维胃方对乙酸诱导大鼠胃溃疡愈合效果及血清GASEGF水平的影响

1、维胃方对乙酸诱导大鼠胃溃疡愈合效果及血清GAS，EGF水平的影响         【摘要】  目的探讨维胃方对消化性溃疡病愈合情况的影响及作用机制。方法采用乙酸诱导大鼠胃溃疡模型。观察维胃方对大鼠溃疡面积的改变；检测大鼠胃液pH值变化；通过石蜡包埋、病理切片染色观察溃疡愈合质量，并进行镜下分析；采用放射性免疫法（RIA）检测大鼠血清表皮生长因子（EGF）和胃泌素（GAS）水平的变化。结果镜下可见维胃方治疗的大鼠胃黏膜造模处溃疡愈合情况较好，其中以中剂量组的效果最好；模型组与各用药组比较，胃液pH值变化明显

2、（P0.05）；而在溃疡面积的治疗效果比较中，维胃方各治疗组与对照组相比较有显着意义（P0.05），其中以维胃方中剂量组值最小，疗效最好（0.76±0.30）mm2，P0.01；维胃方治疗的3组大鼠血清GAS均数都高于模型组和对照组，但其差异并无统计学意义；而经维胃方治疗的大鼠血清EGF水平均有所降低，其中以维胃方中剂量组治疗效果最显着（0.252 5±0.549 7 ng/ml)，P0.01。结论维胃方对消化性溃疡有较好的治疗效果，其作用机制与防御因子GAS，EGF的变化有关系。 【关键词】  维胃方 消化性溃疡 表皮生长因子 胃泌素 溃疡愈合效果Therape

3、utic Effect of WeiWeiFang(WWF) on Acetic Acidinduced Gastric Ulcer and the Levels of GAS and EGF in RatsAbstract:ObjectiveTo discuss the therapeutic effect and mechanism of WWF on peptic ulcer(PU). MethodsTo observe the change of ulcer area and pH of gastric juice,and analyse the slice up of patholo

4、gy by the optics  microscope by the method of acetic acidinducted gastric ulcer. Levels of GAS and EGF serum were determined by specific radioimmunoassay method.ResultsThe effect was significant when cured by WWF,especially in mid-dose group when observed under the optical microscope.The change

5、 of pH of gastric juice was evident in model group compared with cured groups（P0.05）. The difference was significant (P0.05) while compare the curative effect on ulcer areas in control group of WFF with that in cured groups, and the effect was the best in the mid-dose group (P0.01). The levels of GA

6、S in serum were higher in cured groups of WFF than those in model group and control group. But the difference was not significant. The level of EGF in WWF groups decreased,mid-dose group had the best effect（P0.01.ConclusionThere is evident therapeutic effect of WWF on PU. And its mechanism is correl

7、ated to the defense of GAS and EGF.Key words:WeiWeiFang;  Peptic ulcer;  EGF;  GAS;  Effect of ulcer healing   消化性溃疡病（peptic ulcer，PU）是临床常见多发病。目前H2受体拮抗剂及质子泵抑制剂在临床上的广泛应用，使溃疡病的愈合率显着提高，但由于费用、副作用、耐药性、患者依从性等问题的存在，最终使该病的复发率仍居高不下。维胃方是经过临床应用的经验方， 对PU有较好的远期疗效。而胃泌素（GAS）和表皮生长因子（EG

8、F）被认为是PU愈合过程中的防御因子，发挥着很重要的作用 1,2。因此，本实验通过观察维胃方对大鼠胃溃疡愈合情况及血清GAS，EGF水平的影响，探讨其治疗机理，为中医药治疗PU提供实验依据。1  材料与方法1.1  材料1.2  方法1.3  观察指标胃液pH值；溃疡面积计算；血清GAS，EGF含量；病理观察，并进行光学显微镜下分析。1.4  统计学处理实验数据以±s表示，采用SPSS11.5软件进行One-way ANOVA的样本均数多重比较的F检验，P0.05。2  结果2.1  大体标本观察 

9、60;       2.2  光学显微镜下观察2.3  溃疡面积分析各用药组与对照组（即观察造模后自愈情况）做比较，即可观察治疗效果，故作为空白对照的正常组以及模型组与各用药组不作比较。而对照组与各用药组间的比较都有统计学意义，其中以维胃方中剂量组最小，效果最显着（P0.01）。结果见表1。表1  溃疡面积mm2（略）2.4  维胃方对血清EGF，GAS及胃液pH值的影响结果显示：对照组与维胃方中、高剂量组，模型组与维胃方中剂量组之间EGF值水平差异有意义，其中以维胃方中剂量组最低，差异最显着（

10、P0.01）；GAS各组均数符合方差齐性，但组间差异并无统计学意义；模型组pH值和各用药组间的均数差异比较都有统计学意义（P0.05）。结果见表2。表2  维胃方对血清EGF，GAS及胃液pH值的影响（略）3  讨论   消化性溃疡，属中医“胃脘痛”“痞证”“吐酸”范畴。中医辨证寒热虚实夹杂，气血失和占大多数。气机阻滞，升降失调是其主要病机。维胃方是临床上用于治疗PU的经验方，方由茯苓、蒲公英、白及、三七组成。茯苓健脾补中；蒲公英清热消痈利湿；更兼白及、三七化淤止血、消痈敛疮、祛腐生肌。其中白及内含丰富的白及多胶糖，有很强的抗溃疡作用，对胃黏膜损伤具有明

11、显的保护作用4。该方在临床上加减化裁，疗效显着。   PU的愈合是一个非常复杂的生理过程，包括细胞移行分化增殖和细胞外基质形成及新生血管生成等。胃酸分泌过多时，易破坏愈合环境，引起PU复发；另一方面，胃蛋白酶的最适合pH为1.83.5，乳蛋白经胃内少量胃蛋白酶作用就可以被消化。当泌酸不足时，会影响蛋白质的消化与吸收；同时随食物进入胃内的细菌也容易在体内生长和繁殖5。本实验中，模型组pH值显着高于用药组，这是由于模型组大鼠胃黏膜受到了严重的破坏，导致泌酸功能乏力；而经各用药组治疗后，溃疡愈合，胃黏膜被修复，泌酸功能逐渐恢复。这也与溃疡面积数据吻合：维胃方治疗组溃疡面积均小于对

12、照组，其中以维胃方中剂量组效果最好（与各组比较均P0.01）。胃黏膜病理组织镜下观察结果也与上述结论相符，尤以维胃方中剂量组效果最好。   GAS是与PU密切相关的胃肠肽类激素之一，它具有强大的刺激胃酸分泌效应。有实验证明6，GAS起着刺激循环激素和神经递质的双重作用，能刺激胃酸分泌和营养胃黏膜，即促进胃肠道黏膜生长和刺激胃肠蛋白质，RNA，DNA合成及胃窦运动的作用7。而本实验结果显示，经维胃方治疗的大鼠血清GAS水平均高于模型组和对照组，但用药组和非用药组的血清GAS水平差异并无统计学意义。造成这种结果可能是由于造模后胃窦体处胃黏膜遭到破坏，H+逆向弥散进入黏膜使胃窦体

13、处酸化，从而反馈抑制GAS释放，使血中GAS含量降低。而经维胃方治疗后，溃疡逐渐愈合，胃黏膜逐渐修复，GAS释放增加，从而GAS含量有所上升。但GAS又有刺激胃酸分泌和促进血流增加的双重作用，在溃疡愈合过程中，这两种不同的效果相互作用，达到一定的制衡。   EGF是一种具有广泛生物学效应的由唾液腺和十二指肠Brunner腺分泌的单链多肽，能够降低胃黏膜损伤程度，促进组织损伤修复 8,9。此外，EGF还可增加胃黏膜黏液黏蛋白的合成和分泌，有助于上皮组织的修复。有研究认为10，在正常情况下，胃肠黏膜的完整性较好，所以血中EGF水平较低。而当胃肠黏膜存在炎症和溃疡时，受损的胃肠黏

14、膜通透性增加，加之此时胃腔内EGF增加，便有较多的EGF进入血液循环，所以造模后血清EGF水平会上升。而本实验显示：经维胃方治疗的组别，血清EGF含量均较对照组下降，其中以维胃方中剂量组最为明显（P0.01）。表明维胃方能改善溃疡愈合的条件，促进胃黏膜的修复，从而使血清的EGF含量维持在正常的水平。   本实验通过对维胃方在溃疡愈合过程中防御因子GAS和EGF的研究，证明维胃方对PU具有良好的治疗效果，其中以中剂量组最明显。在对PU愈合环境的检测过程中，与对照组相比pH值（P0.05），溃疡面积、EGF水平（P0.01），各指标的变化均与维胃方的治疗形成了量效依赖关系。但维

15、胃方对溃疡愈合过程中攻击因子的具体作用机制及其在治疗过程中防御因子与攻击因子之间的相互制衡机制还有待进一步研究。【参考文献】  1刘 伟.EGF与胃肠关系的研究新进展J.国外医学·消化系疾病分册，2002，22（4）：207.2Feng-Peng Sun, Yun-Gang, Han-Rong Qin. Alterations of gastric, somatosatin,G and D cell in rat gastric ulcerJ. World Chin J Digestol,2004,12(2):363.3TAKIK，OKABES，SAZIKIR.A new

16、method for the production of chronic gastric ulcer in rats and the effect of several drugs on its healingJ.Jpn J Phartmacol，1969，19：418.4耿志国白及对盐酸引起的大鼠胃黏膜损伤的保护作用J.中草药，1990，21（2）：24.5王继山，陈俭红.实用小儿胃肠病学M.北京：北京医科大学中国协和医科大学联合出版社，1997：9.6邱 桐，郑俊江，刘 喆，等.不同针刺手法对醋酸型胃溃疡大鼠溃疡指数及血清胃泌素水平的影响J.天津中医学院学报，2001，20（4）：27.7周 吕.胃肠生理学M.北京：科学出版社,1998：102.8Yanaka A，Suzuki H，Shibahara，et al. EGF promotes gastric mucosal restitution by activating Na+/H+ exchange of epithelia