第四章清洗与消毒

1、第四章第四章 清洗与消毒清洗与消毒一、清洗一、清洗 主要针对新的或重新使用的器皿，清除主要针对新的或重新使用的器皿，清除杂质和微生物，使其不残留任何影响细胞生杂质和微生物，使其不残留任何影响细胞生长的成分。长的成分。有害物质：微生物有害物质：微生物 细胞残余物细胞残余物 非营养成分的化学物质非营养成分的化学物质1. 玻璃器皿的清洗玻璃器皿的清洗 浸泡（清水浸泡、浸泡（清水浸泡、5%稀盐酸稀盐酸浸泡过夜）浸泡过夜）刷洗（软毛刷、优质洗涤剂）刷洗（软毛刷、优质洗涤剂）浸酸（不少于浸酸（不少于6小时，一般过夜）小时，一般过夜）冲洗冲洗（自来水十遍，蒸馏水（自来水十遍，蒸馏水23次）次） 晾干备用晾干

2、备用 要求：干净透明、无油迹，不能残留任何物质要求：干净透明、无油迹，不能残留任何物质 成分成分 强酸清洁液强酸清洁液 次强酸清洁液次强酸清洁液 弱酸清洁液弱酸清洁液重铬酸钾（重铬酸钾（g) 63 120 100硫酸硫酸(ml) 1000 200 100蒸馏水蒸馏水(ml) 200 200 1000 棕红色 深绿色，要重新配制2. 橡胶制品的清洗橡胶制品的清洗 自来水浸泡自来水浸泡 0.5mol/L NaOH煮煮沸沸10 15 min（除掉蛋白质）（除掉蛋白质）流水冲洗流水冲洗 0.5mol/L HCl浸泡浸泡 30 min流水冲洗流水冲洗 自来水冲洗自来水冲洗2次次蒸馏蒸馏水清洗水清洗2 3

3、次次 50烤干备用。烤干备用。3. 塑料器皿的清洗塑料器皿的清洗 浸泡（洗涤剂）浸泡（洗涤剂）冲洗（自来水冲洗（自来水10遍，蒸馏水遍，蒸馏水3次）次） 70%乙醇冲洗乙醇冲洗无水乙醇冲洗无水乙醇冲洗1次次无菌室内紫外线照射晾干无菌室内紫外线照射晾干4. 不锈钢除菌滤器的清洗不锈钢除菌滤器的清洗 新的或使用后的流水冲洗新的或使用后的流水冲洗15min三蒸水冲洗三蒸水冲洗滤器滤器2 3次次 干燥备用干燥备用去离子水浸泡滤膜去离子水浸泡滤膜24h安装滤器安装滤器消毒灭菌消毒灭菌 。包装包装: : 对细胞培养用品进行消毒前，要进行严密包装，以对细胞培养用品进行消毒前，要进行严密包装，以便于消毒和贮存

4、。常用的包装材料：牛皮纸、硫酸纸、便于消毒和贮存。常用的包装材料：牛皮纸、硫酸纸、棉布、铝饭盒、较大培养皿等，近几年用铝箔包装，非棉布、铝饭盒、较大培养皿等，近几年用铝箔包装，非常方便，适用。培养皿、注射器、金属器械等用牛皮纸常方便，适用。培养皿、注射器、金属器械等用牛皮纸包装后再装入饭盒内，较大的器皿可以进行局部包扎。包装后再装入饭盒内，较大的器皿可以进行局部包扎。 二、消毒和灭菌二、消毒和灭菌 主要针对微生物污染主要针对微生物污染 物理消毒法物理消毒法1、紫外线消毒、紫外线消毒 是一种低能量的电磁辐射，可以是一种低能量的电磁辐射，可以杀灭多种微生物，多用于无菌室空气、地面以杀灭多种微生物，

5、多用于无菌室空气、地面以及超净工作台面的消毒。消毒效果与辐射强度及超净工作台面的消毒。消毒效果与辐射强度和照射剂量呈正相关，辐射强度随距灯管距离和照射剂量呈正相关，辐射强度随距灯管距离的增加而降低，照射剂量和照射时间呈正比。的增加而降低，照射剂量和照射时间呈正比。 缺点：缺点：穿透力弱；产生臭氧，污染空气，对身穿透力弱；产生臭氧，污染空气，对身体有害。体有害。2、电离辐射灭菌、电离辐射灭菌 以以60Co、X射线和电子加速射线和电子加速器产生的加速离子辐照物品杀灭微生物的方法。器产生的加速离子辐照物品杀灭微生物的方法。 优点：灭菌时物品不会升温，尤其适用不优点：灭菌时物品不会升温，尤其适用不耐热

6、物品的消毒；辐射的穿透力强，可直接对耐热物品的消毒；辐射的穿透力强，可直接对密封包装的物品进行消毒。密封包装的物品进行消毒。 缺点：由于电离辐射有较强的诱变作用，缺点：由于电离辐射有较强的诱变作用，不适合消毒活的生物材料。不适合消毒活的生物材料。 适用于消毒量大和不适做高压或滤过等培适用于消毒量大和不适做高压或滤过等培养用品。养用品。 3.湿热消毒湿热消毒 以高压（以高压（103.4kPa）蒸汽灭菌最）蒸汽灭菌最为常用，是最有效的一种方法。压力蒸汽灭为常用，是最有效的一种方法。压力蒸汽灭菌器消毒好的物品应注意烘干。菌器消毒好的物品应注意烘干。 4.干热消毒干热消毒 电烤箱电烤箱160以上，保持

7、以上，保持90120 min，才能杀死细菌芽胞，达到灭菌目的。，才能杀死细菌芽胞，达到灭菌目的。 适用于玻璃器皿的消毒。适用于玻璃器皿的消毒。 5.过滤除菌过滤除菌 主要用于培养用液的除菌。主要用于培养用液的除菌。 化学消毒法化学消毒法 采用化学消毒剂消毒那些不采用化学消毒剂消毒那些不能用物理等方法消毒的物品和场地，如无菌能用物理等方法消毒的物品和场地，如无菌室的空气、台面、操作者的皮肤等。室的空气、台面、操作者的皮肤等。 常用化学消毒剂：来苏儿、新洁尔灭、过常用化学消毒剂：来苏儿、新洁尔灭、过氧乙酸、氧乙酸、70%酒精、乳酸蒸汽等酒精、乳酸蒸汽等 抗生素的应用抗生素的应用 主要适用于培养用液的消主要适用于培养用液的消毒。毒。消毒灭菌物品消毒灭菌物品 压力蒸汽压力蒸汽 干热干热 过滤过滤 紫外线紫外线 化学化学 化学化学 电离电离 抗生素抗生素 气体气体 消毒剂消毒剂 辐射辐射培养室、工作台培养室、工作台 + +