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1、第1讲微生物的培养和利用(时间:45分钟)A级基础演练1(经典题)平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法,下列描述正确的是()。A都要将菌液进行一系列的梯度稀释B平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划 线的操作C稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养D都会在培养基表面形成单个的菌落解析平板划线法不需要进行梯度稀释,稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液滴加到固体培养基的表面。平板划线法和稀释涂布平板法都能在培养基表面形成单个菌落。答案D2(2012·合肥四校质检)下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是()。A植物组织培养常用的是固
2、体培养基B可利用固体培养基上菌落的特征来判断和鉴别细菌的类型C利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌D在无氮培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌解析在只含有尿素作为氮源的培养基中加入酚红指示剂鉴定尿素分解菌。答案D3下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是()。A用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板B取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1 mL,分别涂布于各组平 板上C将实验组和对照组平板倒置,37 恒温培养2448 hD确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数解析在细菌计数时,为保证实验结果的准确性,一般
3、选择菌落数在30300的平板进行计数,求出平均数,再根据对应的稀释度计算出样品中的细菌数。答案D4用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几种统计结果,正确的是()。A涂布了一个平板,统计的菌落数是230B涂布了两个平板,统计的菌落数是215和260,取平均值238C涂布了三个平板,统计的菌落数分别是21、212和256,取平均值163D涂布了三个平板,统计的菌落数分别是210、240和250,取平均值233解析在设计实验时,一定要涂布至少3个平板作为重复组,才能增强实验的说服力与准确性,所以A、B不正确。C项虽涂布了3个平板,但是,其中1个平板的
4、计数结果与另两个相差太远,说明在操作过程中可能出现了错误,此时,不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。答案D5(2013·枣庄模考)如表所示为分离分解尿素的细菌所用的培养基配方:KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO4·7H2O0.2 g葡萄糖10.0 g尿素1.0 g琼脂15.0 g自来水定容至1 000 mL请根据以上配方,回答下列问题。(1)该培养基含有微生物所需要的_类营养物质。其中最主要的碳源是葡萄糖,氮源是尿素。(2)该培养基按物理性质划分是_培养基;按培养基的作用划分是选择培养基,该培养基具有选择作用的原因是_、_。(3)在该培养基中,可通
5、过检测pH的变化来判断尿素是否被分解,依据的原理是_。(4)若用该培养基来鉴定某种细菌是否能够分解尿素,可在培养基中加入_指示剂,尿素被分解后指示剂变_色。(5)某同学尝试使用罐头瓶在常温下制作果酒,开始时向消过毒的罐头瓶中加入了新鲜的葡萄汁和酵母菌,添加酵母菌的原因是_,添加葡萄汁的目的是为酵母菌的生长发育提供_。答案(1)4(2)固体该培养基中唯一的氮源是尿素,只有能分解尿素的微生物才能在该培养基上生长和繁殖(3)在细菌分解尿素的过程中,细菌合成的脲酶将尿素分解成氨,氨会使培养基的pH升高(4)酚红红(5)酵母菌能分解葡萄糖形成酒精(或酵母菌进行无氧呼吸产生酒精)所需的各种营养物质(或碳源
6、、氮源、水、无机盐和生长因子)6(2013·湖北三校联考)在日常生活中,一提到细菌、真菌及病毒这些微生物,人们往往首先想到它们的害处,其实,很多微生物对人类是有益的,它们与我们人类的关系非常密切,而且人类已经应用微生物造福于我们的生活。请回答下列问题。(1)从自然界获得纯种酿酒酵母菌的基本程序:配制培养基接种培养观察记录纯化培养。采用平板划线法接种,开始接种时要灼烧接种环,目的是_。若葡萄汁中含有醋酸菌,在葡萄酒发酵旺盛时,醋酸菌能否将酒精转变成醋酸?_,原因是_。(2)在腐乳的制作过程中,有多种微生物参与了豆腐的发酵,其中起主要作用的是_。产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子
7、的_,_可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。(3)利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取。科学家利用培养基从土壤中选择出能分解纤维素的细菌,经过大量培养后可以从中提取纤维素酶。土壤中富含各种微生物,将土壤浸出液接种到特定培养基上,可得到能分解纤维素的细菌,实验室中获取纯净菌的常用方法有_和_。虽然各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、_。解析(1)采用平板划线法接种,开始接种时要灼烧接种环,目的是灭菌;若葡萄汁中含有醋酸菌,在葡萄酒发酵旺盛时,醋酸菌不能将酒精转变成醋酸,原因是醋酸菌是好氧菌,葡萄酒发酵阶段的无氧条件抑制了醋酸菌的生长。(2)在腐乳的制作过程中,有多种微生物参与了豆腐的
8、发酵,其中起主要作用的是毛霉。产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸。脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸。答案(1)灭菌不能醋酸菌是好氧菌,葡萄酒发酵阶段的无氧条件抑制了醋酸菌的生长(2)毛霉肽和氨基酸脂肪酶(3)平板划线法稀释涂布平板法无机盐、碳源、氮源B级智能提升7急性肠胃炎、手足口病分别是由细菌和病毒通过消化道进入人体导致的。因此检验饮用水的细菌含量和病毒含量是有效监控疾病发生的必要措施,请回答下列与检验饮用水有关的问题。(1)检验大肠杆菌的含量时,通常将水样进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养,记录菌落数量,这种方法称为_。在下面所示的四种菌落分布图中,不可能是用该方法得到的是_。(2)用该方法统计样本菌落数时是否需要设置对照组?_。为什么?_。(3)已知大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气,现提供足量的已灭菌的乳糖蛋白胨培养液和具塞试管,应如何判断待检水样中是否含有大肠杆菌?_。解析纯化大肠杆菌的方法稀释涂布平板法和平板划线法。删除偏差太大的数据,对剩下的多个培养数据进行平均处理就可以得到水样中的大肠杆菌数。大肠杆菌能发酵乳糖并产酸产气,通过密封培养,大肠杆菌可以进行无氧呼吸产生气体,以气泡的形式释放出来。答案(1)稀释涂布平板法D(2)需要因为需要判断培养基是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格)
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