传递窗验证方案版

1、传递窗验证方案Validation protocol of the delivery windows编 p Code.版本 Version :编写 Prepared by:日期Date:审核人日期Reviewed byData批准 Approved by:日期Date:变更记录 Change Log版本号Version变更描叙Description变更细节Section changed批准日期Release Date目录Contents1 简介是一种洁净室的辅助设备，主要用于洁净区与洁净区之间，洁净区与非洁净区之间小件物品的传递，以减少洁净室的开门次数，使洁净室的污染降低到最低程度。传递窗 内

2、安装有紫外灯，物品经紫外线照射消毒后进入洁净区。紫外线是一种电磁辐射，波长190350nm,其中以的杀菌力最强，可使DNA链上相邻喀咤碱基之间形成二聚体,抑制DNA勺复制，导致突变或死亡。紫外线的杀菌力与紫外线强度、照射时间、温度 和湿度等因素有关。本方案包括该设备的安装确认、运行确认和性能确认等内容。在确认过程中出现任何 偏差，必须及时解决偏差之后再进行下一步的确认。2 实施计划实施内容时间安排安装确认运行确认性能确认3 验证小组成员部门姓名职责QA负责验证方案、验证报告的批准负责验证方案、验证报告的审核QC负责验证方案、验证报告的审核，指导和监督方案的实施负责验证方案、验证报告的起草，参加

3、方案的实施负责验证方案、验证报告的审核，协助方案的实施4仪器及用具名称型号或规格校验单位校验编号后效期细菌培养箱GNP-9270 型广州市计量所霉菌培养箱SHP-150 型广州市计量所数显式温湿度计DWS508D广州市计量所紫外线强度测定仪TN-2254广州市计量所净化工作台HS-1300-V 型电动混匀器G560E移液器10ul移液器100 1000U15菌株和培养基名称批号生产厂家营养琼脂培养基改良马丁琼脂培养基营养肉汤培养基改良马丁培养基金更色葡萄球CMCC (B) 26003枯草芽抱杆菌CMCC (B) 63501大肠杆菌CMCC (B) 44102白色念珠菌CMCC (F) 9800

4、16安装确认由供应商技术人员作为主要安装人员，工程部人员协助安装。安装过程中对装置及其工作状态进行检查。 若确认过程中发现因为紫外灯管不符合要求而造成偏差，工程部人员负责紫外灯管的申购与更换。将安装确认结果记录于附件1和附件2。确认项目描叙工作环境确认传递窗应安装在非洁净区（培养室）与洁净区（洁净走廊）之间。非洁净区温度应为 18c27C;相对湿度应为 40%80%。电源确认设备的电源应正确连接，工作电源：AC （220 +22） V。装置确认确认紫外灯管功率。紫外灯管应正常，无损坏，匹配，紧密连接。传递窗侧门垫圈应配套、密合、完好。传递窗内部与紫外灯管表面应清洁，表面无尘土。传递窗内表面材质

5、成为不锈钢，平整光洁耐磨。备件确认是否有相同型号规格的紫外灯管备用。7运行确认运行确认在安装确认之后进行，若安装确认出现偏差，须在解决偏差之后进行。通过对传递窗进行试运行，以证明设备各项技术参数和功能能达到本公司设定要求。将运行确认结果记录于附件3和附件4。SOP确认：确认是否有传递窗使用的 SOP,作为传递窗使用操作的技术支持与指导。 验证全过程必须严格按照此 SOP对传递窗进行操作。设备操作功能确认：逐项确认各项操作功能，结果均应符合要求。互锁确认：两侧门设有互锁装置，确保两侧门不能同时处于开启状态。辐照强度测定：开启紫外灯5min后，用中心波长为的紫外线强度测定仪在灯管下方垂直中心操作面

6、处测量其辐照度值（uW/cm2）。普通型或低臭氧型直管紫外灯，新灯管的辐照度值应为：功率 10W , 65 65uW/cm2 ;功率15W, > 145 uW/cm2。使用中的灯管其辐照度值：功率 10W, >45uW/cm2 ;功率15W, >100 uW/cm 2，低于此值者应予以更换。7.5紫外强度分布：开启紫外灯 5min后，在传递窗底部测量中央及四角5个位置的紫外线强度（uW/cm2）,确定紫外线强度最弱位置。以紫外线强度最弱位置达到所需 照射剂量的时间作为消毒合格时间。洁净区非洁净区8性能确认确认紫外灯对细菌及其芽抱和真菌的杀灭效果。性能确认在运行确认之后进行，若

7、运行确认出现偏差，须在偏差解决之后进行。培养基的制备8.1.1 营养琼脂培养基配方：营养琼脂培养基粉纯化水1000ml配制：称取营养琼脂培养基粉置适宜容器中，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH至七分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌121cx15分钟。8.1.2 改良马丁琼脂培养基配方：改良马丁琼脂培养基粉纯化水1000ml配制：称取改良马丁琼脂培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH至内分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌115cx20分钟。8.1.3 营养肉汤培养基配方：营养肉汤培养基20g纯化水1000ml配制：称取营养肉汤培养基20克，加1000ml纯化水，加热溶解，加

8、热至沸，冷却至常温，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌121cx15分钟。8.1.4 改良马丁培养基配方：改良马丁培养基粉纯化水1000ml配制：称取改良马丁培养基粉，按配方比例加入纯化水，水浴加热使溶解，调pH至七分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌115cx20分钟。菌悬液的制备8.2.1接种金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中，3035c培养1824小时；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中,2328c培养1824小时。1.1.1 细菌芽孢悬液的制备：1.1.1.1 取枯草芽孢杆菌增菌液适量至营养琼脂培养基斜面，使菌液布满营养琼脂培养基斜面，3035c培养57天。用接

9、种环取菌样少许涂于玻片上，固定后以改良芽孢染色法染色，并在显微镜（油镜）下进行镜检。当芽孢形成率达95以上时，即可进行以下处理。否则，应在室温下放置一定时间，直至达到上述芽孢形成率后再进行以下处理。1.1.1.2 取适量无菌水于营养琼脂培养基斜面，以L 棒轻轻推刮下菌苔。吸出第一批洗下的菌悬液，再取适量无菌水于营养琼脂培养基斜面，重复洗菌一遍。将第一和第二批洗下的菌悬液集中于一含玻璃珠的无菌三角烧瓶内，振摇5min,打碎菌块，使成均匀的芽孢悬液。1.1.1.3 将芽抱?放于 80c水浴中10min （或60C, 30min）,以杀灭残余的细菌繁殖体。待冷至室温后，保存于4冰箱中备用。有效使用期

10、为半年。8.2 稀释液1 %蛋白月东一PBS溶液：取磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、蛋白月东，加水 1000ml,微 温溶解，分装，置高压灭菌器 121cq0分钟灭菌。8.3 菌片的制备8.3.1 试验中使用的菌片是以菌液滴加于载体上制成（X的不锈钢片）。所用载体染菌前应进行脱脂处理。脱脂方法如下：将载体放在含肥皂的水中煮沸30min;纯化水洗净；纯化水煮沸10min;用纯化水漂洗至 pH呈中性；晾干备用。8.3.2 载体经灭菌后使用滴染法染菌。将灭菌载体平放于灭菌平皿内，每个载体滴注10ul 菌悬液，用10ul 移液器接灭菌塑料吸头，滴染菌液，并用接种环涂匀整个载体表面。滴染菌液后，染菌载体可置超净

11、台上晾干后使用。8.3.3 每个菌片的染菌量即回收菌量应为1X1055X 106cfu/片。8.4 载体定量消毒试验8.4.1 取 4 种菌染菌载片各4 个。开启紫外灯5min 后，将 16 个染菌载片平放于无菌平皿内，水平放于紫外线强度最弱的位置处照射，于4个不同间隔时间（15min、30 min、45 min、60min）各取出1个染菌玻片，分别投入 4个盛有10ml稀释液 的试管中，用电动混匀器震荡 20s或振打80次，洗脱载片上的菌体。8.4.2 取洗脱液或其稀释液 1ml,作平板倾注。细菌放 3035c培养48小时做活菌计 数,真菌放2328c培养72小时做活菌计数。8.4.3 阳性

12、对照，除不做照射处理外，操作同上。8.4.4 杀灭对数值计算杀灭对数值（KL）=对照组活菌浓度对数值 -试验组活菌浓度对数值8.4.5 消毒合格时间在照射强度最弱处，对细菌及其芽抱和真菌的杀灭对数值3所需的时间即为消毒合格时间。其它传递窗，确定最弱照射强度后，根据所需照射剂量确定消毒合格时间。照射剂量（uWV- s/cm2）=紫外线照射强度（uW/cm2） x时间（s） 将性能确认结果记录于附件5。9 再验证9.1 传递窗构造或紫外灯管安装位置发生改变时，需进行再验证。9.2 若无任何改变或偏差时，每6个月对该系统进行紫外灯强度确认。10修改事项在实施过程中，如果方案需要修改，必须提交书面报告，阐述修改的原因、修 改的内容，并经过相关部门及QA的认可