微生物学细菌与病毒的微生物学检查学习教案

1、会计学1微生物学细菌微生物学细菌(xjn)与病毒的微生物学检与病毒的微生物学检查查第一页，共51页。标标本本(biobn)分离分离(fnl)培养培养鉴定鉴定(jindng)怎么办怎么办培养基制备培养基制备细菌培养法细菌培养法三段划线、纯培养三段划线、纯培养无菌技术无菌技术油镜使用、细菌形态学观察油镜使用、细菌形态学观察革兰染色法革兰染色法生化反应观察生化反应观察药敏试验药敏试验血清学诊断血清学诊断核酸检测核酸检测第1页/共50页第二页，共51页。标本(biobn)染色(rns)镜检血平板(pngbn) 观察可疑菌落染色镜检纯培养甘露醇发酵试验血浆凝固酶试验耐热核酸酶试验动物试验药敏试验化脓性球

2、菌的分离鉴定程序第2页/共50页第三页，共51页。第3页/共50页第四页，共51页。Microbiology LabMicrobiology Lab第4页/共50页第五页，共51页。第5页/共50页第六页，共51页。第一节第一节 细菌细菌(xjn)感染的微生感染的微生物血检查法物血检查法第6页/共50页第七页，共51页。血清学鉴定第7页/共50页第八页，共51页。形态和染色性有明显特征的病原菌第8页/共50页第九页，共51页。革兰染色(rns)结果比较 抗酸染色(rns)革兰染色(rns)阳性菌 革兰染色(rns)阴性菌（葡萄球菌） （大肠埃希菌）结核结核(jih)(jih)分枝分枝杆菌杆菌

3、M MTuberculosis Tuberculosis 第9页/共50页第十页，共51页。 病原菌的分离(fnl)和鉴定：第10页/共50页第十一页，共51页。 金黄色葡萄球菌光滑型菌落结核分枝杆菌粗糙(cco)型菌落第11页/共50页第十二页，共51页。Flame sterilize wire loop, metal forceps, etc before and after use in a hooded Bunsen burner 第12页/共50页第十三页，共51页。 糖发酵试验糖发酵试验 H2S试验试验枸橼盐利用试验枸橼盐利用试验细菌代谢产物的检测 得到细菌纯培养物后，用糖发酵试验

4、、吲哚试验、硝酸盐还原试验等对细菌的酶系统得到细菌纯培养物后，用糖发酵试验、吲哚试验、硝酸盐还原试验等对细菌的酶系统和其代谢产物的检查，是鉴别细菌的重要方法之一。特别是有些细菌特征基本相同，因和其代谢产物的检查，是鉴别细菌的重要方法之一。特别是有些细菌特征基本相同，因此有必要经分离培养后用生化试验进行鉴定。但步骤繁杂此有必要经分离培养后用生化试验进行鉴定。但步骤繁杂(fnz)(fnz)耗时。随着现代化技耗时。随着现代化技术的发展，细菌检测的技术水平也不断地提高，正在逐步实现快速化、微量化、自动化术的发展，细菌检测的技术水平也不断地提高，正在逐步实现快速化、微量化、自动化和标准化。和标准化。生化

5、(shn hu)反应第13页/共50页第十四页，共51页。第14页/共50页第十五页，共51页。 动物(dngw)试验第15页/共50页第十六页，共51页。毒力检测(jin c)第16页/共50页第十七页，共51页。纸碟法试管(shgun)法小杯法凹孔法 最低抑菌浓度（MIC）是能够(nnggu)抑制细菌生长的最低药物浓度；最低杀菌浓度（MBC）是指能够(nnggu)杀灭细菌最低药物浓度； MIC和MBC的值越低，表示细菌对该药越敏感 药物敏感(mngn)试验第17页/共50页第十八页，共51页。第18页/共50页第十九页，共51页。Toxins from E. coli 0157:H7 ba

6、cteria and others can cause fatal disease in humans, and they can be food borne 第19页/共50页第二十页，共51页。第20页/共50页第二十一页，共51页。PCR Machine聚合酶链反应聚合酶链反应（PCR）PCR产物的检测产物的检测第21页/共50页第二十二页，共51页。第22页/共50页第二十三页，共51页。由中国科学院研制的IgM抗体检测试剂盒(酶联免疫法)，被国家食品(shpn)药品监督管理局批准进行试生产第23页/共50页第二十四页，共51页。Immunology evaluates a patie

7、nt immune system by detecting the bodies response (an antibody) to a foreign agent (or antigen). The presence of antigens can be detected too第24页/共50页第二十五页，共51页。 血清学试验举 例 凝集试验 肥达反应 补体结合试验钩体病 中和试验 抗O试验第25页/共50页第二十六页，共51页。BTA Assay and Reader.Tracking Chain of Custody BTA Assay and Reader.Tracking Cha

8、in of Custody 第26页/共50页第二十七页，共51页。Autonomous Pathogen Detection System (APDS)The Autonomous Pathogen Detection System is capable of continuous, automated, 24-hour monitoring for pathogens, with results reported every 30 minutes 第27页/共50页第二十八页，共51页。HANAA in Hand About the size of a brick, the HANAA b

9、iodetection system can be held in one hand and weighs less than a kilogram. The system was designed for emergency response groups, such as firefighters and police, who are often first on the scene at sites where bioterrorism may have occurred. Each handheld system can test four samples at onceeither

10、 the same test on four different samples or four different tests on the same sample. HANAA can provide results in less than 30 minutes, compared with the hours to days that regular laboratory tests typically take.第28页/共50页第二十九页，共51页。This technique is essentially an ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent

11、 Assay) method, however with an extremely sensitive all-electronic detection system. 第29页/共50页第三十页，共51页。Tiny computer chip can detect toxinsThe lab on a chip, its developers say, could have potential applications in law enforcement, environmental pollution detection, military medical care, or for an

12、yone who needs a cheap and portable method of identifying the presence of specific toxins or DNA without the benefit of a laboratory.This device could be developed into something medics use in the field to get answers in a matter of minutes rather than hours.Research on the fluorescence microscopy d

13、etection system, which provides a cheap and portable method for identifying specific toxins or DNA, was funded by the National Science Foundation.UC BERKELEY PHOTO 第30页/共50页第三十一页，共51页。第二节第二节 病毒感染的微生物学病毒感染的微生物学(wi shn w xu)检测法检测法第31页/共50页第三十二页，共51页。扫描电镜 透射电镜第32页/共50页第三十三页，共51页。第33页/共50页第三十四页，共51页。 狂犬

14、病病毒(bngd) 天花(tinhu)病毒 冠状病毒 SARS冠状病毒冠状病毒第34页/共50页第三十五页，共51页。二、病毒分离培养二、病毒分离培养(piyng)的方法的方法采集(cij)标本抑制(yzh)杂菌（青、链霉素）n病毒分离u易感动物-出现病状u鸡胚 -病变或死亡u细胞培养 -细胞病变病毒鉴定（血清学方法）（血清学方法）第35页/共50页第三十六页，共51页。第36页/共50页第三十七页，共51页。(xbo)第37页/共50页第三十八页，共51页。细胞培养技术细胞培养技术(jsh)第38页/共50页第三十九页，共51页。第39页/共50页第四十页，共51页。第40页/共50页第四十

15、一页，共51页。n中和试验（neutralization test，NT）正常(zhngchng)细胞病变细胞第41页/共50页第四十二页，共51页。第42页/共50页第四十三页，共51页。第43页/共50页第四十四页，共51页。Hemadsorption of Hemadsorption of monkey red blood cellsmonkey red blood cells第44页/共50页第四十五页，共51页。n 红细胞凝集红细胞凝集 hemagglutination n n一种检测含血凝素病毒一种检测含血凝素病毒(bngd)的方法的方法第45页/共50页第四十六页，共51页。n病

16、毒抗原(kngyun)的检测n荧光标记技术、ELISA或放射免疫标记技术 第46页/共50页第四十七页，共51页。 将已知的抗病毒血清先与病毒悬液混合在一起，在一定温度条件下作用一定时间后，接种于敏感细胞进行培养，观察(gunch)病毒致细胞病变作用或红细胞吸附现象是否消失。 这是比较可靠的病毒诊断方法 中和试验中和试验(shyn) neutralization test，NT第47页/共50页第四十八页，共51页。中和作用血凝血凝抑制(yzh)第48页/共50页第四十九页，共51页。ELISA法法 特异性高、敏感性强、操作方便，广泛用于特异性高、敏感性强、操作方便，广泛用于细菌、病毒和其他病原体的临床化验室检测，细菌、病毒和其他病原体的临床化验室检测，特别特别(tbi)在病毒感染性疾病的诊断中在病毒感染性疾病的诊断中 n蛋白印迹技术蛋白印迹技术 Western blot n目前目前WHO规定该试验规定该试验(shyn)作为作为HIV感染的确认感染的确认试验