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文档简介

1、 HPLC基本组成 色谱柱:是HPLC的核心部分,固定相有不同种类,常见的有正相(硅 胶),反相,离子交换,分子排阻等。 检测器:目前常用的有3种, 1.紫外检测器(UV):大多数药物在200700nm范围内有吸收,因 此可以选择药物的最大吸收波长进行测定。 二极管阵列检测器(DAD),可对从190-600nm之间的全波段的吸 收度进行快速扫描,得到了一个全波段的紫外吸收光谱,使专一性 大大提高 。 2.荧光检测器:比UV灵敏,专一性也高。但被测物要有荧光,导致其 应用范围较小。 3.电化学检测器(ECD):其灵敏度比UV和荧光高36个数量级,一 般可达ngpg水平,凡含有硝基、羰基、胺基酚等

2、电化学活性基团 的药物都可测定。但要求流动相含有电解质。 液质联用(HPLC-MS及HPLCMS/MS) HPLC与MS的接口一直是联机技术发展的瓶颈。目前, 比较常用的接口有热喷(Thermospray,TSP) 和电喷雾接 口(Electrospray, ESP)。 HPLC与一级MS联机时,由于MS采用软电离技术,往 往只能提供被测物的分子量信息,而没有裂解碎片离子,而 它对于结构解析更为重要的。因此,目前实际应用中多采用 的是连接两级MS,即HPLCMS/MS,可对前一级MS产生 的分子离子进行二次电离,使其裂解而产生碎片离子。这 样,在对样品进行分离的同时,又得到了每一组分的分子量

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