护心颗粒中人参和三七的皂苷成分的提取工艺研究

1、护心颗粒中人参和三七的皂苷成分的提取工艺研究If you run after two heares, you will ca. 【摘要】目的研究用乙醇溶液提取护心颗粒中人参和三七皂苷成分的工艺条件。方法以提取物中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和Rb1的含量为评价指标，选择乙醇浓度、醇与药材量之比、提取时间及提取次数等为影响因素，进行L9(34)正交实验，优化提取人参和三七皂苷成分的工艺条件。结果乙醇溶液提取人参和三七皂苷成分的最佳工艺条件为用10倍量于药材的70%的乙醇溶液提取3次,每次提取2h。结论乙醇溶液提取人参和三七皂苷成分的工艺条件合理可行()。【关键词】人参皂苷;三七皂苷;乙醇浸膏;护

2、心颗粒;正交实验法If you run after two heares, you will ca. Abstract：ObjectiveToinvestigatetheextractionconditionofginsenosideandnotoginsenosidefromRadixetRhizomaofGinsengandNotoginsenginHuxingranuleswithalcoholsolution.MethodsTheorthogonaldesignwasusedfortheextractioncondition.Withthecontentsofnotoginsenosi

3、deR1,ginsenosideRg1andRb1astheevaluationindexes,evaluatedtheeffectsofthepercentconcentrationofthealcohol.theratioofthealcoholtoherbalmedicinematerial,theprocesstimeandtherepeattimesofextractionwereinestigated.ResultsTheoptimumconditionsofextractionwereasfollows:theconcentrationofthealcohol70%,therat

4、ioofthealcoholtoherbalmedicinematerial10:1,refluxingfor2hrs,andrepeat3times.ConclusionTheoptimumconditionofextractionissteadyandfeasible.Keywords：Ginsenoside;Notoginsenoside;AlcoholExtractives;HuxinFanggranules;OrthogonalDesignTest护心方是我院心脏中心在邓铁涛“五脏相关-心脾相关”理论指导下，以“调脾护心”为主要治则，用于冠心病血运重建(冠脉搭桥术或冠脉支架术)后的中

5、医干预治疗的基础处方之一。经过多年临床应用，取得了良好的疗效14。Nature is the glass reflecting truth. 护心颗粒是护心方经现代制剂技术精制而成。人参和三七含有的皂苷、黄酮、多糖、微量元素、维生素、有机酸等有效成分，是护心颗粒组方中起调脾护心,补益心气,化痰祛瘀的重要成分。提取人参和三七浸膏是制备护心颗粒的基础工艺之一。本研究采用正交实验法，以高效液相色谱法测量浸膏中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和Rb1的含量为评价指标，优选提取护心颗粒中人参和三七的皂苷成分的最佳工艺条件。现报道如下(医药学/药学论文 )。Curiosity killed the cat.

6、1仪器与材料1.1仪器高效液相色谱仪:Waters600型泵,717型自动进样器,Waters2998二极管阵列检测器(美国Waters公司);Empowerprosystem色谱数据工作站;USC-320D型超声波清洗器(上海波龙电子设备有限公司);电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏试验设备有限公);BS224S型电子天平北京赛多利斯(Sartorius)仪器系统有限公司;R501型旋转蒸发仪(上海中科机械研究所)。1.2材料生晒参产地吉林，三七产地云南，广州康美药业股份有限公司供应，并经刘茂贵主任中药师鉴定，分别为五加科植物人参PanaxginsengC.A.Mey.和五加科植物三七Panaxn

7、otoginseng(Burk.)F.H.Chen.的干燥的根及根茎，符合中国药典5各药项下的规定。乙腈(色谱纯，DIMA科技公司);乙醇(医用级，广东省广宁县葡萄糖药业有限公司);对照品三七皂苷R1(批号0745-200007)，人参皂苷Rg1(批号110703-200424)和人参皂苷Rb1(批号110704-200318)，均由中国药品生物制品检定所供应;其他试剂均为分析纯。2方法与结果2.1正交实验设计根据预试验和文献报道69，选取乙醇浓度、溶剂与药材用量之比、提取时间、提取次数等4个影响因素，每个因素选3个水平，按表1设计L9(34)正交实验。2.2乙醇浸膏的提取按照表2安排的实验条

8、件，精密称量按处方比例混合的人参和三七药材粉末45g，加入计算量和规定浓度的乙醇溶液，回流提取规定的时间和次数后，合并提取液，滤过，减压回收乙醇，浓缩近干，得稠膏。用70%乙醇溶液解稠膏，转移至250ml容量瓶中并稀释至刻度。每个实验重复两次。精密量取上述浸膏的70%乙醇溶液10ml，置蒸发皿中，于水浴上蒸发至干，残留物用甲醇溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，经0.45m滤膜过滤;精密量取10l，注入高效液相色谱仪，按God sends fortune to fools. 2.3三七皂苷R1、人参皂苷Rb1和Rg1的含量测定Silence in times of suffering i

9、s the best. God defend me from my friends; form my enemy I can defend myself. 三七皂苷R1:Y=2.9622105X-3.3617104,r=0.9998;人参皂苷Rg1：Y=2.9036105X-7.1348104,r=0.9999;人参皂苷Rb1:Y=2.8875105X-5.4647104,r=0.9999; 图1三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的校正曲线论文包括学年论文、毕业论文、学位论文、科技论文、成果论文等. 2.4正交实验的结果表2中极差R值表明，影响因素主次为DACB。表3的方差分析结果表

10、明，影响因素主次为CDAB。每次提取时间(P0.005)和重复提取次数(P0.05)。但是，对于人参和三七这样贵重药材，为了增加浸膏的产量和皂苷含量，减少水溶性杂质，增加醇溶性物质，使用10倍于药材量的70%的乙醇比较好。因此，实验得到的最佳工艺条件应为A3B3C3D3，即用10倍于药材量的70%乙醇水溶液，提取3次，每次提取2h。 Money is the root of all evil. 表4提取工艺的验证结果表5人参、三七药材中皂苷含量3讨论本研究选用乙醇回流提取法，用正交实验优选提取工艺，以10倍于药材量的70%乙醇水溶液回流提取3次，每次2h。标志性皂苷成分三七皂苷R1，人参皂苷R

11、g1和Rb1的质量分数为药材的5.17%，为总皂苷的99.36%，人参和三七的皂苷成分基本提取完全。所选工艺条件已应用于工业放大生产试验，效果良好。在验证实验中增加了第4次用水提取1h。用水作溶剂，有利于丙二酰基类皂苷的提取(人参皂苷Rb1，Rb1，Rb1，Re等)11。但是，水溶性杂质增多，提取液难以过滤，浓缩费时。要不要用水提取第4次，取决于制剂工艺的需要：如果提取规模小，或者需要控制水溶性杂质和出膏率，无需用水提取第4次;如果大规模生产，人参和三七用量大，可以用水提取第4次，提取液浓缩后，调成弱碱性，使丙二酰基类皂苷脱去酰基，变成相应的人参皂苷，再用乙醇溶出皂苷，沉淀除去杂质，以便充分利

12、用人参和三七贵重药材。目前，已从人参中分离鉴定了46种单体人参皂苷12，三七含有总皂苷类成分，且大部分皂苷与人参皂苷类成分相同13。提取含人参和三七的中药复方药材，其评价指标常用标志性成分人参皂苷。当然，使用的人参皂苷和三七皂苷作为对照品的种类越多，分析结果的代表性会越强，分析成本也越高。本研究选用三七皂苷R1，人参皂苷Rg1和Rb1为对照品，采用高效液相色谱法测定提取物中3种皂苷的含量，以3种皂苷含量的和作为评价指标，筛选正交实验的最佳工艺条件，具有较好的代表性，便于在生产中使用。【参考文献】1尹克春，吴焕林.邓铁涛教授调脾护心法治疗心力衰竭经验J.新中医,2002,34(5):11.2吴焕

13、林，林晓忠，邹旭.邓铁涛治疗冠心病临床经验探析J.辽宁中医学院学报，2005，7(4):312.3阮新民,江巍,林宇,等.调脾护心法改善冠状动脉搭桥术患者临床疗效及生存质量的研究J.中国中西医结合杂志,2006,26(1):28.4阮新民，林宇,江巍,等.调脾护心法改善冠状动脉搭桥术患者生存质量的研究J.中医杂志,2006,47(8):586.5国家药典委员会.中国药典，部S.北京：化学工业出版社,2005，7：106桂双英,周亚球.正交试验法优选人参总皂苷的提取工艺J.时珍国医国药，2003,14(10):591.7郝少君，张正臣.正交设计法研究人参皂苷的最佳提取工艺J.中华医学实践杂志，2007,6(1):48.8郑绯，徐娟，梁丹,等.正交试验法优选F胶囊中人参总皂苷的提取工艺J.武警医学，2008,19(11):995.9于宗渊,黄丁毅,苏本正.正交试验优选三七的提取工艺J.时珍国医国药，2000,15(6):357.10