专题222动物细胞工程222动物细胞融合与单克(精)

1、尊婁知识产权*手受正Rfi品JB理解教材新知2.2.2把握热点考向应用创新演练尊婁知识产权*手受正Rfi品JB2. 2. 2动物细胞融合与单克隆抗体尊童知识产权手受正KS品质动物细胞工程尊童知识产权手受正KS品质返回1.1. 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个 或多个动物细胞结合形成一个细胞的过 程。2.2. 动物细胞融合常用的诱导因素有聚乙二 醇(PEG)(PEG)、灭活的病毒、电激等。3 3 动物细胞融合的主要用途是制备单克隆抗体。4 4 杂交瘤细胞是由经免疫的 B B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合而成的，具有既能无限增殖又能产生特定抗体的能力。5 5 单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度

2、高，并能大量制备。6 6 单克隆抗体的主要用途有：作为诊断试剂、用于治疗疾病和返回运载药物。返回关键语句自養就材务晁舷1 1 概念两个或 多个动物细胞结合形成一个细胞的过程,也称细 胞杂交。尊婁知坦产权*亭受正Rfi品质3.3.意义(1)(1) 突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。(2)(2) 为制备单克隆抗体 开辟了新途径。：思考探究1.1. 动物细胞融合与植物原生质体融合所用的诱导方法有 何不同？提示：动物细胞融合可用灭活的病毒进行诱导。2.2. 细胞融合技术与有性杂交相比有哪些优点？提示：有性杂交有着十分严格的时空关系和种族界限。动 物细胞融合则不同，它通过人工的方法克服了存在

3、于物种之间 的遗传屏障，从而能够按照人们的意愿，把不同物种的不同组 织类型的细胞融合在一起。.r尊重知识产权*芋受正Rfi品JB1.1.细胞融合的过程分析灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被刑壽颗粒穿通细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合，其中细胞膜融合是细胞融合的先导，在细胞膜融合中体现出细胞膜具有一定的流动性。尊重知识产权*芋受正Rfi品JB2.2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞 A A、B B细胞膜的流动性过程J J 去壁 原生质体 A A、B Bj j 融合 融合的原生质体杂种细胞J J 植物组，织培养杂

4、种植株细胞 A A、B B J J 融合 杂交细胞J J 有丝分裂 多个相同杂交细胞(1)尊婁知识产权芋受正Rfi品JB植物体细胞杂交动物细胞融合相关酶纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶融合方物理法：离心、电激、振动；除物理法和化学法外还法化学法：聚乙一醇等试剂诱导可以用灭活的病毒诱导结果杂种植株杂交细胞意义克服了远缘杂交的不亲和性， 获得杂种植株突破了有性杂交方法的 局限，使远缘杂交成为可能特别提醒(1)(1)动物细胞核融合发生在杂种细胞的有丝分裂过程中。(2)(2)灭活的病毒只适用于动物细胞融合。返回尊婁知识产权芋受正Rfi品JB霸知识点二单克隆抗体的制备V自孩截材务基减1.1.传统抗体

5、的制备向动物体内注射丸區，使之产生抗体 方法 G GI I 从动物血清中分离抗体缺点：产量低、纯度低、特异性差。2.2.单克隆抗体的制备过程返回(3)(3)制备过程:(4)(4)单克隆抗体的特点：特异性强、灵敏度高,并可大量制备。单克隆拡偻的应用：1.1. 为什么要对小鼠注射抗原？提示：以获得能产生相应抗体的 B B 淋巴细胞(浆细胞)。2.2. 根据单克隆抗体制备过程思考下列问题：(1)(1)制备单克隆抗体时，为什么要选用 B B 淋巴细胞和骨髓瘤 细胞融合形成杂交瘤细胞？(2)B(2)B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞经聚乙二醇处理后，培养液中 存在哪几种细胞？尊重知识产权*(2)(2)解决思驕霍黨

6、罷蠶嬲高效、简易、快速的优点。： !思考探究(3)(3)选择杂交瘤细胞的两步筛选的目的各是什么?尊重知识产权*芋受正Rfi品JB提示：(1)(1)每一个 B B 淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体，但 不能无限增殖；骨髓瘤细胞可大量快速增殖，却不能产生抗体。 若将两种细胞融合在一起，既能产生一种特异性抗体又能快速 增殖。未融合的 B B 淋巴细胞、未融合的骨髓瘤细胞、B-BB-B 融 合细胞、瘤一瘤融合细胞、B B瘤融合细胞。(3)(3)第一步筛选的目的是获得杂交瘤细胞；第二步筛选的 目的是获得能产生所需单一抗体的杂交瘤细胞。缘St名轉MM.4J1-1-血清抗体与单克隆抗体的比较尊重知识产权*返回

7、名称产生特点血清抗体由 B B淋巴一般从血清中分离，产量低、纯度低、特异性差单克隆抗体由杂交瘤特异性强、大量返回2.2.制备单克隆抗体过程中两次筛选的目的不同(1)(1)第一次筛选是将未融合的 B B 淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及B BB B 融合、瘤一瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰，筛选出杂 交瘤细胞。(2)(2)第二次筛选是将产生特定抗体的B B瘤细胞通过细胞培 养用相应抗原检测的办法筛选出来。因为从体内取免疫过的 B B 淋巴细胞时会取出很多种，形成的杂交瘤细胞有很多种，所以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。尊童知识产权正Rf品质尊童知识产权正Rf品质尊霎知1R产权*手受正Rfi品质细胞融合

8、【例 1J1J 下列对植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较,描述正确的是( )A.A.动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同, 诱导融合的方法也完全相同B.B.两者都可以跨越种属间的生殖隔离，突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能C.C.利用动物细胞融合技术而发展起来的杂交瘤技术，为试管婴儿的诞生开辟了新途径精讲精析A A 项中动物细胞融合可用灭活的病毒诱导， 而植物原生质体是不能的；C C 项中杂交瘤技术是细胞工程技术, 而试管婴儿则是胚胎工程内容；D D 项生物性状的体现是基因型 与环境共同作用的结果，“超级植物”具有两个亲本的遗传物质, 但性状不一定能全部表达。答案B B考向一D

9、.D.目前科得到了同时具有两个物种遗传物质的超级植物，并使它们的性思路点拨返回尊重知识产权*芋受正 h 品JB动、植物细胞融合技术的比较动、 植物细胞融合技术基本原理相同， 都是细胞膜的流动 性；诱导融合的方法基本类似。不同点是：植物细胞融合前 需先去掉细胞壁；动物细胞融合除物理法、化学法外，还用 到生物方法，即灭活病毒；培养基成分不同，动物细胞培养 是用液体培养基，其成分中有动物血清。另外还有培养目的和 结果等方面的区别。返回尊重知识产权*芋受正 h 品JB考向二V单克隆抗体的制备例 2 2下图是制备分泌抗 X X（H1N1H1N1 流感病毒）抗体的过程,删锻鷲常臨牒挪.归纳拓展根据图解I祀

10、玄外给界塔中只 有杂交生长5?銃搜|返回(1)(1) 给力、鼠注射抗原的目的是_ O O(2)(2) 在单克隆抗体制备过程中之所以选用 B B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有_ 的特性。由曲g g 中可看出，单克隆抗体制备过程运用了和_ 的动物细胞工程技术手段。(4)(4)动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机 盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是还含有(5)(5)在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组织细胞分散开，以利于细胞融合，可用_ 处理离体组织细胞使之分散。(6)(6) 图中有两次筛选过程，其中步骤的目的是筛选出步骤的目的是筛选出_o o(7)(

11、7) 请根据以下信息，设计一方法(不考虑机械方法)，从培 养液中筛选出杂交瘤细胞。已知细胞合成 DNADNA 有 D D 和 S S 两条途 径，其中 D D 途径能被氨基嚓吟阻断。人淋巴细胞中有这两种 DNADNA 的合成途径，但一般不分裂增殖；鼠骨髓瘤细胞中尽管只 有 D D 途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合， 加入聚乙二醇促融，获得杂种细胞。方法：_o尊童知识产权*亭受正返回原理：_O O尊童知坯产权*手受正Rfi品质思路点拨精讲精析】(1)(1)根据抗原抗体特异性结合的原理，用特定 抗原刺激，小鼠体内便可产生能产生特定抗体的浆细胞，即可 获得相应的 B B 淋巴细胞。(

12、2)(2)杂交瘤细胞具有两种细胞的遗传物质，既能产生特定的抗体，又能无限增殖。(3)(3)从图中看出，单克隆抗体技术实际是应用了动物细胞融 合和动物细胞培养技术。返回尊童知坯产权*手受正Rfi品质(5)(5) 细胞融合时是单个细胞和单个细胞的融合， 为将细 胞从动物组织中离散，可用胰蛋白酶处理。(6)(6)在单克隆抗体制备过程中，由于从小鼠体内提取的 B B 淋巴细胞可能有多种，以及细胞融合方式有多种，从而产生 多种融合细胞以及多种杂交瘤细胞，因此需多次筛选。从图中可看出，是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，是筛 选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。(7)(7)据题干信息可知，可在培养液中加入氨基嚓吟

13、，使 D D合成途径阻断，仅有 D D 合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞不能增殖，而 B B 淋巴细胞一般不增殖，但人淋巴细胞 和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的 S S 途返回径合成 DNADNA 而增殖。返回答案(1)(1)获得能产生相应抗体的 B B 淋巴细胞(2)(2) 既能无限增殖，又能产生特定抗体(3)(3) 动物细胞融合动物细胞培养(4)(4) 动物血清 胰蛋白酶(6)(6) 杂交瘤细胞能产生特定抗体的杂交瘤细胞(7)(7) 方法：培养液中加入氨基嚓吟，收集增殖的细胞途径的骨髓瘤细胞及使其彼此融合的细胞就不能增殖，但人的淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用 B B 淋巴细胞/拓農轲修单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和 B B 淋巴细胞融合 后，要用特定的培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上 不能存活增殖的细胞是()B B 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B B 淋巴细胞自身融 合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞A.A.B.B.尊重知识产权原理:加入氨基嚓吟后,使 D D 合成途径阻断，仅有 D D 合成中的尊重知识产权返回C.C.D.