冷刺激条件下硒和维生素E对大鼠心脏内血管活性物质的影响

1、    冷刺激条件下硒和维生素E对大鼠心脏内 血管活性物质的影响        摘要目的:用低硒/维生素E(Se/VE)饲料喂养的大鼠动物模型，施以冰泳刺激，观察Se,VE对心肌血管活性物质的影响。方法:用60只Wistar大鼠，按体重和性别随机分为低硒/维生素E组(Se/VE DG)及上述每kg饲料补硒(亚硒酸钠)0.1 mg(Se/VE DG+Se)组、补-VE100mg(Se/VE DG+ VE)组、联合补Se,VE (Se/VE DG+Se/VE)组、低硒/

2、维生素E组(Se/VE DG)和常规饲料组 (SG)等六组。饲养70d，测定各组动物心肌内皮素(ET),一氧化氮(NO),去甲肾上腺素(NE),血管紧张素(Ang-),单胺氧化酶(MAO-A),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),脂褐素(lipofuscin)等水平。结果: Se/VE DG组心肌ET,Ang-含量明显高于其它组；NO含量明显低于其它组；心肌NE水平增高，而特异性分解NE的MAO-A活性降低；心肌Lipofuscin含量明显增加；SOD,GSH-Px含量降低。补Se组、补Se/VE组、低Se/VE组和对照组上述指标活性明显改善。结论:冷刺激条件下硒和维

3、生素E对大鼠心脏内血管活性物质有明显影响。主题词物理刺激；硒；维生素E；血管 Effects of selenium and vitamin E on vasoactive substances in myocardium of rats under cold stressJIN YiQingdao Medical College of Qingdao University, Qingdao (266021)LI Bao-Yu LI Guang-ShengChangchun Tranditional Medical CollegeZHANG Hai-YingEndemic Diseases I

4、nstitute of Norman Bethune University of Medical ScienceAbstractAIM:To study the effects of selenium(Se) and vitamin E(VE) on vasoactive substances in myocardium of rats under cold stress.METHOD: 60 Wistar rats were divided into 6 groups: (1) Se,VE dificient group (Se/VE DG);(2) Se supplemented 0.1

5、mg/kg group(Se/VE DG+Se );(3) VE supplemented 100 mg/kg group(Se/VE DG+VE );(4) Se,VE supplemented group (Se/VE DG+Se/VE );(5) Se,VE dificient grain group( Se/VE DG);(6) Stock group(SG).Rats were fed for 70 days and were put in ice water stressed before killed.The contents of endothelin(ET),nitric o

6、xide(NO), noradrenaline(NE),angiotensin-(Ang-),activities of monoamine oxidase-A(MAO-A),superoxide dismutase(SOD),glutathione peroxidase(GSH-Px),and content of lipofuscin in myocardial were measured.RESULTS:Contents of ET, Ang- and NE were abviously increased and contents of NO and activities of MAO

7、-A,SOD, GSH-Px were markedly decreased in the myocardium of Se/VE DGrats,but above items were improved in differently grade in those rats fed on Se/VE DG supplemented Se,VE and Se/VE group.CONCLUSION: Se and /or VE played impotant role in some vasoactive substances of myocardium in rats fed on Se/VE

8、 dificient grain under cold stress.MeSH Physical stimulation;Selenium;Vitamin E;Blood vessels机体在受到各种强烈刺激后会产生一系列非特异性的防御反应,主要表现为交感神经肾上腺髓质兴奋和下丘脑垂体肾上腺皮质功能增强而引起一系列代谢改变，以动员机体代偿和适应及抵抗各种刺激1。研究表明，血浆儿茶酚胺浓度升高是应激反应的重要特征之一，其水平的增高在应激反应引发的过氧化损伤中起主导作用2，并通过多种机制引起心肌损伤3。硒(selenium, Se)和维生素E(vitamine E, VE)对缺血缺氧性心肌具有保护

9、作用，但对血管活性物质的影响机制不明。本研究用低Se,VE饲料喂养的大鼠动物模型，施以冰泳刺激，观察Se,VE对心肌血管活性物质的影响。材料和方法(一)饲料： 低Se/VE组饲料购于吉林省蛟河县，Se 含量为0.013 mg/kg;VE含量为2.18 mg/kg。低Se/VE组饲料购于长春市郊区，Se含量为0.03 mg/kg;VE含量为4.88 mg/kg。基础饲料配方为玉米89%，黄豆10%，食盐为1%，另添加维生素AD(医用口服液，VA含量50 00 IU/g;VD含量5 000 IU/g) 49.6 mg/kg。正常饲料购于白求恩医科大学实验动物部，Se含量为0.13 mg/kg;VE

10、含量为8.98 mg/kg。饲料中补硒为亚硒酸钠，含硒为0.1 mg/kg饲料；补VE为-VE100 mg/kg饲料。(二)动物和分组：Wistar大鼠60只，由白求恩医科大学校动物部提供，体重100 g左右，雌雄各半。按体重和性别随机分为6组，每组10只：实验组按饲料含Se,VE量分为如下6组。低Se/VE组(Se,VE deficient group;Se/VE DG)；补Se 0.1 mg/kg组(Se/VE DG+Se)补VE100 mg/kg组(Se/VE DG+VE)补Se,VE组(Se/VE DG+Se/VE):低SE,VE饲料补充Se 0.1 mg/kg及 VE100 mg/k

11、g；低Se,VE组(Se/VE DG)；常规饲料组(stock group, SG)：饲正常饲料。(三)实验方法：喂养期间动物自由饮水进食，每7 d称体重1次。喂养70 d后，于处死前两日，每日冰泳(3°C)刺激1次，每次5 min.处死后立即取心室肌于液氮保存。匀浆后待测。内皮素(endothelin, ET),血管紧张素（angiotensin-,Ang-）,一氧化氮(nitric oxide, NO)测定均按试剂盒说明书操作；ET放免试剂盒购于北京东亚免疫试剂研究所；Ang-放免试剂盒购于北方生物技术研究所；NO试剂盒购于解放军军事医学科学院。去甲肾上腺素(noradrenal

12、ine,NE)测定采用荧光法。单胺氧化酶A(monoamine oxidase-A,MAO-A)采用紫外法。超氧化物歧化酶(superoxide,SOD)采用邻苯三酚自氧化法。谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione dismutase,GSH-Px)测定采用比色法。脂褐素(lipofuscin)采用荧光法。(四)统计处理结果(一) 心肌ET,Ang,NO含量测定结果（表1）：低Se/VE组心肌ET,Ang含量明显高于其它组；NO含量明显低于其它组。表1Se、VE 对大鼠心肌中ET、Ang-、NO含量的影响Tab 1 Effects of Se and VE on Contents of E

13、T ,Ang-,NOGroupET(pg/100mg WW)Ang-(pg/100mg WW) NO(ng/g WW)Se/VE DG155.57±63.6588.29±87.7510.70±0.70 Se/VE DGSe103.04±39.27*26.03±19.12*11.44±0.56Se/VE DG+VE81.25±35.50*25.07±19.84*11.63±0.64Se/VE DG+Se/VE46.92±30.44*21.21±17.39*11.71±0.58S

14、e/VE DG10.91±11.85*17.93±11.84*11.53±0.86SG15.04±14.66*21.12±25.52*11.83±0.96     *P0.01,vs Se/VE DG (二) 心肌NE,MAO-A水平检测结果（表2）：低Se/VE组心肌NE水平增高，而特异性分解NE的MAO-A活性降低。补Se等各组心肌NE水平降低，MAO-A活性增加。表2Se、VE 对大鼠心肌中NE、MAO-A活性的影响Tab 2Effects of Se and VE on NE， MAo-

15、A in rat GroupNE(ng/g WW)MAO-A(nmol/h*mg-1 pro.)Se/VE DG399.87±53.83 6.23±2.21Se/VE DGSe363.74±63.437.30±1.34Se/VE DG+VE345.15±21.8513.62±4.46*Se/VE DG+Se/VE275.81±43.78*13.40±2.95*Se/VE DG312.98±36.73*9.83±2.21*SG322.97±34.37*11.93±2.38*&#

16、160;    *P0.05,*P0.01, vs Se/VE DG (三)心肌SOD,GSH-Px,lipofuscin的含量测定结果（表3）：低Se/VE组心肌lipofuscin含量明显增加；SOD,GSH-Px含量降低。补Se/VE组和对照组SOD水平升高。补Se组、补Se,VE组、低Se,VE组和常规饲料组GSH-Px活性明显升高。表3Se、VE 对大鼠心肌中lipofuscin、SOD、GSX-Px活性的影响Tab 3Effects of Se and VE on lipofuscin content, SOD andGroup Lipofuscin(

17、u/gWW)SOD(U/mg pro)GSH-Px(U/mg pro)Se/VE DG493.96±108.8014.03±3.830.39±0.12Se/VE DG+Se232.01±76.37*13.09±3.790.51±0.12*Se/VE DG+VE189.01±23.01*16.15±4.020.46±0.09Se/VE DG+Se/VE135.80±15.59*17.88±4.29*0.70±0.16*Se/VE DG163.73±53.70*15.1

18、3±3.790.50±0.08*SG 172.26±28.72*19.22±5.80*0.68±0.13*     *P0.05,*0.01,vs Se/VE DG 讨论我们所用的低Se/VE饲料，是以玉米面为主并模拟克山病易感人群的膳食配方所配成，所饲大鼠心肌代谢偏移4，5。本文结果表明，在冷刺激条件下低Se,VEI组大鼠与常规饲料组相比心肌ET,Ang-含量升高；NE升高而MAO-A降低；自由基代谢紊乱，心肌Lipofuscin含量明显增加；SOD,GSH-Px含量降低。说明Se,VE对心肌血管活性物质代谢方面起极其重要的作用。机体在受到各种强烈刺激后会产生一系列非特异性的防御反应,主要表现为交感神经肾上腺髓质兴奋和下丘脑垂体肾上腺皮质功能增强而引