医学检验本科班分子生物学检验技术试卷

1、医学检验本班?分子生物学检验技术?试卷选择题在备选答案中选择一个最正确答案,每题2分,共20分：1 .在核酸提取时,常需要使用氯化钠,醋酸钠等盐溶液,真正的目的是A.中和核酸的负离子,使其易于沉淀 B. 调节PH值C.保持核算的完整性D.提升核酸的浓度E.无特定目的2 .在一个DNA分子中,如G所占摩尔比为17.2%,那么A所占摩尔比为A. 82.8% B. 32.8% C. 17.2% D. 65.6% E.无法计算3 .以下那项不是扩增反响所必需的A.引物和模板 B. dNTP C. Mg+ D .DNase E.缓冲液4 .以下那项是分子生物学技术形成的理论根底A.基因结构与功能的关系B

2、.基因结构变异与疾病的关系C.病原微生物的基因结构特征D. 基因的表达.调控与疾病的关系E.以上皆是5 .分子生物学检验技术主要包括那些技术A.核酸分子杂交技术B. DNA测序技术C. PCR技术D. DNA重组技术E.以上全是6 .以下哪项检测需应用分子生物学检验技术A.肝功能检测B.乙肝两对半检测C.乙肝病毒DNAHBV-DN顺测D.肿瘤细胞培养E.病原微生物培养7 .在核酸的别离Z化过程中,为保证其一级结构的完整性,应采取A.尽量简化别离步骤,缩短提取时间 B.适当延长提取时间C.在37摄氏度条件下进行D. 参加Mg+,Ca+将二价金属离子E.以上全是8 .有一核酸样品,测得A260/A

3、280=2.0,请问该样品属于哪类核酸样品A. DNAB. RNAC.是DNA,但有蛋白质污染D.是RNA但有蛋白质污染E. DNA 和 RNA 9.在RNA提取和纯化过程中,为预防Rnase污染而导致 RNA的降解,应采取A.在洁净的实验室里操作B.带手套和口罩C.所用器材高压消毒或 DEPCM理D.冰浴下操作E.以上皆是10.随机引物标记法全程标记DNA1需选用以下哪种酶A. DNA多聚酶I的Kelnow片段 B. TaqDNA 聚合酶C.限制性内切酶D. DNA连接酶E.末端转移酶,错误的打X,每题2分,共6分二.判断题：你认为以下表达正确的请在题后括号内打,1 .双脱氧核酸链终止法是最

4、常用的DNAM序技术2 . TapDNA聚合酶的作用是催化 DNA合成,但由于缺乏 3 -5外切酶活性,无校正功能,所以在复制合成新链过程中可能会发生碱基错配,导致PCRT物的错误3 .采用加热煮沸法可使 RNase完全失活 三：填空题每空格2分,共24分:1 .在选择核酸的别离纯化方法,应遵循的总原那么是：一是保证核酸 一级结构的完整性;二是尽可能排除其他分子的污染,保证核酸样品的纯度.2 .在PC或应中,Mg+理个至关重要的因素,浓度过低 会降低酶的活性,浓度过 高又会导致非特异性扩增.3 .用于核酸杂交的普通硝酸纤维素膜最大的优点是本底低,因而最容易检测杂交信号,缺点是 脆性大 易破裂,

5、且队V 5 0 0 bp的核酸结合力低.4 .整个核酸杂交反响主要由预杂交、杂交和洗脱三个步骤组成.5 .转移到硝酸纤维素膜或尼龙膜上的核酸,其与滤膜的结合是松散的,需做进一步的固定,常用的固定方法是烘烤、紫外线固定和碱固定.3 .名词解释：每题4分,共20分:1 .融点曲线分析技术：是根据野生型序列和突变序列因不同Tm而产生不同的融点曲线而设计的.2 .探针：指所有能与特定的靶分子发生特异性的相互作用,并可以被检测的分子3 . Tm值：DNA熔解温度,指把 DNA的双螺旋结构降解一半时的温度.4 .转染：将外源DNAt接导入真核生物细胞的过程称为转染.5 .转化：将重组的DN6子导入细菌,使

6、其在细菌体内扩增及表达的过程称为转化.4 .问做题：每题10分,共30分1 .简述限制性内切酶的定义、命名原那么和分类.答：定义：限制性内切酶是能识别和水解双链DNA子内特异序列的核酸水解酶类.命名：通常由3个斜体字母表示,第 1个大写字母为来源微生物的属名第1个字母,第2、第3个小写子母取微生物种名的头两个字母.分类：根据酶分子组成及裂解方式的不同, 将限制性内切酶分 3类,I类和出类限制性内切 酶在同一酶分子中兼有修饰 甲基化作用和依赖于 ATP的限制水解活性,n类限制性内切 酶能识别并水解特异性的核甘酸序列是 DNAt组技术中最重要的工具.2 . PCR引物的设计应遵循哪些原那么.答：1

7、.用于PCR反响的引物需要两条, 分别设在被扩增目的的片段的两端,并分别与模版正负链序列互补.2 .引物的长度一般以18-25个核甘酸为宜,引物过长容易产生寡核甘酸的链内互补,形成发夹状结构,影响引物和模板之间的互补.3 .两条引物之间尤其在 3端的序列不能有互补,以免形成引物二聚体.4 .引物的碱基组成应平衡,预防出现喋吟、喀咤碱基堆积.5 .PCR扩增中的退火温度是根据引物的TM直而决定的,两条引物的 Tm值不能差太大.6 .根据需要,可在合成引物时于其5端加修饰成分.7 .试述实日荧光PCRK解探针法的实验原理答：原理：PCR反响体系中除有两条引物外还需要一条荧光素标记的探针.探针的5端和3端分别标记荧光报告基团R和荧光淬灭基团 Q当探针完整时 R基团与Q基团分别位于探针的两端,Q基团抑制R基团使其不能发射荧光.PCR程中,TaqDNA聚合酶沿着模板