药物鉴别试验 ppt课件

1、药物的鉴别实验药物的鉴别实验Identification test of drugIdentification test of drug第二章第二章 药物的鉴别实验药物的鉴别实验 药物的杂质检查药物的杂质检查 药物定量分析与分析方法验证药物定量分析与分析方法验证药品检验任务的根本规律药品检验任务的根本规律Basic regularity of drug inspection一、药物鉴别的目的和特点一、药物鉴别的目的和特点1 1鉴别目的鉴别目的 药物鉴别根据药物的化学构造药物鉴别根据药物的化学构造和理化性质进展某些化学反响，测定某些理化和理化性质进展某些化学反响，测定某些理化常数或光谱特征，来判

2、别药物及其制剂的真伪。常数或光谱特征，来判别药物及其制剂的真伪。只需在药物鉴别无误的情况下，药物被证明是只需在药物鉴别无误的情况下，药物被证明是真的，才有必要接着进展杂质检查、有效化学真的，才有必要接着进展杂质检查、有效化学成份含量测定。在药物分析中药物鉴别属首项成份含量测定。在药物分析中药物鉴别属首项任务，为确保临床用药的平安与有效提供科学任务，为确保临床用药的平安与有效提供科学根据。根据。第一节常用鉴别方法第一节常用鉴别方法1 1药物鉴别是根据药物的分子构造、理化药物鉴别是根据药物的分子构造、理化性质，采用生物学、化学或物理化学方法来判性质，采用生物学、化学或物理化学方法来判别药物的真伪。

3、别药物的真伪。药典所收载的药物项下的鉴别实验方法，仅药典所收载的药物项下的鉴别实验方法，仅适用于贮藏在有标签容器中的药物，用以证明适用于贮藏在有标签容器中的药物，用以证明能否为其所标示的药物，它与分析化学中的定能否为其所标示的药物，它与分析化学中的定性鉴别有所区别。性鉴别有所区别。2 2特特 点点 2药物鉴别不只由一项实验就能完成，药物鉴别不只由一项实验就能完成，而是采用一组实验工程而是采用一组实验工程2个或个或2个以上全个以上全面评价一个药物，力求使结论正确无误。面评价一个药物，力求使结论正确无误。 3药物鉴别通常选用综合分析实验法，用化学鉴别法、药物鉴别通常选用综合分析实验法，用化学鉴别法

4、、仪器分析法、生物检定法等不同方法鉴别同一种供试品，仪器分析法、生物检定法等不同方法鉴别同一种供试品，综合做出判别。普通每种药品选用综合做出判别。普通每种药品选用24种方法进展鉴别实种方法进展鉴别实验，相互取长补短。验，相互取长补短。 药物鉴别采用的方法应是专属性强，重现药物鉴别采用的方法应是专属性强，重现性好，灵敏度高，并且简单可行、快速。性好，灵敏度高，并且简单可行、快速。常用的方法有化学法、紫外吸收光谱法、常用的方法有化学法、紫外吸收光谱法、薄层色谱法、红外吸收光谱法等多种方薄层色谱法、红外吸收光谱法等多种方法，下面主要引见几种常用的鉴别方法。法，下面主要引见几种常用的鉴别方法。二、常用

5、鉴别方法二、常用鉴别方法生物学法生物学法 HPLC、GC鉴别法鉴别法 薄层色谱鉴别法薄层色谱鉴别法 纸色谱鉴别法纸色谱鉴别法 呈色反响鉴别法呈色反响鉴别法 紫外光谱鉴别法紫外光谱鉴别法 红外光谱鉴别法红外光谱鉴别法 沉淀生成反响鉴别法沉淀生成反响鉴别法 色谱鉴别法色谱鉴别法 气体生成反响鉴别法气体生成反响鉴别法 测定生成物的熔点测定生成物的熔点荧光反响鉴别法荧光反响鉴别法 1、特点：化学鉴别法操作简便、快速、实验、特点：化学鉴别法操作简便、快速、实验本钱低，是药物鉴别时最常用的方法。本钱低，是药物鉴别时最常用的方法。2、鉴别根据：根据药物与化学试剂在一定条、鉴别根据：根据药物与化学试剂在一定条

6、件下发生离子反响或官能团反响产生不同颜件下发生离子反响或官能团反响产生不同颜色，生成不同沉淀，放出不同气体，呈现不色，生成不同沉淀，放出不同气体，呈现不同荧光，从而做出定性分析结论。同荧光，从而做出定性分析结论。一化学鉴别法一化学鉴别法1干法干法 干法系指将供试品加适当试剂在规定的温度干法系指将供试品加适当试剂在规定的温度条件下普通是高温进展实验，观测此时条件下普通是高温进展实验，观测此时所发生的特异景象。所发生的特异景象。 常用的方法有焰色实验和加热分解实验。常用的方法有焰色实验和加热分解实验。3 3、类型：根据实验条件的不同化学鉴别法、类型：根据实验条件的不同化学鉴别法可分为干法和湿法两种

7、类型。可分为干法和湿法两种类型。l 焰色实验：利用某些元素所具有的特异焰焰色实验：利用某些元素所具有的特异焰色，可鉴别它们为哪一类盐类药物。色，可鉴别它们为哪一类盐类药物。l 方法为：取铂丝，用盐酸潮湿后，蘸取供方法为：取铂丝，用盐酸潮湿后，蘸取供试品，在无色火焰中熄灭，使火焰显出特殊试品，在无色火焰中熄灭，使火焰显出特殊的颜色。的颜色。l 例如：钠为鲜黄色，钾为紫色。例如：钠为鲜黄色，钾为紫色。l 在临床运用的青霉素类及头孢菌素类药在临床运用的青霉素类及头孢菌素类药物大多为其钠盐或钾盐，鉴别时利用钠、钾物大多为其钠盐或钾盐，鉴别时利用钠、钾盐的焰色反响。盐的焰色反响。l 加热分解：在适当的温

8、度条件下，加热使加热分解：在适当的温度条件下，加热使供试品分解，生成有特殊气味的气体。供试品分解，生成有特殊气味的气体。l 例如：舒林酸的加热分解取本品约例如：舒林酸的加热分解取本品约15mg,置试管中置试管中,小火加热数分钟，产生刺激性小火加热数分钟，产生刺激性的二氧化硫气体的二氧化硫气体,并能使潮湿的碘并能使潮湿的碘-淀粉试纸淀粉试纸蓝色消褪。蓝色消褪。2 2湿法湿法 湿法系指将供试品和试剂在适当的溶剂中，湿法系指将供试品和试剂在适当的溶剂中，于一定条件下进展反响，发生易于观测的于一定条件下进展反响，发生易于观测的化学变化，如颜色、沉淀、气体、荧光等。化学变化，如颜色、沉淀、气体、荧光等。

9、l 呈色反响鉴别法：呈色反响鉴别法：l 系指供试品溶液中参与适当的试剂溶液，系指供试品溶液中参与适当的试剂溶液，在一定条件下进展反响，生成易于观测的有在一定条件下进展反响，生成易于观测的有色产物。色产物。l 常用的反响类型有：常用的反响类型有：l 三氯化铁呈色反响三氯化铁呈色反响 酚羟基或水解酚羟基或水解后产生酚羟；后产生酚羟；l 异羟肟酸铁反响异羟肟酸铁反响 多为芳酸及其酯多为芳酸及其酯类、酰胺类；类、酰胺类；l 茚三酮呈色反响茚三酮呈色反响 氨基酸及氨基糖氨基酸及氨基糖苷类；苷类；l 重氮重氮- -巧合显色反响巧合显色反响 芳伯氨基或能芳伯氨基或能产生芳伯氨基；产生芳伯氨基；l 氧化复原显

10、色反响及其他颜色反响。氧化复原显色反响及其他颜色反响。l 沉淀生成反响鉴别法沉淀生成反响鉴别法l常用的反响有：常用的反响有：l 与重金属离子的沉淀反响在一定条件下，与重金属离子的沉淀反响在一定条件下，药物和重金属离子反响，生成不同方式的沉药物和重金属离子反响，生成不同方式的沉淀；淀；l 与硫氰化铬铵雷氏盐的沉淀反响多与硫氰化铬铵雷氏盐的沉淀反响多为生物碱及其盐，具有芳香环的有机碱及其为生物碱及其盐，具有芳香环的有机碱及其盐；盐；l 其他沉淀反响。其他沉淀反响。l 荧光反响鉴别法：荧光反响鉴别法：l 常用的荧光发射方式有常用的荧光发射方式有l 药物本身可在可见光下发射荧光；药物本身可在可见光下发

11、射荧光；l 药物溶液加硫酸使呈酸性后，可见光下发药物溶液加硫酸使呈酸性后，可见光下发射荧光；射荧光；l 药物和溴反响后，于可见光下发射出荧光；药物和溴反响后，于可见光下发射出荧光；l 药物和间苯二酚反响后，发射出荧光及药药物和间苯二酚反响后，发射出荧光及药物经其他反响后，发射荧光。物经其他反响后，发射荧光。 l气体生成反响鉴别法气体生成反响鉴别法l 大多数的胺铵类药物、酰脲类药物大多数的胺铵类药物、酰脲类药物以及某些酰胺类药物，可经强碱处置后，加以及某些酰胺类药物，可经强碱处置后，加热，产生氨胺气；热，产生氨胺气；l 化学构造中含硫的药物，可经强酸处置化学构造中含硫的药物，可经强酸处置后，加热

12、，发生硫化氢气体硫喷妥；后，加热，发生硫化氢气体硫喷妥；l 含碘有机药物经直火加热，可生成紫色含碘有机药物经直火加热，可生成紫色碘蒸气；碘蒸气；l 含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解含醋酸酯和乙酰胺类药物，经硫酸水解后，加乙醇可产生乙酸乙酯的香味。后，加乙醇可产生乙酸乙酯的香味。1 1紫外紫外- -可见分光光度法可见分光光度法 紫外紫外- -可见分光光度法可见分光光度法UV-VisUV-Vis是药典中常是药典中常用的一种药品鉴别方法，鉴别时普通采用对比用的一种药品鉴别方法，鉴别时普通采用对比法，即按规定的方法配制供试品溶液与对照品法，即按规定的方法配制供试品溶液与对照品溶液，经过对比吸收光谱的

13、特征数据、吸收度溶液，经过对比吸收光谱的特征数据、吸收度或吸收系数、吸收光谱的一致性等进展鉴别。或吸收系数、吸收光谱的一致性等进展鉴别。二仪器鉴别法二仪器鉴别法1测定最大吸收波长及不同波长的吸收度比值。例如：丙酸倍氯米松，取本品精细称定，加乙醇溶解并定量稀释成浓度为20g/ml的溶液，依法测定，在239nm处有最大吸收，吸收度为0.570.60；在239nm与263nm波优点的吸收度比值应为2.252.45。紫外紫外- -可见分光光度法运用时，可见分光光度法运用时， 主要有以下几种方式：主要有以下几种方式：2 2测定吸收系数。测定吸收系数。 药品在一定波长下的吸收系数，可用于药品药品在一定波长

14、下的吸收系数，可用于药品的鉴别。的鉴别。 例如：甲砜霉素，取本品精细称定，加水溶例如：甲砜霉素，取本品精细称定，加水溶解并定量稀释成浓度为解并定量稀释成浓度为200200g/mlg/ml的溶液，依的溶液，依法测定，在法测定，在266nm266nm和和276nm276nm处有最大吸收，吸处有最大吸收，吸收系数分别为收系数分别为25252828和和21.521.523.523.5；取上述；取上述供试品溶液供试品溶液1ml1ml，加水稀释成，加水稀释成20ml20ml后，在后，在224nm224nm处有最大吸收，吸收系数为处有最大吸收，吸收系数为370370400400。3 3对比吸收度或吸收系数的

15、比值。对比吸收度或吸收系数的比值。 取不同吸收峰或吸收谷处的吸收度的比值作取不同吸收峰或吸收谷处的吸收度的比值作为鉴别的根据。由于溶液浓度和吸收池厚度为鉴别的根据。由于溶液浓度和吸收池厚度均一样，因此用此法可消除浓度和厚度的影均一样，因此用此法可消除浓度和厚度的影响。响。 例如例如: :维生素维生素B12B12的鉴别，的鉴别， 20192019年版规定年版规定361nm361nm处的吸收度与处的吸收度与278nm278nm处的吸处的吸收度比值应为收度比值应为1.701.701.881.88，361nm361nm处的吸收处的吸收度与度与550nm550nm处的吸收度比值应为处的吸收度比值应为3.

16、153.153.453.45。 4 4对比吸收光谱的一致性。对比吸收光谱的一致性。 用上述几种方法鉴别时，无法发现吸收曲用上述几种方法鉴别时，无法发现吸收曲线其他部分的差别。必要时可将浓度一样线其他部分的差别。必要时可将浓度一样的试样与规范品在同一条件下分别扫描其的试样与规范品在同一条件下分别扫描其吸收光谱，对比其一致性；也可利用文献吸收光谱，对比其一致性；也可利用文献中的规范图谱对照。中的规范图谱对照。图图4-1 4-1 连翘甙的紫外吸收图谱连翘甙的紫外吸收图谱l 特点：红外吸收光谱法特点：红外吸收光谱法IRIR是一种专属性很强、是一种专属性很强、运用广泛固体、液体、气体样品的鉴别方法。运用

17、广泛固体、液体、气体样品的鉴别方法。l 作用：主要用于组成单一、构造明确的原料药鉴作用：主要用于组成单一、构造明确的原料药鉴别，特别是构造复杂、用化学方法不易鉴别的药物。别，特别是构造复杂、用化学方法不易鉴别的药物。2 2红外吸收光谱法红外吸收光谱法 l 鉴别方法：采用规范图谱对比法，即在药典规鉴别方法：采用规范图谱对比法，即在药典规定的条件下测定供试品的图谱，然后与定的条件下测定供试品的图谱，然后与对照。对照。l 对照时普通先看最强峰的吸收位置、外形、数对照时普通先看最强峰的吸收位置、外形、数目等能否一致，然后再检查中等强度缝和弱吸收目等能否一致，然后再检查中等强度缝和弱吸收峰能否对应，假设

18、供试品的红外光吸收图谱与对峰能否对应，假设供试品的红外光吸收图谱与对照品的图谱完全一致，普通可以为是同一种化合照品的图谱完全一致，普通可以为是同一种化合物。物。 为了确保鉴别结果准确无误，药典普通不单为了确保鉴别结果准确无误，药典普通不单独用本法进展鉴别，常与其他理化方法结独用本法进展鉴别，常与其他理化方法结合进展鉴别。合进展鉴别。 如：如： 20192019年版二部苯酚鉴年版二部苯酚鉴别项下规定：取本品别项下规定：取本品0.1g0.1g，加水，加水10ml10ml溶解溶解后，照下述方法实验。后，照下述方法实验。1 1取溶液取溶液5ml5ml，加三氯化铁试液，加三氯化铁试液1 1滴，即显滴，即

19、显蓝紫色。蓝紫色。2 2取溶液取溶液5ml5ml，加溴试液，即生成瞬即溶，加溴试液，即生成瞬即溶解的白色沉淀，但溴试液过量时，即生成解的白色沉淀，但溴试液过量时，即生成耐久的沉淀。耐久的沉淀。3 3本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱光谱集光谱集240240图一致。图一致。图图4-2 4-2 苯酚的红外光吸收谱图苯酚的红外光吸收谱图 薄层色谱法薄层色谱法TLCTLC是将细粉状的吸附剂或载体涂是将细粉状的吸附剂或载体涂布于一块具有光洁外表的玻璃板、塑料片或铝基片布于一块具有光洁外表的玻璃板、塑料片或铝基片上，构成以均匀薄层厚度上，构成以均匀薄层厚度0.250.25

20、1mm1mm, ,待点样、待点样、展开后，各组分在薄层上得到彼此分别的方法，也展开后，各组分在薄层上得到彼此分别的方法，也是目前药典中收载最多的药品鉴别方法之一。是目前药典中收载最多的药品鉴别方法之一。3 3薄层色谱法薄层色谱法 l 鉴别原理：同一种药物在同样条件下的薄鉴别原理：同一种药物在同样条件下的薄层色谱行为是一样的层色谱行为是一样的, ,依此可以鉴别药物及依此可以鉴别药物及其制剂的真伪。其制剂的真伪。l鉴别时将供试品和对照品按中国药典规定，鉴别时将供试品和对照品按中国药典规定，用同种溶剂配成同样浓度的溶液，在同一用同种溶剂配成同样浓度的溶液，在同一薄层板上点样、展开、显色，供试品所显薄

21、层板上点样、展开、显色，供试品所显主斑点的颜色、位置应与对照品的主斑点主斑点的颜色、位置应与对照品的主斑点一样。一样。 高效液相色谱法高效液相色谱法HPLCHPLC是近年来药物分是近年来药物分析领域中运用最广泛的分别分析技术，广析领域中运用最广泛的分别分析技术，广泛用于药品的含量测定和真伪鉴别。泛用于药品的含量测定和真伪鉴别。4 4高效液相色谱法高效液相色谱法 高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进展分别测流动相泵入装有填充剂的色谱柱进展分别测定的色谱方法，用其进展药品鉴别时，普通定的色谱方法，用其进展药品鉴别时，普通规定按供

22、试品含量测定项下的高效液相色谱规定按供试品含量测定项下的高效液相色谱条件进展实验，根据供试品和对照品色谱主条件进展实验，根据供试品和对照品色谱主峰保管时间峰保管时间tRtR的一致性进展判别。图的一致性进展判别。图4-34-3、图、图4-44-4。min0123456789mAU -2-101234 VWD1 A, Wavelength=327 nm (LUYUS-YSTU27001.D) Area: 40.9257 6.061图图4-3 4-3 绿原酸规范品色谱图绿原酸规范品色谱图min0123456789mAU -2-101234 VWD1 A, Wavelength=327 nm (LUY

23、US-YH0000008.D) Area: 57.9009 6.035 - luyunsun 图图4-4 4-4 样品色谱图样品色谱图性状项和物理常数确认性状项和物理常数确认 鉴别项下规定的实验鉴别项下规定的实验 原原料料药药鉴鉴别别制制剂剂鉴鉴别别鉴别实验的工程鉴别实验的工程 Test items 性性 状状 DescriptionDescription定义：定义： 反映药物特有的物理性质，如外观、溶解反映药物特有的物理性质，如外观、溶解度和物理常数等。度和物理常数等。外 观溶解度物理常数外观：指药物的聚集形状、晶型、色泽以及臭、外观：指药物的聚集形状、晶型、色泽以及臭、味等性质。味等性质。

24、 如二巯基丁二钠的描画为如二巯基丁二钠的描画为“本品为白色至本品为白色至微黄色的粉末；有类似蒜的特臭。微黄色的粉末；有类似蒜的特臭。 溶解度：一定程度上反映了药品的纯度。药品在溶解度：一定程度上反映了药品的纯度。药品在不同溶剂中的溶解性能用不同溶剂中的溶解性能用“极易溶解、易溶、溶解、极易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、极微溶解、几乎不溶或不溶来描略溶、微溶、极微溶解、几乎不溶或不溶来描画。画。物理常数：反映其纯杂程度。药典收载的物理常物理常数：反映其纯杂程度。药典收载的物理常数包括：相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、数包括：相对密度、馏程、熔点、凝点、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸折光率、黏度、酸值、皂化值、羟值、碘值、吸收系数。收系数。 性性 状状 DescriptionDescription熔熔 点点性 状-固体熔化成液体的温度 熔融同时分解的温度 自初熔至全熔的一段温度 物理常数物理常数比旋度：在一定波长与温度下，偏振光透过长比旋度：在一定波长与温度下，偏振光透过长1dm1dm且每且每1ml1ml中含有旋光性物质中含有旋光性物质1g1g的溶液时测得的溶液时测得的旋光度。用的旋光度。用 表示。表示。吸收系数：在给定的波长、溶剂和温度等条件吸收系数：在给定的波长、溶剂和温度等条件下，吸光物质在单位浓度、单位液层厚度时的下