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1、.解离液 :常用于根尖等细胞的涂片,它能使细胞壁中层(果胶质)溶解,而使细胞分开。配方 :酒精(体积分数 95%) 1 份,浓盐酸(质量分数 15%) 1 份,二者混合即成。盐酸水解时间对染色效果影响很大, 水解时间短, 易着色但较难压片; 水解时间长,染色慢而色淡;超过 20min 或水解温度过高,往往染色极淡,或染不上色。各种材料最合适的时间有差别,一般来说,大染色体材料水解时间可较长,小染色体材料宜短。解离就是用要药液使组织的细胞相互分离开来, 便于最后制片时能被压成一薄层进行显微观察。 解离液中 酒精的作用 是迅速杀死细胞, 固定细胞的分裂相 (将洋葱根尖剪下后,如果不立即投入固定液中
2、将其杀死并令其各种细胞结构凝固,那么,整个根尖将一个分裂期细胞也找不到!);而 盐酸能溶解果胶, 从而使洋葱细胞的细胞壁软化,并使细胞间的中胶层物质溶解,从而达到分离细胞的目的。另外解离时间不宜过短,否则根尖未充分解离,压片时细胞分不开;但又不能太长,否则使根尖过分酥软,无法进行漂洗和染色,且染色体成分被破坏。这一步是实验成功与否的关键漂洗的目的是去除根中多余的解离液,特别是盐酸,防止解离过度,破坏染色体结构。(注:不是因为染色时用的是碱性染料龙胆紫,酸与碱发生反应会影响染色效果,龙胆紫溶液呈酸性,而碱性染料是根据染料物质中助色基团电离后所带的电荷来决定。一般来说,助色基团带正电荷的染色剂为碱
3、性染色剂,反之则为酸性染色剂。)(但观察动物细胞有丝分裂中, 不能用盐酸和酒精来 “解离 ”动物组织。动物细胞不分散的原因是细胞膜上的某些蛋白质分子 嵌入到相邻细胞的细胞膜内,有的还形成凹凸式 镶嵌结构。盐酸和酒精都不能破坏这两种结构,因此无法用盐酸和酒精来 “解离 ”动物组织 ,只能用胰蛋白酶 .对于植物细胞,胰蛋白酶也没法发挥作用。 )固定液 (卡诺氏液 ): 卡诺氏固定液适用于一般植物组织和细胞的固定 ,常用于根尖 ,花药压片及子房石蜡切片等 .有极快的渗透力 ,根尖材料固定 1520min 即可 , 花药则需 1h左右 ,此液固定最多不超过 24h,固定后用 95%酒精冲洗至不含冰醋酸为止 ;如果材料不马上用 ,需转入 70%酒精中保存 .固定液的重要特性是能迅速穿1 / 2.透细胞,将其固定并维持染色体结构的完整性,还要能够增强染色体的嗜碱性,达到优良染色效果。配方 :无水酒精 3 份 :冰醋酸 1 份 或无水乙醇 6 份,氯仿 3 份,冰醋酸 (乙酸) 1 份。卡诺氏固定液主要是 固定细胞形态并维持染色体结构的完整性,还能提高染色效果,但是并没有解离的作用。解离液的作用是使细胞分散开,便于观察。 在高中课本有丝分裂的实验中, 解离液的酒精其实就有固定的作用 ,我想这是为了简化实验程序,因为
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