRNA5S rRNA31 proteins16S rRNA21 proteins

27、30S small subunitn大肠杆菌的核蛋白体大肠杆菌的核蛋白体目录目录n1818S rRNA的二级结构的二级结构目录目录动物细胞内主要的动物细胞内主要的RNA种类及功能种类及功能RNA种类种类缩写缩写细胞内位置细胞内位置功能功能微微RNAmicroRNA细胞质细胞质翻译调控翻译调控胞质小胞质小RNAscRNA/7SL-RNA细胞质细胞质信号肽识别体的组成成分信号肽识别体的组成成分不均一核不均一核RNAhnRNA细胞核细胞核成熟成熟mRNA的前体的前体核小核小RNAsnRNA细胞核细胞核参与参与hnRNA的剪接、转运的剪接、转运核仁小核仁小RNAsnoRNA核仁核仁rRNA的加工和修饰

28、的加工和修饰线粒体核糖体线粒体核糖体RNA mt rRNA线粒体线粒体核糖体组成成分核糖体组成成分线粒体信使线粒体信使RNAmt mRNA线粒体线粒体蛋白质合成模板蛋白质合成模板线粒体转运线粒体转运RNAmt tRNA线粒体线粒体转运氨基酸转运氨基酸目录目录四、四、其他非编码其他非编码RNA参与基因表达的调控参与基因表达的调控长链非编码长链非编码RNA（long non-coding RNA, lncRNA）n非编码非编码RNA（ Non-coding RNA, ncRNA）不编码蛋白质但具有重要生物学功能的不编码蛋白质但具有重要生物学功能的RNA分子。分子。 短链（小）非编码短链（小）非编码

29、RNA（small non-coding RNA, sncRNA）目录目录n ncRNA 功能功能 参与转录调控、参与转录调控、RNA的剪切和修饰、的剪切和修饰、mRNA的稳定和翻译调控、蛋白质的稳定和转运、染色的稳定和翻译调控、蛋白质的稳定和转运、染色体的形成和结构稳定等细胞重要功能体的形成和结构稳定等细胞重要功能 n lncRNA 功能功能 lncRNA在结构上类似于在结构上类似于mRNA，但序列中不存在，但序列中不存在开放读框。许多已知的开放读框。许多已知的lncRNAs由由RNA聚合酶聚合酶转录并转录并经可变剪切形成，通常被多聚腺苷酸化。经可变剪切形成，通常被多聚腺苷酸化。lncRNA

30、具有具有复杂的生物学功能，并与一些疾病的发病机制密切相关。复杂的生物学功能，并与一些疾病的发病机制密切相关。有的有的lncRNA能使基因沉默，有的则激活基因的表达。能使基因沉默，有的则激活基因的表达。 l核内小核内小RNAl核仁小核仁小RNAl胞质小胞质小RNAl催化性小催化性小RNAl小干涉小干涉 RNA l微微 RNAn短链非编码短链非编码RNA亦称为非编码小亦称为非编码小RNA（small non-messenger RNA） 目录目录 核内小核内小RNA（small nuclear RNA, snRNA）位于细胞核）位于细胞核内。内。snRNA有有5种，分别称为种，分别称为U1、U2、

31、U4、U5、U6，它们与多种蛋白形成复合体，参与真核细胞它们与多种蛋白形成复合体，参与真核细胞hnRNA的内的内含子加工剪接（第十六章）。含子加工剪接（第十六章）。 核仁小核仁小RNA（small nucleolar RNA, snoRNA）：定位于）：定位于核仁，主要参与核仁，主要参与rRNA的加工和修饰，如的加工和修饰，如rRNA中核糖中核糖C-2 的甲基化修饰。的甲基化修饰。 胞质小胞质小RNA（small cytoplasmic RNA, scRNA）：存在）：存在于细胞质中，参与形成信号识别颗粒，引导含有信号肽于细胞质中，参与形成信号识别颗粒，引导含有信号肽的蛋白质进入内质网定位合成

32、（第十七章）。的蛋白质进入内质网定位合成（第十七章）。 目录目录 催化性小催化性小RNA亦被称为核酶（亦被称为核酶（ribozyme）。是细胞内具）。是细胞内具有催化功能的一类小分子有催化功能的一类小分子RNA，具有催化特定，具有催化特定RNA降解降解的活性，在的活性，在RNA的剪接修饰中具有重要作用。的剪接修饰中具有重要作用。 小干扰小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）是生物）是生物宿主对于外源侵入基因表达的双链宿主对于外源侵入基因表达的双链RNA进行切割所产生进行切割所产生的具有特定长度（的具有特定长度（2123 bp）和特定序列的小片段）和特定序列的小片

33、段RNA。这些。这些siRNA可以单链形式与外源基因表达的可以单链形式与外源基因表达的mRNA相结合，并诱导相应相结合，并诱导相应mRNA降解。降解。 目录目录n微微RNA（microRNAs, miRNAs ）是一类长度为是一类长度为22nt左右的内源性左右的内源性sncRNA。miRNAs主要是通过结合主要是通过结合mRNA而选择性调控而选择性调控基因的表达。基因的表达。 核酸的理化性质核酸的理化性质The Physical and Chemical Characters of Nucleic Acid第四节第四节核酸在波长核酸在波长 260nm 处有强烈的吸收，是处有强烈的吸收，是由由碱

34、基的共轭双键碱基的共轭双键所决定的。这一特性常用作所决定的。这一特性常用作核酸的定性和定量分析。核酸的定性和定量分析。一、核酸分子具有强烈的紫外吸收一、核酸分子具有强烈的紫外吸收n碱基的紫外吸收光谱碱基的紫外吸收光谱DNA或或RNA的定量的定量A260 = 1.0 相当于相当于 50g/ml 双链双链DNA(dsDNA)40g/ml 单链单链DNA (ssDNA or RNA)20g/ml 寡核苷酸寡核苷酸确定样品中核酸的纯度确定样品中核酸的纯度 纯纯 DNA: A260/A280 = 1.8纯纯 RNA: A260/A280 = 2.0n紫外吸收的应用紫外吸收的应用二、二、DNA变性是双链解离为单链的过程变性是双链解离为单链的过程某些理化因素导致某些理化因素导致DNA双链互补碱基双链