卫生理化检验技术-期末复习知识讲解

1、卫生理化检验技术-期末复习第一部分：水质理化检验1、水污染定义： 在人类的社会活动和自然因素的影响下，给各种水体环境带 来杂质，当这些杂质达到一定程度就会发生水质变化，给人类环境和水的利用 产生不良影响，就称水污染。2、水质： 水及其中杂质所共同表现出来的综合特征。3、水质指标： 衡量水中杂质的具体尺度。各种水质指标表示水中杂质的种类和 数量，由此可判断水质的优劣和是否符合要求。第一节、三氮的测定NH3-N、NO2- N 、 NO3-N 总称为三氮，主要来自含氮有机物和粪便污染，以 及特殊工业污水。随着无机化作用的进行，水中有机氮化合物不断减少，微生 物的营养素不断减少，水中致病性微生物也逐渐

2、减少，因此三氮的含量多少常 作为水体有机污染程度以及自净能力的指标。无机化作用： 水中复杂的含氮有机物在微生物和氧气的作用下转化为简单无机 物的过程。NH3 (NH4+) f N02 N03-+-新近 (污染情况水体自净能力)-+-不久-+很久+连续一、NH3 N 氨氮氨氮在水中主要以两种形态存在 NH4+和NH3。一般要求饮用水中的氨氮不得超过 0.02mg/L。1、纳氏试剂比色法（ 1）原理： 在碱性溶液中氨与纳氏试剂碘化汞钾生成棕黄色的碘化氧汞胺，反 应产物在 15-30 分钟内稳定，颜色深浅与氨氮的含量成正比。（ 2）特点： 本法是用于无色透明、氨氮含量较高的水样，本法准确、操作简 便

3、、但抗干扰能力差。2、样品前处理 -蒸馏法a. 原理：利用在碱性条件下NH3易挥发，通过蒸馏使其与水中共存成分分离而 消除干扰，再进行比色法检测。b. 特点：本法可分析有色浑浊干扰成分多的水样，也可用来分析成分复杂的工 业废水和生活污水。c. 操作：加热蒸馏，稀酸溶液做吸收液。水样调至中性水样（ 25.0ml） 标准系列J+水至25mlJ+酒石酸钾钠J+纳氏试剂混匀，放置 15 分钟，比色测定d. 注意事项：a采样后尽快分析。如需保存加硫酸使 PH1.52于4C下保存.b 余氯加Na2S2O3除去。c水硬（Ca2+ Mg2 + ）加酒石酸钾钠溶液络合。d蒸馏 时PH应为7.4,加缓冲溶液。e加

4、入标准溶液后即加水稀释混匀，再加其它试 剂，防止生成沉淀。 f 测定时，避免在同一环境内使用浓氨水。T *匚F（NH3-N）二V e计算：T：水样颜色相当于标准溶液的体积（ml）C:标准溶液的浓度（ug/ml）V：取样量（ml）二、N02- N是含氮有机物分解的中间产物，水中检出亚硝酸盐氮，说明污染有机氮化合物正在分解，水体在不久前受到污染，结合 NH3-N、N03-N，可推测水体污染和自净程度。饮用水N02-N不得超过0.001mg/L比色法1、原理：在稀盐酸溶液中，亚硝酸与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，生成重氮化对氨基苯磺酸，后者再与盐酸甲萘胺偶合产生紫红色偶氮染料，在540nm处比色测定亚

5、硝酸盐的含量。2、 操作：处理后水样调至中性标准系列J+水至50mlJ+对氨基苯磺酸混匀放置3分钟J+醋酸钠缓冲溶液混匀J+盐酸甲萘胺混匀放置10分钟比色测定3、 注意事项：（1）有色金属离子干扰测定，用 AI（OH）3絮凝法，过滤除去悬浮物(2)重氮化最佳PH1.4,偶合化最佳PH2.02.5,用醋酸钠缓冲溶液来维持。(3)显色速度与温度有关，温度低于 15C时，可适当进行水浴加 热。染料的稳定性也与温度有关,温度低,显色慢褪色也慢；温 度高，显色快褪色也快。( 4)试剂加入次序应严格遵守操作步骤，试剂的加入要间隔合适 的反应时间。三、N03- N是水中含氮有机物无机化作用的最终产物，如果水

6、中只有NO3-N ，有机氮、NH3-N、 N02-N 都不存在，则表示污染的有机物已分解完全。但N03-N 含量过高，对人体健康有害，可引起儿童血液中变性血红蛋白增加。有些国家规 定，饮用水中 N03-N 不得超过 20mg/L。1 、麝香草酚分光光度法( 1 )原理： 硝酸盐与麝香草酚在浓硫酸溶液中生成硝基酚，在碱性溶液中发生 分子重排而变为黄色化合物， 415nm 处比色测定。(2)注意事项：a去除颜色：用AI(0H)3絮凝法，过滤除去悬浮物。b 去处氯化物：AgN03 AgCI Cl + N03 NO + NOCIc 扣除亚硝酸盐的影响：加高锰酸钾N02 H2S03 N0 HN032、二

7、磺酸酚比色法浓硫酸与酚作用生成二磺酸酚，二磺酸酚在无水条件下与硝酸根作用，生成硝 基二磺酸酚，中和至碱性，后者发生分子重排而变为黄色化合物， 410nm 处比 色测定。3、镉柱还原法4、紫外分光光度法第二节、耗氧量的测定一、概述1、定义：COD (chemical oxygen dema nd是指水中还原性物质在规定的条件 下，被强氧化剂氧化，所消耗氧化剂相当于氧的量。结果以 O2mg/L 表示。用 于表明水中有机物的含量，是评价有机物污染的指标之一。水中有机物包括碳水化合物、蛋白质、油脂、氨基酸、脂肪酸、酯类等，其 来源一是动物或植物的残骸分解，二是来自排入水体的生活污水和工业废水。 二、测

8、定方法1 、酸性 KMnO4 法(1) 原理： 水中还原性物质在酸性条件下，加热至沸时被 KMnO4 氧化，剩余氧化剂用H2C2O4还原，根据KMnO4的量求COD。(2) 操作步骤：100.0ml水样置于处理锥形瓶+ H2SO4+1O.OmlK MnO4J+加热至沸10mi nJ+ 10.0ml H2C2O4J+ KMnO4 v1J+ 10.0ml H2C2O4J+ KMnO4 v2计算0.01N(N1VI = N2V2 )(3)注意事项：a测定要严格按操作条件进行。b反应要维持一定的酸度，以H + 0.43M为宜。太高KMnO4自动分解；过低反应速度太慢。酸度只能用H2SO4调节。c水样消

9、耗KMnO4为原加入量的一半左右，如果水样 COD值较 高(即高锰酸钾的特征色很快消失)。则需将水样稀释后测定，稀释水样要做 空白测定。由于稀释倍数不同 COD值不同。因此测定结果要注明稀释倍数。d 要测平行样e Cl-浓度大于300mg/L有干扰2、碱性KMnO4法(1) 原理：水样的还原性物质在碱性条件下，用 KMnO4氧化，过量的KMnO4在酸性条件下用H2C2O4还原。(2) 操作步骤：由于碱性条件下KMnO4氧化力低，可防止Cl-干扰。酸性CODMn大于碱性CODMn。3、K2Cr2O7一定量的水样在强酸性条件下，K2Cr2O7将有机物氧化，剩余的氧化剂K2Cr2O7以邻菲罗啉为指示

10、剂，用硫酸亚铁铵回滴，由消耗氧化剂K2Cr2O7的量求 COD。4、以上三种方法的比较方法酸性KMnO4法碱性KMnO4法K2Cr2O7氧化剂KMnO4KMnO4K2Cr2O7反应 条件H + + KMnO4沸水浴30分钟OH-+ KMnO4加热10分钟H2SO4 AgSO4回流2小时适用 范围清洁水Cl -小于 300 mg/L清洁水Cl -大于 300 mg/L污水及工业废 水特点简单，分析时间短， 重现性好，大量Cl - 有干扰，氧化不完全50%左右能消除大量的Cl -干扰，氧 化更不完全v 10%费事，操作繁 杂，重现性好 氧化完全95 100%第三节、挥发性酚的测定一、酚的分类挥发性

11、酚：是指蒸馏时能随水蒸气一起挥发出的，多数沸点小于230C的酚。结果以C6H50mg/L计，多数是指一元酚类。二、苯酚特性弱酸性、易氧化、易吸附、易被微生物分解，mp42°C , bp181.7°C四、测定方法1、水样的采集与保存硬质玻璃瓶，采样后尽快分析，加保存剂后也只能在4C不超过24h。保存方法：a、+ NaOH使PH<11 一钠盐，降低挥发性，抑制微生物分解。b、+ H3PO4 PH=4，力卩CuSO4抑制微生物2、样品前处理水蒸气蒸馏：全玻蒸馏器250ml水样+ H3PO4 PH=4 + CuSO45ml蒸馏收集250ml馏液（各种酚馏出的 速度相差很大）3

12、、溴化滴定法a.原理：在含过量溴的溶液中，酚与溴反应生三溴苯酚剩余的溴与碘化钾作 用，释放出游离碘，再以硫代硫酸钠标液滴定，根据硫代硫酸钠标液的用量。与空白溶液比较得出酚的含量 b.操作：酚的溴化碘的游离滴定 c.注意事项：不能直接取溴水：剧毒易挥发，取量不准确且新生态反应活性 高，有利于溴化反应完全进行。4、4氨基安替比林比色法(1) 原理：在PH=10.0±0.2和铁氰化钾作为氧化剂的条件下，显色剂 4氨基 安替比林与酚类化合物生成红色安替比林染料，比色测定。水溶液中入=510nm颜色稳定30分钟；CHCI3溶液中入=460nm颜色稳定4h(2) 方法特点：不能测定对位有取代基的

13、酚；直接比色法适于0.12mg/L水 样；萃取比色法适于0.0020.1mg/L水样。(3) 注意点：a使用全玻磨口蒸馏器。b蒸馏时用H3PO4调。c严格遵守加液 顺序。d加入氨缓冲溶液，使溶液呈碱性，防止 4-氨基安替比林缩合为安替比林红。 e加入4-氨基安替比林与酚缩合。f 加入氧化剂以形成醌式结构的红色氨替比林染料，先加氧化剂可将酚氧化成 醌。第四节、铬的测定2、测定 Cr( W)( 1)二苯碳酰二肼比色法a 原理： 在酸性条件下，六价铬与二苯碳酰二肼生成紫红色络合物。比色测b 注意点： 造成Cr( m)损失和污染的因素：样品的保存期尽量短，容器内壁要光滑，否则易吸附，不能用刷子刷，容器

14、不能用铬酸洗液洗。影响比色定量的因素： 水样本身有色，水样浑浊。影响氧化还原的因素： 酸度对反应有影响，温度影响稳定性。(2) 测总铬碱性 KMnO4a 原理：Cr3+ + KMnO4 Cr6+ + MnO2 JKMnO4 (剩)+ C2H5OH CH3CHO + MnO2 JMnO2 用 MgO Mg(OH)2 絮凝MnO2 Mg(OH)3 ( MnO2Mg(OH)3 对 Cr6+ 有吸附)转移 (过滤、洗涤 )、定容b 特点： 由于要过滤，所以适用于浑浊水样，多用于工业废水和生活污水； 氧化力较弱；重现性较好。酸性 KMnO4a 原理： Cr3+ + KMnO4 Cr6+ + MnSO4K

15、MnO4 + NaN3 + H2SO4 N2 t + MnSO4b特点：氧化力强，多用于清洁的地表水；重现性较差，NaN3还原能力强第二部分：食品理化检验第二节、食品样品的采集和保存一、食品的特点： 1、不均匀性 2、易变性二、采样方法1、采样原则 样品有代表、真实性、准确性、及时性、合理性2、采样方法 :随食品的形状、种类和检测项目的要求而异（1）同属性（同质）食品样品的采集（2）不同属性的样品的采集单独采样，分别测定。三、样品的保存1、保存原则： 防止污染、防腐败变质、稳定水份、固定待测成分2、保存方法： 净、密、冷、快第三节、食品样品的前处理一、食品样品的制备（常规处理）1、除非可食的部

16、分2、去机械性杂质3、均匀化处理：防污染、全部过筛二、食品样品的无机化处理无机化处理： 是针对无机成分测定的前处理方式。1、湿消化法（1）定义：简称湿法，适量样品中加入浓 HNO3 HClO4 H2SO4 等氧化性强 酸，结合加热来破坏有机物。有时加一些氧化剂 KMNO4 ，H2O2 或催化剂 CuSO4，HgSO4，SeO2，V2O5 等，以加速样品的氧化分解，完全破坏有机 物，使待测的无机成分释放出来。（2）常用的氧化性强酸的特点（持久性、氧化能力） HNO3HNO3 温热及光照 O2+NO2+H2OO2+NO 氧化力强、溶解力强、持久性差（bp12l8C ）、有NOX干扰 浓热 HClO

17、4浓热 HClO4 加热 新生态 O+O2+Cl2氧化力强、持久性较好（ bp203C ）、容易发生爆炸 浓 H2SO4碳化力强、溶解度不好、持久性较好（bp338C）、氧化能力较弱：N - NH3（ 3）常用混合酸HNO3HClO4 HNO3 H2SO4 HNO3HClO4H2SO4（ 4）终点判断： 无色透明或淡黄色透明不再变化（ 5）消化的操作技术 敞口消化法 回流消化法 冷消化法 密封罐消化法 微波消化法 湿法消化装置（ p12）（ 6）消化操作的注意事项 消化所用的试剂，做空白实验 防暴沸 消化过程中需要补加酸和氧化剂时，首先要停止加热，稍冷后沿瓶壁缓缓加 入，以免发生剧烈反应，引起

18、暴沸，造成对操作者的危害和样品的损失，以及 对环境的污染。2、干灰化法（ 1 ）高温干灰化法 优点：空白值较低；称样量较大（可达10g左右）；操作简便，需要设备 少；灰化过程中不需要人一直看守；适合大批量样品的前处理，省时省 缺点：易挥发损失和吸留损失(低沸点的兀素回收率较低)。 提高回收率的措施：适宜的温度；加入助灰化剂，促进灰化和防止损失(2)低温干灰化法三、其它前处理方法1、挥发法和蒸馏法：扩散法、顶空分析法、氢化物发生法2、沉淀法3、色谱分离法 4、透析法5、溶剂提取法：浸提法、萃取法第二章：营养成分的测定第一节、水分的测定三、测定方法1、直接干燥法本法操作简便，应有范围广。适用于多数

19、样品特别是较干样品的水分测定，不(1)原理：一定量样品，在常压下，于95105°C烘箱烘烤，食品中水分蒸发逸出，直至样品的质量不再减轻，称重，所减少的重量即是水分重量。以百分 含量计。(2) 操作：将样品混匀，磨碎，全部过60目筛，混匀。 将扁形称瓶洗净，105±1C烘1h,干燥器中冷却0. 5h称重，再 烘干1h,冷却0. 5h，称至恒重。 精确称取2 10g样品于已恒重的称瓶，散开铺平，半开瓶盖，105±1C烘烤3h取出，干燥器中冷却0. 5h称重；再烘1h,冷却，称重至恒重。 计算：以百分含量计。(3) 注意事项：样品须磨细，铺层不宜太厚v 5mm，扁形称瓶

20、。 半固体样品，应放在水浴上蒸去大部分水分，再放烘箱。 粘稠样品可加海沙，水浴上边加热边搅拌，增大蒸发面积，防止结痂，再放 烘箱。 恒重。前后两次烘烤冷却后称重，重量差在规定水平v2mg。关键在于第-次尽量烘够，放入干燥器冷却的时间尽可能一致。2、减压干燥法本法时间短，温度低，适合在100C易分解氧化的样品、水分多挥发慢及冻胶状样品、淀粉制品、豆制品、味精、含糖量高、油脂等。原理： 减压干燥法是在真空干燥箱中进行，箱体密闭，可抽气减压，通常采用 压力为40 55kPa,温度50 60C，2 3h即可达到恒重。3、蒸溜法1)原理： 在样品中加入与水互不相溶且比水轻的有机溶剂，加热使水分与有 机溶

21、剂一起蒸溜出来(利用两种互不相溶的液体沸点低于各组分别的沸点)，蒸溜出来的蒸汽被冷凝、收集于标有刻度的集水管中，当管中水量不再变化 时，直接读水的体积，既是样品的含水量。(2) 注意事项：甲苯能溶解少量的水，所以甲苯要先用水饱和。 防止水分附着在管壁，仪器需清洗干净。 蒸馏结束后，冷凝管上的水珠应全部冲下。 集水管小刻度为0.1ml，即100mg以下的质量为估计值，精确度较烘干法差。第二节、 食品中蛋白质的测定二、测定蛋白质的意义测定蛋白质的含量，虽不能决定蛋白质的营养价值的大小，但却是评价其营养价值的基础，为合理调配膳食及开发食品资源提供依据。1、含量 2、消化率 3、生物学价值 4、蛋白质

22、的互补作用三、测定方法 -凯氏定氮法1 、原理： 样品与浓硫酸在催化剂的共同作用下一起加热，破坏有机物，使蛋白质分解的NH3+与H2SO4生成(NH4)2SO4,在强碱的作用下，释放NH3 T，通过蒸 溜使氨与其它物质分开，用适当吸收液吸收， HCI滴定，根据HCI的消耗量一 含氮量一蛋白质含量。消化、蒸溜、滴定、计算。2、说明：如无特别说明，食品含氮量均按 16%计算。消化过程只能用H2SO4 、 K2SO4 CuSO43、步骤：(1)、样品消化 称取样品约2.00g (±0.001g),移入干燥的100mL 凯氏烧瓶中，加入0.2g硫酸铜和6g硫酸钾，稍摇匀后瓶口放一小漏斗，加入

23、20mL 浓硫酸,将瓶以 450角斜支于有小孔的石棉网上,使用万用电炉,在通风 橱中加热消化，开始时用低温加热，待内容物全部炭化，泡沫停止后，再升高 温度保持微沸，消化至液体呈蓝绿色澄清透明后，继续加热0.5h，取下放冷，小心加 20mL 水，放冷后，无损地转移到 100mL 容量瓶中，加水定容至刻度， 混匀备用，即为消化液。 试剂空白实验：取与样品消化相同的硫酸铜、硫酸 钾、浓硫酸，按以上同样方法进行消化，冷却，加水定容至100mL，得试剂空白消化液。( 2)、定氮装置的检查与洗涤 检查微量定氮装置是否装好。在蒸气发生瓶内 装水约三分之二，加甲基红指示剂数滴及数毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入

24、 数粒玻璃珠(或沸石)以防止暴沸。 测定前定氮装置如下法洗涤 23次：从样 品进口入加水适量(约占反应管三分之一体积)通入蒸汽煮沸，产生的蒸汽冲 洗冷凝管，数分钟后关闭夹子 a,使反应管中的废液倒吸流到反应室外层，打 开夹子 b 由橡皮管排出，如此数次，即可使用。(3)、碱化蒸馏 量取硼酸试剂 20mL 于三角瓶中，加入混合指示剂 23滴， 并使冷凝管的下端插入硼酸液面下，在螺旋夹 a关闭，螺旋夹b开启的状态 下，准确吸取10.0mL样品消化液，由小漏斗流入反应室，并以 10mL蒸馏水洗 涤进样口流入反应室，棒状玻塞塞紧。使 10mL 氢氧化钠溶液倒入小玻杯，提 起玻塞使其缓缓流入反应室，用少

25、量水冲洗立即将玻塞盖坚，并加水于小玻杯 以防漏气，开启螺旋夹a,关闭螺旋夹b，开始蒸馏。通入蒸汽蒸腾10min后，移动接收瓶，液面离开凝管下端，再蒸馏2min。然后用少量水冲洗冷凝管下端外部，取下三角瓶，准备滴定。同时吸取10.0mL试剂空白消化液按上法蒸馏操作。（4）、样品滴定 以0.0500mol/L盐酸标准溶液滴定至微红色为终点。X10（5） 、计算I。X样品蛋白质含量（g/100g）; V1 样品滴定消耗盐酸标准溶液体积（mL）;V2空白滴定消耗盐酸标准溶液体积（mL）； c盐酸标准滴定溶液浓度（mol/L）；0.0140 1.0mL盐酸/000.1）（LmolHCIc标准滴定溶液相当

26、的氮的质量（g）；m样品的质量（g）；F氮换算为蛋白质的系数，一般食物为6.25;乳制品为6.38;面粉为5.70；高梁为6.24；花生为5.46;米为5.95；大豆及其制品为5.71;肉与肉制品为6.25；大麦、小米、燕麦、裸麦为 5.83;芝麻、向日葵5.30。计算结果保留三位有效数字。4、注意事项1、本法也适用于半固体试样以及液体样品检测。半固体试样一般取样范围为2.00g5.00g；液体样品取样10.0mL25.0mL （约相当氮30mg40mg）。若检测 液体样品，结果以g/100mL表示。 2、消化时，若样品含糖高或含脂及较多时，注意控制加热温度，以免大量泡沫 喷出凯氏烧瓶，造成样

27、品损失。可加入少量辛醇或液体石蜡，或硅消泡剂减少 泡沫产生。3、消化时应注意旋转凯氏烧瓶，将附在瓶壁上的碳粒冲下，对样品彻底消化。 若样品不易消化至澄清透明，可将凯氏烧瓶中溶液冷却，加入数滴过氧化氢 后，再继续加热消化至完全。4、硼酸吸收液的温度不应超过 40C，否则氨吸 收减弱，造成检测结果偏低。可把接收瓶置于冷水浴中。5、在重复性条件下获得两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的 10%第四节、食品中脂肪的测定二、提取方法1、索氏提取法：粗脂肪（crude fat）或醚萃取物。（ 1 ）索氏提取器： 球瓶、提取筒和冷凝管三部分组成，各部分用磨砂玻璃密合。（ 2）称重方法增重法： 、适

28、宜于脂肪含量较高的样品。否则称重误差增大。 、球瓶必须事先彻底清洗、烘干，并称至恒重。、不得沾污，防止水浴沾污球瓶外壁。、挥干有机溶剂时温度不能太高，以免脂肪氧化而增加质量和恒重的困难。、每套仪器只能作一份样品，较难保证平行操作条件。减重法： 、样品中脂肪含量高低均适用、清洗要求不必很严格，球瓶无须事前烘至恒重。、除去有机溶剂时，直接烘烤滤纸包，有机溶剂损失少。、样品滤纸包无脂肪，不存在高温下脂肪氧化的问题，易恒重。、一套仪器安装好后可连续操作，只需更换新的样品滤纸包即可。、在一套仪器中放入数份样品，可得较好的平行结果。（3）注意事项：I、 要求样品充分干燥和磨细，本法不适用于液体和半固体样品

29、中脂肪的直接提取II 、 正确安装仪器，各部接口必须密闭吻合，不得在接口处涂抹凡士林。III 、球瓶中有机溶剂不宜装得过满，装 2/3体积即可。IV 、装样品的滤纸包不得超过虹吸管的高度，否则提取不完全。V、 滤纸包应严密，不漏样品细粉，滤纸事前用乙醚浸泡进行脱脂处理。VI 、所用的乙醚或石油醚，应无水、无醇、无过氧化物。VII 、提取完全的依据：色素、薄纸片油迹、根文献资料、滤纸包烘干称重，再提取。2、酸水解法：总脂肪（total fat）或水解后的醚萃取物。（ 1）原理：（ 2）操作： 固体样品 2-5g ，液体样品 10g,J加水8ml,盐酸10ml或加盐酸10ml;J置于70-80度水

30、浴中，加热40-50min,搅拌J稍冷后 乙醇 蛋白质沉淀J再加1+1的乙醇-石油醚混合液J分层准确取一定体积的醚层于小锥形瓶J水浴中蒸干 置100-105度烘箱干燥2h,恒重计算食品中总脂肪 的含量。3、碱水解法本法适用于乳、乳制品以及含有乳类食品中脂肪 的测定，在方法上与酸水解法 类似；只是用氨水代替盐酸，使乳中的酪蛋白钙盐溶解，并破坏胶体状态，释 放出脂肪，再用乙醚 -石油混合液萃取。第四节 维生素 A 的测定一、 实验方法 比色法二、实验原理： 维生素 A 在三氯甲烷中与三氯化锑相互作用，产生蓝色物质， 其深浅与溶液中所含维生素 A 的含量成正比。该蓝色物质虽不稳定，但在一定 时间内可

31、用分光光度计于 620nm 波长处测定其吸光度。三、实验步骤维生素 A 在空气中易被氧化，对日光和紫外线敏感，实验操作应在微弱光线下 进行。样品前处理：皂化法皂化法：皂化：根据样品中维生素A含量的不同，称取0.5g5g样品于三 角瓶中，加入2040ml无水乙醇及10ml1: 1氢氧化钾，于电热板上回流 30min至皂化完全为止。(皂化法适用于维生素 A含量不高的样品，可减少脂 溶性物质的干扰，但全部实验过程费时，且易导致维生素 A 损失)(2)提取：将皂化瓶内混合物移至分液漏斗中，以 30ml水洗皂化瓶，洗液并入分液漏斗。如有渣子，可用脱脂棉漏斗滤入分液漏斗内。用50ml乙醚分二次洗 皂化瓶，

32、洗液并入分液漏斗中。振摇并注意放气，静置分层后，水层放入第二 个分液漏斗内。皂化瓶再用约 30ml 乙醚分二次冲洗，洗液倾入第二个分液漏斗 中。振摇后，静置分层，水层放入三角瓶中，醚层与第一个分液漏斗合并。重 复至水液中无维生素 A 为止。(3)洗涤：用约 30ml 水加入第一个分液漏斗中，轻轻振摇，静置片刻后，放去 水层。加1520ml 0.5mol/L氢氧化钾液于分液漏斗中，轻轻振摇后，弃去下 层碱液，除去醚溶性酸皂。继续用水洗涤，每次用水约30ml，直至洗涤液与酚酞指示剂呈无色为止(大约洗涤 3次)。醚层液静置1020min，小心放出析 出的水。(4) 浓缩：将醚层液经过无水硫酸钠滤入三

33、角瓶中，再用约 25ml乙醚冲洗分液 漏斗和硫酸钠两次，洗液并入三角瓶内。置水浴上蒸馏，回收乙醚。待瓶中剩 约 5ml 乙醚时取下，用减压抽气法至干，立即加入一定量的三氯甲烷使溶液中 维生素 A 含量在适宜浓度范围内。四、标准曲线的制备 :准确取一定量的维生素 A 标准液于 45 个容量瓶中，以 三氯甲烷配制标准系列。再取相同数量比色管顺次取 1ml 三氯甲烷和标准系列 使用液1ml，各管加入乙酸酐1滴，制成标准比色列。于620nm波长处，以三 氯甲烷调节吸光度至零点，将其标准比色列按顺序移入光路前，迅速加入 9ml 三氯化锑 -三氯甲烷溶液。于 6秒内测定吸光度，将吸光度为纵坐标，以维生素

34、A 含量为横坐标绘制标准曲线图。第三章：食品添加剂的测定食品添加剂： 改善食品品质和色、香、味以及为防腐、保鲜和加工工艺的需要 而加入食品中的人工合成或者天然物质。糖精钠的检测 （3）样品前处理 提取法 ：萃取法、浸取法原理： 糖精钠在酸性条件下转变成糖精，用乙醚提取。蛋白质： CuSO4 和 NaOH 沉淀脂肪：可先在碱性条件用乙醚萃取脂肪，然后酸化，再用乙醚提取糖精 酒精：加热挥去C02:应先除去C02,否则将影响样液体积操作： 将样品液或处理液置分液漏斗中，加 6NHCl 使其呈显著酸性，用乙醚20、10、10ml提取三次，合并醚液，通过无水 Na2SO4过滤于50ml容量瓶，用少量醚液

35、洗涤过滤器,洗液并入容量瓶,加乙醚至刻度,混匀。 透析法准确称取样品25g，放入半透膜，加入0.02M NaOH溶液调成糊状，袋口扎紧，放入装有200ml 0.02M NaOH溶液的烧杯中，盖上盖透析 24h，取透析液125ml （相当于12.5g样品），供酸化后乙醚提取糖精（ 4）检测方法 高效液相色谱法色谱参考条件:色谱柱：C18色谱柱4.6mmX250mm1Q m不锈钢柱流动相:甲醇 +乙酸铵（ 595）检测器：紫外检测器，波长 230nm 薄层色谱法聚酰胺薄层板 200 目 展开剂：正丁醇 +氨水+无水乙醇（ 7+1+2）异丙醇+氨水+无水乙醇（ 7+1+2） 定性： Rf 定量：斑点

36、颜色深浅 纳氏比色法原理： 糖精钠在酸性溶液中经有机溶剂萃取，经过湿法消化 （无机化处理）变成 铵盐，与纳氏试剂作用生成黄色物质，根据颜色的深浅与标准比较定量。有机磷农药残留量的测定有机磷农药： 是用于防治植物病虫害的有机化合物农药残留： 是农药使用后一个时期内没有被分解而残留于生物体、收获物、土壤。水体、大气中的微量农药原体、有毒代谢物、降解物和杂质的总称四、测定气相色谱法 GC火焰光度检测器，富氢焰上燃烧，含磷化合物以磷的氧化物 HPO 的形式，发射 出 526nm 特征光 ，经滤光片、 光电倍增管，并转化成电信号放大后记录色谱 峰。以各组分的保留时间定性，峰高来定量。酒中甲醇的测定酒中杂

37、质1、品红亚硫酸比色法（ 1）原理： 甲醇在酸性条件下，被高锰酸钾氧化成甲醛，甲醛与品红亚硫酸作 用生成蓝紫色化合物，比色测定。（2）注意事项：I、除蒸馏酒，其余酒样要先蒸馏，取馏出液分析60II 、样液中含 HCHO ，可加 KCN 或苯肼磺酸钠。蒸馏，取馏出液分析III 、样品分析液中 CH3CH2OH 浓度对显色有影响，在 5-6%时灵敏度最高。IV 、显色时间 30 分钟左右为宜，此时其它醛类与显色剂显色褪去。V、 配标准用无甲醇乙醇，调节乙醇浓度 5-6%。VI 、换算成 60 度酒含量 酒精度高于或低于 60度，各项测定结果应换算为 度时含量。VII、乙醇的测定 酒精度：20C时1

38、00ml酒样中乙醇的毫升数除蒸馏酒，其余酒样要先蒸馏，取馏出液分析。2、气相色谱法原理 ：试样被气化后，随同载气进入色谱柱，由于不同组分在流动相（载气）和固定相间分配系数的差异，当两相作相对运动时，各组分在两相间经多次分配而被分离。利用气相色谱可分离、检测白酒中的甲醇含量。在相同的操作条件下，分别将等量的试样和含甲醇的标准样进行色谱分析，由保留时间可确定试样中是否含有甲醇，比较试样和标准样中甲醇峰的峰面积，可确定试样中甲 醇的含量。第三部分：空气理化检验一、空气污染： 在空气的正常组成成分之外，又增加了新的成分，或原有成分 骤然增加，破坏了大气的物理化学正常组成和生态平衡，从而对人体健康和动

39、植物生长的造成危害。二、空气污染的监测1、污染源的检测 2、环境污染的检测 3、特定目的的检测、空气污染物的存在形态气体、蒸气、气溶胶四、空气中污染物的浓度表示法1、空气体积的计算和换算空气采样体积=采样速度X采样时间受温度、压力影响较大，换算成标准状态下的采样体积a单位体积质量浓度：单位体积空气中所含污染物的质量数，常用 g/m3表示。（二）体积比浓度：100万体积空气中含污染气体或蒸气的体积数, mL/m3 和（d_/m3 表示。b空气中污染物浓度的表示法与换算两种浓度表示方法之间的换算：Mmg/m3或卩常用第二章：空气样品的采集1、采样点的选择大气工作场所室内空气污染调查采样点选择采样布点方法采样时间频率风向风速大气烟污强度系数网格布点法功能分区布点法同心圆布点法扇形布点法2、采样方法气体蒸汽 气溶胶集气法 浓缩法冲 滤 沉击料降注塑置真溶填冷式采法射料换空液充阱吸样器袋采采吸柱法收法采采样样收管样样 法法 法3、空气采样仪器收集器抽气动力流量调节装置吸收管、手抽气筒、孔口流量计填充柱、水抽气瓶、转子流量计滤料等电动抽气机皂膜流量计压缩空气吸引器 湿式流量计第四节 最小采气量和采样效率 三、采样效率1、定义： 指在一定条件下，能被收集器采集的空气中污染物的量与通过收集器 的该物质总量的百