低温超高压连续流细胞破碎仪ppt课件

1、低温超高压低温超高压延续流细胞破碎仪延续流细胞破碎仪崔冶建崔冶建JN-3000PLUS细胞破碎的方法细胞破碎的方法机械破碎法：利用匀浆器、研磨器或捣碎机机械破碎法：利用匀浆器、研磨器或捣碎机 等将细胞破碎。等将细胞破碎。 物理破碎法：利用超声波、压力差或温度差物理破碎法：利用超声波、压力差或温度差 等将细胞破碎。等将细胞破碎。 化学浸透法：利用酸、碱、外表活性剂和有化学浸透法：利用酸、碱、外表活性剂和有 机溶剂等试剂，采用化学法处机溶剂等试剂，采用化学法处 理可以改动细胞壁或膜的通透理可以改动细胞壁或膜的通透 性从而使内合物有选择地浸透性从而使内合物有选择地浸透 出来。出来。酶学破碎法：利用各

2、种水解酶，将细胞壁分酶学破碎法：利用各种水解酶，将细胞壁分 解，使细胞内含物释放出来。解，使细胞内含物释放出来。 组织捣碎机组织捣碎机 普通用于动物组织、植物肉质种子、柔嫩的普通用于动物组织、植物肉质种子、柔嫩的叶芽等，转速可高达叶芽等，转速可高达10000rpm/M10000rpm/M以上。以上。存在的问题存在的问题: :由于旋转刀片的机械切力很大由于旋转刀片的机械切力很大, ,适适 用制备一些大分子量的样品用制备一些大分子量的样品, ,不适宜用于核酸。不适宜用于核酸。 匀匀 浆浆 器器 将剪碎的组织置于匀浆器中来回将剪碎的组织置于匀浆器中来回研磨研磨, ,细胞得于破碎细胞得于破碎. . 细

3、胞破碎程度细胞破碎程度比捣碎机高，适用于量少动物脏器比捣碎机高，适用于量少动物脏器组织。组织。存在的问题存在的问题: :团状或丝状真菌呵斥堵塞团状或丝状真菌呵斥堵塞, ,较小较小的革兰氏阳性菌及一些亚细胞器的革兰氏阳性菌及一些亚细胞器, ,质地巩固质地巩固, ,易损伤匀浆。易损伤匀浆。 超声波破碎仪 超声波处置细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂,此法适用于微生物资料,以及大肠杆菌制备各种酶。操作简单,反复性较好,节省时间。存在问题存在问题: : 超声波破碎在实验室运用较普遍，超声波破碎在实验室运用较普遍，处置少量样品时操作简便处置少量样品时操作简便, ,液量损失少液量损失少, ,但是但是超声波产生的

4、化学自在基团能使某些敏感性超声波产生的化学自在基团能使某些敏感性活性物量变性失活。散热均有困难，要采取活性物量变性失活。散热均有困难，要采取相应降温措施相应降温措施. .对超声波敏感核酸应慎用。对超声波敏感核酸应慎用。 化学浸透法 利用酸、碱、外表活性剂和有机溶剂等 试剂,采用化学法处置可以改动细胞壁或膜的通透性,从而使内合物有选择地浸显显露来提取核酸时,用此法破碎细胞作用比较温暖存在的问题存在的问题: :时间长时间长, ,效率低效率低, ,化学试剂毒性化学试剂毒性较强较强, ,同时对产物也有毒副作用，进一步分同时对产物也有毒副作用，进一步分离时需求用透析等方法除去这些试剂离时需求用透析等方法

5、除去这些试剂, ,通用通用性差性差. .某种试剂只能作用于某些特定类型的某种试剂只能作用于某些特定类型的微生物细胞。微生物细胞。 酶 溶 法 利用各种水解酶,如溶酶、纤维素酶、蜗牛酶等,将细胞壁分解,使细胞内含物释放出来.此法适用多种微生物,其作用条件温暖,内含物成份不易遭到破坏;细胞壁损坏的程度可以控制。存在的问题存在的问题: :易呵斥产物抑制造用易呵斥产物抑制造用, ,导致胞内物导致胞内物质释放率低的重要要素。而且溶酶价钱高，限质释放率低的重要要素。而且溶酶价钱高，限制了大规模运用。另酶溶法通用性差，不同菌制了大规模运用。另酶溶法通用性差，不同菌种需选择不同的酶有一定局限性，不适宜大量种需

6、选择不同的酶有一定局限性，不适宜大量的蛋白质提取的蛋白质提取, ,使进一步纯化带来困难。使进一步纯化带来困难。 低温超高压延续流细胞破碎仪的问世填补了市低温超高压延续流细胞破碎仪的问世填补了市场空白场空白.细胞高压破碎时会产生一定的热量，而此细胞高压破碎时会产生一定的热量，而此仪器设计有冷却循环水安装，将破碎时产生的热量仪器设计有冷却循环水安装，将破碎时产生的热量吸收降温，为我们实验任务带来了极大的方便。低吸收降温，为我们实验任务带来了极大的方便。低温超高压延续流细胞破碎仪在内部中心构造设计方温超高压延续流细胞破碎仪在内部中心构造设计方面，经过反复设计面，经过反复设计,计算和实验计算和实验,找

7、到了剪切效应、找到了剪切效应、碰撞效应、空穴效应三种效应搭配的最正确比例。碰撞效应、空穴效应三种效应搭配的最正确比例。 JN-3000PLUSJN-3000PLUS低温超高压延续流细胞破碎仪低温超高压延续流细胞破碎仪超高压细胞破碎原理图超高压细胞破碎原理图 空穴效应：空穴效应： 被柱塞紧缩的样品内积聚了极高被柱塞紧缩的样品内积聚了极高的能量的能量,经过可调理限流缝隙时瞬间失压，呵经过可调理限流缝隙时瞬间失压，呵斥高能释斥高能释 放引起空穴爆炸，致使物料剧烈粉碎细化。放引起空穴爆炸，致使物料剧烈粉碎细化。剪切效应：在高压条件下，任务区内构成了高剪切效应：在高压条件下，任务区内构成了高 强度的能量

8、聚集，当流体流经均质阀微小的流道强度的能量聚集，当流体流经均质阀微小的流道 时所产生剧烈的湍流和剪切效应将流体中颗粒或滴时所产生剧烈的湍流和剪切效应将流体中颗粒或滴 分解成微小的粒子。分解成微小的粒子。碰撞效应：经过可调理限流缝隙的样品以上述碰撞效应：经过可调理限流缝隙的样品以上述极高的线速度，撞击到用特殊资料制成的撞环极高的线速度，撞击到用特殊资料制成的撞环上，呵斥样品粉碎。上，呵斥样品粉碎。 低温超高压延续流细胞破碎仪利用超高压能量低温超高压延续流细胞破碎仪利用超高压能量使样品在柱塞的推进作用下进入均质阀，在均质阀使样品在柱塞的推进作用下进入均质阀，在均质阀内被加压，经过狭缝瞬间释放内被加

9、压，经过狭缝瞬间释放, ,产生剪切效应、空产生剪切效应、空穴效应、碰撞效应穴效应、碰撞效应. .在这三种效应作用下使细胞破在这三种效应作用下使细胞破碎，使样品均质化或分散乳化、颗粒纳米化。全过碎，使样品均质化或分散乳化、颗粒纳米化。全过程在程在4-64-6的低温循环水浴中进展，坚持原有物的低温循环水浴中进展，坚持原有物质活性和性能。质活性和性能。工工 作作 原原 理理JN-3000PLUSJN-3000PLUS1.1.样品破碎全过程都在样品破碎全过程都在4 4 6 6 低温水浴中进展，低温水浴中进展， 坚持原有物质活性和性能坚持原有物质活性和性能2.2.自动进样，可延续任务，自动进样，可延续任

10、务，2.12.1升升/ /小时小时3.3.样品处置量最少样品处置量最少5ml5ml4.4.主机运用液压动力，高压形状可恣意停机、开机，主机运用液压动力，高压形状可恣意停机、开机， 压力坚持不变压力坚持不变5.5.冲洗系统镜面抛光冲洗系统镜面抛光316L316L不锈钢管道，防止样品残留不锈钢管道，防止样品残留6.6.可在位清洗灭菌可在位清洗灭菌7.7.采用物理破碎方法，无化学残留物采用物理破碎方法，无化学残留物8.8.操作简单，运用方便操作简单，运用方便特特 点点 1.大肠杆菌等细菌破碎；酵母大肠杆菌等细菌破碎；酵母/灵芝孢子灵芝孢子 等真菌破碎；等真菌破碎； 2.蓝藻蓝藻/绿藻等藻类破碎；绿藻

11、等藻类破碎； 3.线虫等动、植物细胞破碎；线虫等动、植物细胞破碎； 4.放线菌破碎；嗜热菌破碎，原核分枝杆放线菌破碎；嗜热菌破碎，原核分枝杆 菌破碎；菌破碎； 5.酶的制备和分别；重组多肽的制备；酶的制备和分别；重组多肽的制备；运用范围运用范围 6.晶体工程；蛋白晶体；晶体工程；蛋白晶体； 7.乳剂、脂质体等纳米乳化均质；微乳乳剂、脂质体等纳米乳化均质；微乳 纳米混悬剂；蓝藻纳米混悬剂；蓝藻/绿藻等藻类破碎；绿藻等藻类破碎； 8.中草药破碎提取内容物；中草药破碎提取内容物； 9.超高压诱变育种；超高压诱变育种；10.纳米油墨、纳米油漆、纳米染料；超微纳米油墨、纳米油漆、纳米染料；超微 细化，超

12、细粉碎；细化，超细粉碎； 大肠杆菌与酵母一次破碎率均达大肠杆菌与酵母一次破碎率均达95%-99% 95%-99% 运用实例 图1大肠杆菌破壁前 图图2：大肠杆菌破壁后：大肠杆菌破壁后 大肠杆菌与酵母一次破碎率均达大肠杆菌与酵母一次破碎率均达99%- 95%99%- 95%运用实例 图1 灵芝孢子破壁前 图图2：灵芝孢子破壁后：灵芝孢子破壁后 灵芝孢子的破壁率可达灵芝孢子的破壁率可达95%左右左右运用实例 大肠杆菌与酵母一次破碎率均达大肠杆菌与酵母一次破碎率均达99%- 95%99%- 95% 灵芝孢子的破壁率可达灵芝孢子的破壁率可达95%95%左右左右 纳米乳化后的脂质体平均粒度为纳米乳化后的

13、脂质体平均粒度为.68nm.68nm， 最小可达最小可达28.2nm28.2nm 图:脂质体纳米乳化处置前后对比图 运用实例 大肠杆菌与酵母一次破碎率均达大肠杆菌与酵母一次破碎率均达99%- 95%99%- 95% 灵芝孢子的破壁率可达灵芝孢子的破壁率可达95%95%左右左右 纳米乳化后的脂质体平均粒度为纳米乳化后的脂质体平均粒度为.68nm.68nm， 最小可达最小可达28.2nm28.2nm 放线菌中某种酶失活率仅有放线菌中某种酶失活率仅有4.84.8 运用前本卷须知运用前本卷须知常见问题常见问题 问题原因问题原因 处理方法处理方法工作压力升不起来工作压力升不起来空气进入到管道内空气进入到管道内单向阀接头松动单向阀接头松动清理管道内空气清理管道内空气拧紧接头拧紧接头细胞破碎率不高细胞破碎率不高选择破碎压力不正确选择破碎压力不正确样品浓度过高样品浓度过高样品粒径过粗样品粒径过粗调整合适的破碎压力调整合适的破碎压力 大肠杆菌：大肠杆菌：1000pa1000pa左右左右 酵母菌：酵母菌：2000pa2000pa左右左右2.2.调低样品的浓度调低样品的浓度3.3.做好样品的预处理做好样