水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用

1、水飞蓟宾-磷脂酰胆碱复合物对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用PM不但能优于AG抑制AGEs引起的肾脏病变,明显降低血浆胆固醇,三酰甘油,肌酐和尿白蛋白,减少皮肤胶原AGEs的含量;而且,PM亦是一种有效的自由基清除剂,可减少脂质过氧化和糖基化反道J,PM可防止糖尿病大鼠视网膜血管病变.Khatami等J研究认为,AG对Amadori以后阶段的AGEs形成的抑制作用较小,主要在糖基化早期阶段起作用.AG作为一种亲核肼类化合物,抑制非酶糖基化可能的机制在于:与葡萄糖缩合形成醛(在某些方面与羰基化合物相类似),而使参与糖基化反应的开链葡萄糖的生成减少,抑制糖化蛋白的产生.与早期糖基化产物Amado

2、ri结合,阻止其进一步反应生成AGEs.AG的不良反应较多,如患者出现流感样和贫血症状,抗核抗体和髓过氧化物酶细胞质抗体检测阳性HoJ等.PM是维生素的衍生物,在食物中分布较广,如肉类,谷类,水果和蔬菜中均含有,对人体几乎无毒害作用,治疗前景广阔.作者简介】张扬(1977一),女,在读博士研究生,主要从事糖尿病慢性并发症的分子病理学研究.通讯作者】侯芳玉(1945一),女,教授,主要从事抗感染免疫研究.联系电.话:(0431)5619574.参考文献】prod.UCtSflreviewJ.Diabetologla.2001,44(2):129146.中国新药杂志2004年第13卷第4期Amad

3、ofiproductgeneratedby&gluconolactoneJ.ClinChimActa,1999,287(12):123130KhalifahRG.BaynesJW,HudsonBG.Amadorins:novelpostAmodoriinhihitorsofadvancedgIycationreactionsJ.BiochemBiophysResCommun,1999,257(2):251258.andpyridoxamineinhibittheformationofantigenicadvancedglycationendproducts:comparison

4、withaminoguanidineJ.BiochemBiophysResCommun,1996,220(1):l13一l19.oxideradicalsandpreventslipidperoxidation,proteinglyeosylation,and(Na+K)一ATPaseactivityreductioninhighglucoS4一treatedhumanerythrocytesJ.EreRadBiolMed.2001,30(3):232237.ineinhibitsearlyrenaldiseaseanddyslipidemiainthestreptozotocindiabet

5、icratJKidneylnt,2002,61(3):939950.pyridoxamineinhibitsdevelopmentofretinopathyinexperimentaldiabetesJ.Diabetes,2002,51(9):28262832.KhatamiM,SuldanZ.Inhibitoryeffectsofpyridoxalphosphate,ascorbateandaminoguanidineofnonenzymaticglycosylationJ.LSci,1988,43(21):1725.Nilsson130.Biologicaleffectsofaminogu

6、anidine:anuwlateJ.InflammationRes,1999,48(10):509515.profileinpatientswithtypeIdiabetesJ.JAmSocNephrol,1999,10(9):184A.(收稿日期:20031107)致小鼠急性肝损伤的保护作用陈正跃一,吴子钊,张光军,许建文,程钢(1华中科技大学同济医学院病理生理学系,武汉430030;2新乡医学院药物研究室,新乡453003)摘要】目的:研究水飞蓟宾一磷脂酰胆碱复合物(SPC)对四氯化碳(cct,)所致的小鼠急性肝损伤的预防和治疗作用.方法:50只小鼠随机分成5组,每组10只:正常对照组,模

7、型组,预防组,治疗组和预防+治疗组,采用cch造成小鼠急性肝损伤模型,预防组干注射cch前多次给小鼠灌服sPc,治疗组干注射cch后给SPC,预防+治疗组于注射cch前后均给SPC,24h后采血,分离血清,检测血清ALT和AST活性,并取肝组织观察比较肝脏病理组织学改变.结果:SPC明显降低小鼠血清ALT和AST活性,治疗,预防及预防+治疗组与模型组比较差异均有极显着性(P<0.01),预防组与治疗组比较差异有显着性(P<0.05),预防+治疗组与治疗组比较差异有极显着性(P<0.01),且均能改善肝脏病理组织学变化.结论:SPC对CCh造成的急性肝损

8、伤有明显的预防和治疗作用.关键词】水飞蓟宾一磷脂酰胆碱复合物;四氯化碳;肝损伤;保护作用中图分类号】R975.5;R965.1文献标识码】A文章编号】10033734(2004)04031903*基金项目:河南省科技攻关项目(991180204)一319一Protectiveeffectsofsilybin-ph0sphatidylch0linecompoundonacuteliverdamageinmiceinducedbyCC14CHENZhengyue,一,WUZizhao,ZHANGGuangjun,XUJianwen,CHENGGang2(1DepartmentofPathophys

9、iology,TongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityo/ScienceandTechnology,Wuhan430030,China;2PharmaceuticalLaboratory,XinxiangMedicalCollege,Xinxiang453003,China)AbstractObjective:Tostudytheprotectiveandtherapeuticeffectsofsilybinphosphatidylcholinecompound(SPC)onacuteliverdamageinmiceinducedbycch.Method

10、s:50micewithcchinducedacuteliverdamagewererandomlyandequallydividedinto5groups:normalgroup,group,micewerereceivedmultidosesoforalSPCpriorinjectionofCCh.Intherapeuticgroup,micewerereceivedSPCafterinjectionofcch.Inprotectiveplustherapeuticgroup,micewerereceivedSPCpriorandafterinjectionofcch.24hlater,b

11、loodweretakenfrommiceofallgroupstodeterminetheserumlevelofALTandASTandliversweretakenouttoobservehistopathologicalchanges.Results:Inandtherapeuticgroup(P<0.05),andgreatestsignificantdifferencewasexistedbetweenprotectivegroupandprotectiveplustherapeuticgroup(P<0.O1).Liverhistopathologic

12、alimprovementwasobservedinother3groupsincomparisonwithmode1.Conclusion:SPCishighlyeffectiveinprotectionandtreatmentofacuteliverdamageinmiceinducedbyCCh.Keywordssilybinphosphatidylcholinecompound;cch;liverdamage;protectiveeffect水飞蓟宾(silybin)是水飞蓟素(silymarin)中具有生物活性的主要成分,是经典的肝损伤修复药物,但由于其几乎不溶于水和油脂,生物利用度

13、低,吸收(phosphatidylcholine,lecithin)具有不溶于水,丙酮,但溶于脂类溶剂如氯仿,石油醚,正己烷,苯,己醚的特性.为了提高水飞蓟宾的生物利用度,增进其疗效,作者合成了水飞蓟宾一磷脂酰胆碱复合物(silybin-phosphatidylcholinecompound,SPC),并对其理宾,又不同于磷脂酰胆碱的性质,其脂溶性介于二者之间.作者曾对SPC的急性毒性进行研究_5j,本实验考察SPC对四氯化碳(CCh)所致小鼠急性肝损伤的预防和治疗作用.材料与方法1实验材料1.1实验动物健康昆明小白鼠,雌性,体重(22±_.320-2)g,50只,由新乡医学院实验动

14、物中心提供.1.2药品及试剂SPC由本研究室制备,其理化性质及纯度参见另文_3J.将SPC用0.5%羧甲基纤维(分析纯),新乡市化学试剂厂出品.2实验方法2.1模型的建立CC1溶于大豆色拉油,配成0.1%溶液,急性实验时,腹腔注射10mL?kg,造肝损伤动物模型.组,每组10只,即正常对照组,模型组,预防组,治疗灌胃5d,正常对照组,模型组和治疗组灌胃0.5%CMCNa10mL?kg,预防组和预防+治疗组灌胃30mg?mL的SPC悬液10mL?kg,即300mg?,约为LD50值的1/15.d6,治疗组和预防+治疗组在腹腔注射0.1%CCh10mL?kg后30min灌胃SPC悬液10mL?kg

15、;模型组和预防组在腹腔注射0.1%cch10mL?kg后灌胃0.5%CMCNa10mL?kg,正常对照组腹腔注射10mL?kg大豆(小鼠禁食12h,自由饮水),摘眼球采血,8000r?min离心5min,分离血清,用DateBehringRxl全自动生化分析仪测定血清中丙氨酸转移酶(ALT)和天冬氨酸转移酶(AST)的活性,并取每只小鼠同一叶肝脏部位大致相同的一小块肝组织作病理组织学检查,经石蜡切片和HE染色后在光学显微镜下观察肝细胞损伤程度.±S表示,组间差异的显着性采用t检验,应用SPSS10.0软件进行分析.结果1各组小鼠血清中ALT和AST活性变化cch模型组的ALT和AST

16、活性较正常对照组明显升高(P<0.01),预防组,治疗组和预防+治疗组与cch模型组比较,ALT和AST活性均有明显下降(P均<0.01).预防+治疗组与治疗组的AST,ALT活性比较差异有极显着性(P<0.01),预防组与治疗组的AST和ALT活性比较差异有显着性(P<0.05),而预防组与预防+治疗组的AST和ALT活性比较差异无显着性(P>0.05),见表1.结果表明,SPC明显对抗CCh致肝损伤小鼠血清ALT和AST活性的升高.衰1SIC对肝损伤小鼠血清ALT和AST的影响Tab1Effectsofsilybin-p

17、hosphatidyleholinecompoundOnrllnlALTandASTofliverdamagemice与硬量比段,a:P'0O1;与指疗组比较.b:P<0O1;c:P<0052肝脏病理组织学检查光镜下观察发现,正常对照组小鼠肝组织结构正常,肝细胞排列有序,肝小叶结构完整,无肝细胞肿大及脂肪变性;肝损伤模型组小鼠中毒后组织学改变明显,部分肝小叶失去正常结构,肝细胞索排列紊乱,肝细胞疏松,出现不同程度的水肿,体积增大,呈现气球样病变,血管充血(红细胞较多),有炎症细胞浸润(中性粒细胞为主),嗜酸性增强,局部细胞坏死等;预防组,治疗组和预防+治疗组

18、小鼠均有模型组类似的组织病理改变,但病变程度均明显减轻,尤的肝脏组织病理改变具有一定的预防及治疗作用.中国新药杂志2004年第13卷第4期讨论在本实验中,无论从ALT和AST的活性,还是从肝细胞的损伤程度上看,预防组和预防+治疗组均比单纯治疗组的效果要好,说明SPC对cch所致小鼠急性肝损伤有明显的保护和治疗作用,能明显减轻cch所致小鼠肝损伤程度.水飞蓟宾为抗氧自由基活性物质,其抗脂质过CC1诱导的脂质过氧化作用,即能减少并清除cchCC1对脂质的共价结合明显减少_6J.SPC可以预防和治疗由cch引起的肝损伤,可能是通过抗脂质过氧化的作用来保护肝细胞膜结构的完整性,维持细胞膜的流动性;于乐成等_7J报道,水飞蓟宾能促进细胞DNA及结构蛋白等的合成,的水飞蓟宾与磷脂酰胆碱的分子型复合物,具有较好的生物利用度,并且复合