微生物检验原始记录大肠菌群

1、微生物检验原始记录（大肠菌群）检验原始记录编号：报告类别：微生物项目： 大肠菌群coliforms检验地点:样品名称： 样品编号：样品状态：口符合检验要求；门其他 环境条件: 实验依据及步骤GB4789.3-2016羊品稀木举口固体和半固体样品：称取 25g样品置盛有225ml生理盐水或磷酸盐缓冲液 的无困均质有器内均质,或放入盛有 225ml稀释液的无困均质袋中担击式均质 器拍打，制成为1:10样品匀液。依次进行10倍递增稀释。口液体样品：以无菌吸管吸取 25ml样品置盛有225ml磷酸盐缓冲液或生理盐 水的无菌锥形瓶（瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠）中混匀，为1:10样品匀<0样品匀液

2、的ph应在6.5-7.5 之间，必要时分别用1mol/lNaOH或1mol/lHcL调取1mL1： 10稀释匀液沿管壁缓缓注入 9ml磷酸盐缓冲液或生理盐水的无 菌试管中（汴意吸管或吸头尖端/、要触及稀释液面），振摇试管或换用一支无 菌吸管反复吹打，使其混合均匀，制成 1:100样品匀液。按上述操作顺序做10倍递增稀释液，每稀释一次，换用一支 1mL火菌吸 量管。从样品匀液制备到样品接种完毕，全过程不得超过15min。初发酵试验（9 卜法）每个样品，选择3个适宜的连续稀释度的样品匀液（液体样品可以选择原液），每个稀释度接种3管月桂基硫酸盐胰蛋白陈（LSD肉汤（大肠菌群测定：如果超过1ml,则用

3、双料LST肉汤）36c ± 1 C培养24h±2h ,观察倒管内是否有气泡产生。产气者进行复发酵试验，未产气则继续培养至48± 2h,产期进行复发酵试验。产气者为大肠菌群阴性。复发酵试验（证实试验）用接种环从产气的LST肉汤管中分别取培养物1环，移种于煌绿糖胆盐肉汤 （BGLB管中，36C ±1C培养48h±2h,观察产气情况。数据分析与结果菌落计数 根据证实为大肠菌群的阳性管数，查 MPN佥索表，报告大肠菌群的最可能数。二、缓冲液1 .磷酸盐缓冲液磷酸二氢钾34.0g蒸储水500ml(稀释液需要1000ml)贮存液：将34.0g磷酸二氢钾溶于

4、500ml蒸储水中，用大约175ml的1mol/l氢氧化钠溶液调节ph至7.2 ,用蒸储水稀释至1000ml后贮存冰箱。稀释液：取贮存液1.25ml用蒸储水稀释至1000ml分装于适宜容器，121c高压灭菌15min。2 .无菌生理盐水氯化钠8.5g 蒸储水1000ml将称取好的氯化钠溶于1000ml蒸储水中，121c高压灭菌15min。3 .PH调节剂1mol/l氢氧化钠溶液称取40g氢氧化钠溶于1000ml无菌蒸储水中。1mol/l HcL 溶液移取Hcl 90ml ,用无菌蒸储水稀释至1000ml。三、微生物限量采样方案(根据 GB 4789.1-2016 )1 .采样方案分为二级和三级

5、方案，二级采样方案设有n、c、m值，三级采样方案设有n、 c、m和M值。n：同一批次产品应采集的样品件数c：最大可允许超出m值的样品数m微生物指标可接受水平的限量值M微生物指标的最高安全限量值2 . 例：n=5,c=2,m=1cfu/g,M=10cfu/g, 即从一批产品中采集 5个样品，若5个样品的检测结果均小于或等于 m值(< 1cfu/g ),则这种情况是允许的；若0 2个样品的结果(X)位于m值和M值之间(1cfu/g <X< 10cfu/g ),则这种情况也是允许的；若有3个及以上样品的检验结果位于 m和M之间，则这种情况是不允许的；若有任一样品的检验结果大于 M (>10cfu/g ),则这种情况也是不允许的。检测记录：校对：检测日期:菌落总数检样原始记录初发酵试验未产气培养士 2h48复发酵实验（接种BGLB管）结果各试样菌产品检测试稀释液及产气管 数稀释液及产气管 数接结稀释液及产气 管数MPN落分析