培养基适用性验证方案

1、培养基适用性验证方案培养基适用性验证第2页共9页培养基适用性验证方案起草人：日期：年月日方案审核人：日期：年月日方案批准人：日期：年月日培养基适用性验证第3页共9页目 录1 .验证目的 32 .参照标准 33 .验证项目 34 .验证小组人员及职责 3-45 .验证可接受的标准 46 .验证材料 4-57 .菌液制备 58 .适用性检查 5-69 .控制菌检查培养基适用性验证第4页共9页1 .验证目的：需氧菌、霉菌及酵母菌计数用的培养基及控制菌培养基应进行培养基的适用性检查。本 次验证的目的是确认胰酪大豆陈琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基、麦康凯液体培养基和 麦康凯琼脂培养基适合需氧菌、霉菌及

2、酵母菌、大肠埃希菌的测定和控制菌适用性检查。2 .参照标准：2015版中国药典微生物限度检查法。3 .验证项目：胰酪大豆陈琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基、麦康凯液体培养基和麦康 凯琼脂培养基的适用性检查4 .验证小组人员及职责：4.1验证小组人员小组人员职务姓名所在部门职务组长刘秀质量管理部经理组员郝枝桃质量管理部QC主任组员王和霞质量管理部检验员组员兰丹质量管理部检验员4.2 验证人员职责及要求4.2.1 按验证方案及相关文件实施验证4.2.2 认真观察并做好验证原始记录。培养基适用性验证第5页共9页4.2.3 对实施验证的结果负责。4.3 验证中各部门的职责4.3.1 验证领导组职责4.

3、3.1.1 制订验证总计划，负责全公司验证工作的管理。4.3.1.2 确定验证项目及验证项目负责人。4.3.1.3 负责验证方案的批准工作。4.3.1.4 负责验证资料及结果的审核工作。4.3.1.5 负责验证报告的批准工作。4.3.2 验证工作小组职责4.3.2.1 负责验证方案的起草工作。4.3.2.2 参与验证方案的讨论、确认工作。4.3.2.3 负责验证方案的实施。4.3.2.4 负责验证结果的分析、统计、报告工作。4.3.2.5 参与验证结果的评价工作。4.3.3 质量部职责4.3.3.1 负责验证方案的审核工作。4.3.3.2 负责验证过程中仪器、仪表、计量器具的校验工作。4.3.

4、3.3 负责验证中各项检测工作，提供验证的检验记录、检验报告，对验证过程中的各项检验工作负责。4.3.3.4 负责验证资料和报告的审核工作。4.3.3.5 负责验证文件回收、归档管理工作。5 .合格标准：被检培养基上的菌落平均数不小于对照培养基上的菌落平均数的70%且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致。6 .试验材料：6.2 被验证培养基：沙氏葡萄糖琼脂培养基、麦康凯琼脂培养基、胰酪大豆陈琼脂培养基、 麦康凯液体培养基6.3 仪器设备：6.3.1 YX280B手提式不锈钢蒸锅培养基适用性验证第6页共9页622.DH-360型电热恒温培养箱6.2.3 250B 生化培养箱6.2.4. 101型

5、电热恒温培养箱6.3.验证用培养基名称生产厂家批号胰酪大豆陈琼脂培养基沙氏葡锢糖琼胎培乔基麦康凯琼胎培乔基麦康凯液体培养基胰酪大豆陈琼脂对照培养基沙氏葡荷糖琼脂对照培养基麦康凯琼脂对照培乔基麦康凯液体对照培养基6.4.验证用菌株：（第 代）试验菌株A口加工培疗温度培疗时间（小时）白色念珠菌黑曲霉沙氏葡锢糖琼胎培乔基20-25 C24-48h5-7天金黄色葡锢球菌大肠埃希菌胰酪大豆陈培乔基30 35 C18-24h铜绿假单胞菌7 .菌液制备7.2 取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、白色念球菌的新鲜培养物。7.3 用0.9%的无菌氯化钠溶液，制成适宜浓度的菌悬液。7.4 取黑曲霉的新鱼培

6、养物加入 3-5ml浓度为0.9%的无菌氯化钠溶液，将抱子洗脱7.5 .采用适宜的方法吸出抱子悬液至无菌试管中。7.6 用0.9%的无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的抱子悬液2h内使用；如保存在 2-8 C ,可在24h7.7 注意事项：菌液制备后，如在室温下放置，应在培养基适用性验证第7页共9页内使用，黑曲霉抱子悬液可保存在 2-8 C,在验证过的储存期内使用。8、培养基适用性检查：8.1 分别接种不大于100cfu的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的菌液至胰酪大 豆月东培养基。8.2 每株试验菌平行制备2个平板，混匀、凝固，置于 30-35 C培养不超过3大计数。8.3 分别接种不大于1

7、00cfu的白色念珠菌、黑曲霉的菌液至沙氏葡萄糖琼脂培养基。8.4 每个试验菌平行制备2个平板，混匀、凝固，置于20-25 C培养不超过5大计数。8.5 用对应的对照培养基代替被检培养基进行上述试验。8.6 结果判定：被检培养基上的菌落平均数学对照培养基上菌落平均数的70%且菌落形态大少与对照培养基上的菌落一致，判定培养基的适用性试验检测符合规定。试验时间 年 月 日完成时间 年 月 日验证菌株平皿号供试品组cfu / ml对照培养基组cfu / ml回收率应 方70%铜绿假单胞菌（培养3大计数）1-2-平均值金黄色葡稳球菌（培养3大计数）1-2-平均值大肠埃希菌（培养3大计数）1-2-平均值

8、白色念珠菌（培养5天开始计数）1-2-平均值黑曲霉菌（培养5天开始计数）1-2-平均值结论培养基适用性验证第8页共9页试验人复核人9、控制菌检查控制菌检查用培养基的适用性检查项目包括促生长能力、抑制能力及指示特性的检查。常用 培养基适用性检测项目及所用菌株见下表。大肠埃希菌麦康凯液体培养基促生长能力大肠埃希菌抑制能力金黄色葡锢球菌麦康凯琼胎培乔基促生长能力十寸斤特性大肠埃希菌9.1麦康凯液体培养基适用性检查9.1.1 促生长能力检查9.1.1.1 分别接种不大于100cfu的大肠埃希菌于被检培养基和对照培养基中。9.1.1.2 在35c条件下培养24h,与对照培养基管比较。9.1.1.3 检查标准：被检培养基管试验菌应生长良好。检验结果：9.1.2 抑制能力检查9.1.2.1 分别接种不少于100cfu的金黄色葡萄球菌于被检培养基和对照培养基中。9.1.2.2 在35c条件下培养24h,并将被检培养基与对照培养基管比较。9.1.2.3 检查标准：被检培养基管和对照培养基管试验菌均不得生长检验结果：9.2麦康凯琼脂培养基适用性检查：促生长能力+指示特性的检查9.2.1