阿贝成像与空间滤波

1、实验四 阿贝成像与空间滤波前言阿贝成像原理是1873 年由E.阿贝在显微镜成像中提出来的。在相干照明下，被物体衍射的相干光（见光的干涉），只有当它被显微镜物镜收集时,才能对成像有贡献。换句话说,像平面上光场分布和像的分辨率由物镜收集多少衍射光来决定。空间滤波是基于阿贝成象原理的一种光学信息处理方法，它用空间频谱的语言分析物光场的结构信息，通过有意识的改变物频谱的手段来产生所期望的像。一、实验原理1）.二维傅里叶变换设有一个空间二维函数，其二维傅里叶变换为F （1）式中分别为x,y方向的空间频率，其量纲为L-1，而又是的逆傅里叶变换，即 F-1 （2）式（2）表示任意一个空间函数，可以表示为无穷

2、多个基元函数的线性叠加，是相应于空间频率为的基元函数的权重，称为的空间频率。当是一个空间周期性函数时，其空间频率是不连续的离散函数。2）.光学傅里叶变换理论证明，如果在焦距为F的会聚透镜的前焦面上放一振幅透过率为的图象作为物，并以波长为的单色平面波垂照明图象，则在透镜后焦面（,）上的振幅分布就是的傅里叶变换，其中与坐标,的关系为 （3） 图 1故面称为频谱面（或傅氏面），见图1，由此可见，复杂的二维傅里叶变换可以用一透镜来实现，称为光学傅里叶变换，频谱面上的光强分布则为，称为频谱，也就是物的夫琅禾费衍射图。3）.阿贝成像原理阿贝在1873年提出了相干光照明下显微镜的阿贝成像原理，他认为，在相干

3、的光照明下，显微镜的成像可分为两个步骤：第一步是通过物的衍射光在物镜后焦面上形成一个衍射图，第二步则为物镜后面上的衍射图复合为（中间）像，这个像可以通过目镜观察到。成像的这两个步骤本质上就是两次傅里叶变换，第一步把物面光场的空间分布变为频谱面上空家频率分布，第二步则是再作一次变换，又将还原到空间分布。图2显示了成像的这两个步骤，为了方便起见，我们假设是一个一维光栅，单色平行光照在光栅上，经衍射分解成为不同的很多束平行光相应于一定的空间频率），经过物镜分别聚焦在后焦面上形成点阵，然后代表不同空间频率的光束又重新在像平面上复合而成像。图 2如果这两傅氏变换完全是理想的，即信息没有任何损失，则像的物

4、应完全相似（可能有放大或缩小），但一般说来像和物不可能完全相似，这是由于透镜的孔径是有限的，总有一部分衍射角度较大的高次成分（高频信息），不能进入到透镜而被丢失了，所以像的信息总是比物的信息要少一些，高频信息主要反映了物的细节，如果高频信息受到了孔径的限制而不能到达像平面，则无论显微镜有多大的放大倍数，也不可能在像平面上显示出这些高频信息所反映的细节，这是透镜分辨率受到限制的根本原因，特别当物的结构非常精细（如很密的光栅）或物镜孔非常小时，有可能只有0级衍射（空间频率为0）能通过，则在像平面上就完全不能形成像。 4）.空间滤波根据上面讨论，成像过程本质上是两次傅里叶变换，即从空间函数变为频谱函

5、数，再变回到空间函数（忽略放大率），如果我们在频谱面（即透镜的后焦面）上放一些模板（吸收板或相移板），以减弱某些空间频率成分或改变某些频率成分的相位，则必然使像面上的图象发生相应的变化、，这样的图象处理称为空间滤波，频谱面上这种模板称为滤波器，最简单的滤波器就是一些特殊形状的光阑，它使频谱面上一个或一部分量通过，而挡住了其他频率分量，从而改变像上图象的频率成分，例如圆孔光阑,它使频谱面上一个或一部分频率分量通过，而挡住了其他频率分量，从而改变像上图象的频率成分。二、知识与实验设计1.描述物的空间频率概念及观察方法：空间频率是指每度视角内图象或刺激图形的亮暗作正弦调制的栅条周数，单位是周/度。它

6、是根据19世纪数学家J.-B.-J. 傅里叶提出的分析振动波形的理论而出现的描述视觉系统工作特性的概念。最初在物理光学中，空间频率指每毫米具有的光栅数，单位为线/毫米。波矢量为 的单色平面波在空间位置的复振幅为 如果该平面波沿传播，平行于，上式变成 这是一个关于的周期函数，空间周期为，表示复振幅在传播方向上单 位长度内重复的次数，因此称 为延传播方向的空间频率。2.观察方法：即在傅里叶光学系统的频谱面上放置一光屏，即可看到由傅里叶透镜汇聚 产生的频谱分布图。 实验步骤:(1)共轴光路调节 在光具座上将小圆孔光阑靠近激光管的输出端，上下左右调节激光管，使激光束能穿过小孔；然后移远小孔，如光束偏离

7、光阑，调节激光管的仰俯，再使激光能穿过小孔，重新将光阑移近，反复调节，直至小孔光阑在光具座上平移时，激光束能通过小孔光阑。(2) 阿贝成像原理实验如实验光路图在物平面上放上一维光栅，用激光器发出的细锐光束垂直照到光栅上，用一短焦距薄透镜（610cm）组装一个放大的成像系统，调节透镜位置，使光栅狭缝清晰地成像在像平面屏上，在频谱面上放上可调狭缝,那么在频谱面上的衍射点如图所示。 3.分析与综合：给定一个一维矩形光栅：将该光栅放入4f 光学系统进行分析，运用傅里叶分析理论，分析一维矩形光栅的频谱；采用matlab 绘出：Ø 当只有0 级，0、±1 级通过时，该光栅的像分布；&#

8、216; 当去掉该光栅0 级空间频率时，该光栅的像分布。Matlab代码Ls=30; Lw=10; f = ones (250 ,250); for i = 1 :Lw f (i :Ls:end , :) = 0;endg=fft2(f); g=fftshift(g); g_display=abs(g).2;W=15; aperature=zeros(250); aperature(126-W/2):(125+W/2),:)=1; W1=15; aperature1=ones(250); aperature1(126-W1/2):(125+W1/2),:)=0;W2=16; aperature

9、2=zeros(250); aperature2(126-W2/2):(125+W2/2),:)=1;X=aperature.*g;X1=aperature1.*g;X2=aperature2.*g; img_f=ifft2(X); img_f=abs(img_f).2;img_f1=ifft2(X1); img_f1=abs(img_f1).2;img_f2=ifft2(X2); img_f2=abs(img_f2).2;subplot(2,2,1),imshow(f);subplot(2,2,2),imshow(img_f);subplot(2,2,3),imshow(img_f1);su

10、bplot(2,2,4),imshow(img_f2);MATLAB仿真图样：原始图像输出高通输出低通（0级）输出低通（0,+1）三、运用设计实验，验证上述光栅的空间滤波作用。（1） 实验光路图 （2） 实验步骤1.共轴光路调节： 在光具座上将小圆孔光阑靠近激光管的输出端，上下左右调节激光管，使激光束能穿过小孔；然后移远小孔，如光束偏离光阑，调节激光管的仰俯，再使激光能穿过小孔，重新将光阑移近，反复调节，直至小孔光阑在光具座上平移时，激光束能通过小孔光阑。2.阿贝成像原理实验： 如实验光路图在物平面上放上一维光栅，用激光器发出的细锐光束垂直照到光栅上，用一短焦距薄透镜（20cm）组装一个放大的

11、成像系统，调节透镜位置，使光栅狭缝清晰地成像在像平面屏上。 3.空间滤波： 在频谱面上设置一可调狭缝作为光阑，调节夹缝宽度，使其刚好能通过频谱图上0级次的光，观察像面上图像的变化并记录。 再调节缝宽，使其刚好能通过频图上0级，1级的光，观察像面上图像的变化并记录。 将可调狭缝撤走，在同一位置设置一合适的遮光板，使其刚好能挡住频谱图上0级次的光，观察像面上图像的变化并记录。 光栅狭缝清晰成像 0级通过 0，1级通过 0级不通过四、拓展：理解并讨论相衬显微技术的原理及应用1.原理：相衬显微技术是一种光学显微技术，光线在穿过透明的样品时会产生微小的相位差，而这个相位差可以被转换为图象中的幅度或对比度

12、的变化，这样就可以利用相位差来成像。光线在穿过非真空介质时，会与介质发生作用从而产生幅度和相位的变化，这种变化与介质的性质相关。幅度的变化通常是由于介质对光的吸收，变化程度与波长也就是光的颜色相关，而介质的厚度、折射率的变化会导致光线相位的改变。人的眼睛仅能测量到达视网膜的光线的能量强度，而很难观察到相位的改变，普通的光学显微镜也无法检测相位的改变。然而相位的变化通常也会携带相当多的信息，但是在对光线进行测量的时候这部分信息就全部丢弃了。为了使相位变化的信息可以被观察到，就需要将穿过样品的光线与参考光源l相结合，相干的结果可以显示出样品的相位结构。相衬显微镜观察样品时不需要进行染色，在观察细胞

13、的时候也就不会对细胞标本产生伤害，因此这种显微镜可以用来研究细胞周期。2.应用相衬显微镜的原理图中省略了一些细节。首先，聚光环仅仅是一个位于平面1中央的小光圈，而相位板也仅仅覆盖在了平面3中央的小光圈上。其次，物镜、目镜灯光学系统被极大的简化了，图中仅使用了两个透镜来代表所有的光学器件。为了进一步的理解相衬照明的工作原理，我们来研究两个波阵面（如左图）2。平面1处在聚光器的前焦平面上。光线通过小孔S射入，通过聚光器射出后形成平行的波阵面。当这些平面波碰到物平面2处的位向物体O的时候，一些光在穿过标本时被折射。假设标本不会显著的改变入射光的幅度，而仅仅改变了它们和参考光之间的相位关系，新产生的球

14、面波前在从标本射出后相位将被延迟90° （/4）。注意到现在有两种类型的波，作为参考光的S波和折射光D波，它们之间存在这90° 的相差。物镜将D波在主像平面，也就是图中的平面4的内部聚焦，而S波将在其后焦平面，也就是平面3上聚焦。相位板P现在对S波有显著影响，而大多数的D波却不受影响。在正相衬中，相位板将所有穿过它的光线的幅度衰减约70-90%，而将相位提前90°，这样，由于S波和D波的相位差达到180°，将引起相消干涉（180°的相移来自两种效果的迭加，S波被相位板提前了90°，D波被相位物体延迟了90°）。如果没有相位板，就不会有显著的相消干涉，这样就会导致对比度的降低。通过相衬照明的技术，不可见的相位变换