罗氏诊断降钙素原(PCT)中文说明书

1、Elecsys 禾口 cobas e 分析仪1 / 62008-03, V 305056888 200100 测试mplex (Ru(bpy)2亠三联吡啶钉3Elecsys 禾口 cobas e 分析仪# / 62008-03, V 3Elecsys 禾口 cobas e 分析仪# / 62008-03, V 3的法规12，13。本试剂盒适用的分析仪Elecsys2010MODULARANALYTICSE170cobas e 411cobas e6012222主要用途用于体外定量检测人体血清或血浆中的PCT（procalcit onin）。Elecsys BRAHMSPCT检测可辅助临床早期诊

2、断相关的细菌感染。Elecsys和cobas e 免疫分析仪的工作原理是电化学发光免疫分析“ ECLIA ”。临床应用降钙素原（PCT是由116个氨基酸组成的激素 原，分子量大约为12.7kD。PCT由神经内分泌 细胞（包括甲状腺、肺和胰腺组织的C细胞）表达，经酶切分解为（未成熟）降钙素、羧基 端肽和氨基端肽。健康人血中仅含有少量的1 2PCT'。细菌感染后PCT会明显升高。动物模型试验显示机体发生脓毒血症时，多组织均能表达PCT。脓毒血症患者体内的PCT只含有114个氨基酸，缺少氨基末端的Ala-Pro 4。PCT水平升高见于细菌性脓毒血症，尤其是重 症脓毒血症和感染性休克 5,6,

3、7,8,9,10。PC可作为 脓毒血症的预后指标8,11,12,13，也是急性重症胰 腺炎及其主要并发症的可靠指标14,15。对于社区获得性呼吸道感染和空调诱导性肺 炎患者，PCT可作为抗生素选择以及疗效判断 的指标。检测原理双抗体夹心法，总检测时间：18分钟第一次孵育：30卩l样本、生物素化的单 克隆PC1抗体以及钉复合物标记为勺单克隆 PC1抗体一起孵育，形成抗原抗体夹心复合物。第二次孵育：添加包被链霉亲和素的磁珠 微粒进行孵育，复合体与磁珠通过生物素 和链霉素的作用结合。将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁 珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通 过ProCell被去除。给电极加以一定

4、的电 压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器 测量发光强度。Elecsys软件自动通过定标曲线计算得到 检测结果。a） Tris（2,2 ' -bipyridyl）ruthenium（II）-co试剂工作溶液M包被链霉亲和素的磁珠微粒（透明瓶盖）,每瓶6.5ml ;包被链霉亲和素的磁珠微粒， 0.72mg/ml ;防腐剂。R1生物素化的 Anti-PCT抗体（灰色瓶盖）， 每瓶9ml :生物素化的 Anti-PCT抗体（小 鼠源）约 2.0卩g/mL，磷酸盐缓冲液95mmol/L，Ph7.5;防腐剂。R2钉复合物标记a的Anti-PCT抗体（黑色瓶 盖），每瓶9ml:钉复合物标记a的A

5、nti-PCT 抗体（小鼠源）5.6卩g/mL；磷酸盐缓冲液 95 mmol/L，pH7.5;防腐剂。Cal1冻干的PCT定标液1 （白色瓶盖），1 瓶, 每瓶4ml蒸馏水溶解：PCT （重组）血清基质中浓度约 0.10ng/mL; 防腐剂。Cal2冻干的PCT定标液2 （黑色瓶盖），1瓶， 每瓶4ml蒸馏水溶解：PCT（重组）血清基质中浓度约 54ng/mL; 防腐剂。PC PCT1冻干的PCT质控品1 （米色瓶盖），1 瓶，每瓶4ml蒸馏水溶解：PC（重组）血清基质中浓度约 0.50ng/mL; 防腐剂。PC PCT2冻干的PCT质控品2 （褐色瓶盖），1 瓶，每瓶4ml蒸馏水溶解：PCT

6、（重组）血清基质中浓度约 10ng/mL; 防腐剂。定标：不同批号试剂条码中编码有相应批号的 定标值。质控：不同批号的批特异性质控靶值和范围参 见试剂盒附带的数值表。警告和注意事项仅用于体外诊断。在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操 作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进 行处置。专业人员可要求获得安全数据报告。所有人源性物质必须视为有潜在感染性。所有产品由献血员单体提供，经特殊制备而 成，经检测HBAg、HCV抗体、HIV抗体，均为 阴性。所应用的检测方法经FDA认可或符合欧洲法令98/79/EC 附件II列表 A。但由于任何实验方法都不能绝对地排除潜在 感染的危险，故该产品仍需视作

7、病人样本一样 仔细处理。接触者必须遵循健康专业机构相应Elecsys 禾口 cobas e 分析仪2 / 62008-03, V 3降hhhiiiiiiiiiElecsys 禾口 cobas e 分析仪3 / 62008-03, V 3若试剂超过保质期，则不能再使用。避免试剂和样本（样本、定标液和质控品）产 生气泡。（20 - 25°C ）。由于蒸发因素的影响， 在分析仪上的检测必须样本、定标液及质控品2小时内完成。Elecsys 禾口 cobas e 分析仪# / 62008-03, V 3Elecsys 禾口 cobas e 分析仪# / 62008-03, V 3试剂处理试剂盒

8、（M,R1和R2）为即用型。定标液和质控品准确添加4ml蒸馏水复溶瓶内物质，垂直加盖 静置15分钟。充分混匀并避免产生气泡。根据定标液和质控品的用量进行分装，可将复溶后的定标液/质控品转移到空的有盖小瓶中（CalSet/ControlSet Vials），并贴上标签，-20 °保存备用。分装的定标液和质控品只能一次使用。试剂相关信息可以通过试剂条形码阅读获取。储存及稳定性存放于2-8C。请垂直摆放Elecsys BRAHM&CT式剂盒，确保 仪器的自动搅拌器能够完全混匀磁珠微粒。稳定性：未开封试剂，2-8C有效期内均可使用开封试剂，2-8C12周放置分析仪上4周冻干定标液/质

9、控品有效期内均可使用复溶后放置分析仪上2小时（只能使用一 次）复溶后-20 C保存3月（只可冻融一次）定标液和质控品要 垂直保存！确保液体没有附 着在瓶盖上。样本的采集和准备下列类型的样本符合检测要求，并且样本量要充足。血清样本须用标准试管或有分离胶的真空管收集。肝素锂和K3-EDTA抗凝的血浆都适用。标准：斜率0.9-1.1 ，截距 士 2倍分析灵敏度（LDL），相关系数0.95。稳定性：2 - 8° C可保存24小时；-20 C可保 存3月，一次冻融。标本采集后建议在24小时内完成检测，否则应 -20 C冰冻保存。冻融标本的检测回收率可降低约8%。选择合适的试管进行不同类型样本的

10、采集，不是所有的试管均可用于检测。不同厂商的样本采集系统可能含有不同的物质，某些情况下会影响检测结果。如果使用原始管进行检测（样本前处理系统）时，应遵循生产商所提供的指导。有沉淀和冰冻的样本检测前必须先作离心处理。添加叠氮化合物的样本和质控品均不能使用。 检测前，样本、定标液及质控品须室温平衡提供的物品参阅“试剂工作溶液”章节。2 2个条码卡2质控条码2 43 8 小瓶标签2 4个 有标签的有盖小空瓶 需要的物品（未提供）« 货号 11776576, CalSet Vials,有盖小空瓶规格2 x56 货号 03142949, ControlSet Vials,有盖小空瓶规格2 x5

11、6 实验室基础设备 Elecsys 2010、MODULARNALYTICSE170 或cobas e分析仪Elecsys 2010 和cobas e 411分析仪所需材料：« 货号 11662988, ProCell, 6 x 380 mL ,系统缓冲液« 货号 11662970, CleanCell, 6 x 380 mL,测量池洗液* 货号 11930346, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL附加洗液* 货号 11933159, SysClea n适配器* 货号 11706802, Elecsys 2010 分析杯，60 x 60反应管* 货号

12、11706799, Elecsys 2010分析吸头，30 x 120移液管吸头MODULAR ANALYTICS E17和 cobas e 601 分析仪所需材料：* 货号 04880340,ProCell M, 2 x 2 L 系统 缓冲液* 货号 04880293, CleanCell M, 2 x 2 L 测 量池洗液* 货号03023141, PC/CC杯,12个用于在检 测前预热 Procell M 及 Cleancell M 。* 货号 03005712,ProbeWash M, 12 x 70 mL 清洗液，用于在检测完毕后或更换试剂时 清洗试剂针。* 货号 03004899,

13、 PreClean M, 5 x 600 mL 检测清洗液* 货号12102137,反应杯/吸头 组合装，3 84反应杯/吸头 组合装48盒，废物袋货号 03023150, WasteLiner, 废物袋* 货号03027651,系统清洁适配器 M所有分析仪需要：* 货号 11298500, Elecsys SysClea n, 5 x降niiiiiiiiiiin，iCTi_干扰因素检测结果不受黄疸 （胆红素428卩mol/L或25 mg/dl ）,溶血（血红蛋白 0.559mmol/L或 0.900g/dl）,脂血（脂肪乳剂 1500mg/dl ）和生物素123nmol/L或30ng/ml的

14、影响。回收率标准：回收率在初始值的士 15%之内。 对于接受高剂量生物素治疗的患者（ 5 mg/100 mL系统清洗液检测要优化检测性能，请遵照本说明书中有关分析 仪的相关指导，并参照分析仪操作手册。试剂使用前分析仪自动搅拌磁珠微粒，使其处于悬浮状态。试剂相关信息可通过条形码自动 读取，在特殊情况下， 分析仪无法自动读取条 码信息时，请输入条码标签上的15位数字序列。MODULAR ANALYTICS E170 Elecsys2010 和 cobas e分析仪：将冷藏试剂室温平衡至20 °C 左右，放置分析仪的试剂盘（20° C）内。避 免泡沫产生。分析仪能自动调节试剂温度

15、和 开、关各试剂盒瓶盖。将复溶的定标液放置在分析仪的样本架上。定标时保证瓶盖开启。定标所需的信息都编码在 条码上，分析仪会自动读取。定标液只能一次使用。质控品（PC PCT1和PC PCT2的信息都编码在 质控条码上，分析仪会自动读取。 质控品只能 一次使用。定标溯源性：可溯源至 BRAHMS PCT LIA分析。 每套Elecsys BRAHMECT式剂的条码标签上均 含有其批号特异的定标信息。使用 Elecsys BRAHMS PCT Cal1 和 Cal2 定标， 可调整符合分析仪要求的预定义定标曲线。定校频率：不同批号试剂须使用 Elecsys BRAHMS PCTCal1, Cal2

16、重新定标（新试剂盒在分析仪上放 置不能超过24小时）。以下情况建议重新进行定标：* 使用同一批号试剂，1月后（28天）* 7天后（同一试剂盒在分析仪上使用）* 根据需要：如失控。质控室内质控可使用 Elecsys BRAHMSPreciCo ntrolPCT1和 2。也可以使用其他合适的质控品。质控品1和质控品2至少每24小时内检测一次， 每次更换试剂盒或定标后也须进行质控。每个实验室可根据各自的情况设定合适的控制限 和质控周期。质控值必须处于规定的控制限 内。若失控每个试验室必须采取相应的纠正措施。计算仪器会自动计算每个样本中的分析物浓度，单位 n g/mL。天），必须在末次生物素治疗8小时

17、后采集样本。浓度达150IU/ml的类风湿因子对检测无影响。浓度高达1000ng/ml的PC对检测不产生hook 效应。体外对18种常用药物以及10种特殊药物进行试验未发现会影响检测结果。由于检测试剂中含有单克隆鼠抗体，因此某些接受单克隆鼠抗体治疗或诊断的患者样本检 测结果可能有误。少数病例中极高浓度的链霉素抗体和钉会影 响检测结果。试剂含有的添加成份减少了上述因素的影响。除感染外，以下情况也会岀现PCT水平的升高20 长时间或者重度心脏休克 长期的器官重度不规则灌注 小细胞肺癌或者甲状腺髓质C细胞肿瘤 大面积外伤早期、外科手术和严重烧伤 炎症细胞因子刺激和释放治疗 新生儿（岀生后48小时内）

18、作为诊断指标，必须结合患者病史，临床检查和其他临床资料来综合评估检测结果。检测范围0.02-100 ng/mL （通过最低检岀限和厂商定标 曲线的最高值确定）。低于检岀限的值报告 0.02ng/mL。超过检测范围的值报 告 100ng/mL。稀释PCT浓度超过检测范围的样本可以用PCT阴性血清进行手工稀释。推荐稀释比是1 : 4。稀释样本的浓度必 须1.0ng/mL。手工稀释的检测结果要乘以稀 释倍数。期望值参考范围使用Elecsys BRAHMS PCT检测492例表面健康 者（其中245为男性，247为女性），得到正常 参考值为0.046ng/ml（95百分位点）。临床Cut-off值El

19、ecsys 禾口 cobas e 分析仪6 / 62008-03, V 3> 2 n g/mL71623共计9571166根据以上数据，临床敏感性为 23%临床特异 性为93%阳性预期值为 70%,阴性预期值为 62%。Elecsys BRAHMSPCT检测得到的结果和文献相 符20。一项关于ICU病人的研究显示：PCTvO.5 ng/mL预示低风险的严重脓毒血症和 或感染性休克PCT>2 ng/mL预示高风险的严重脓毒血症和 感染性休克每个实验室应通过实验确定参考范围的适用 性，必要时建立本实验室的参考范围。临床性能根据 ACCP/SCCM （America n College

20、ofChest Physicians/Society of Critical Care Medicine）标准，对283例首诊的ICU病人进行 分类：分为SIRS （全身炎症反应综合征）（95例）、脓毒血症（71例）、严重的脓毒血症（60 例）和感染性休克（57例）22，检测PCT勺结果如 下：以cut-off 值为0.5 ng/mL进行统计临床分类ElecsyBRAHMS PCTSIRS严重的脓毒血症/感染性休克共计<0.5 n g/mL63568> 0.5 ng/mL32112144共计95117212根据以上数据，临床敏感性为 96%临床特异 性为66%阳性预期值为 78%,

21、阴性预期值为93%临床分类ElecsyBRAHMS PCTSIRS脓毒血症共计<0.5 n g/mL632588> 0.5 ng/mL324678共计9571166根据以上数据，临床敏感性为 65%临床特异 性为66%阳性预期值为 59%,阴性预期值为72%特殊的性能指标试剂在分析仪上的性能试验数据如下。各实验室由于具体情况不同， 所得岀的数据可能会稍 有差异。精密度应用Elecsys试剂盒、人混合血清/血浆样本 和质控品验证重复性， 按照CLSI的EP5-A2执 行：每天2次，共21天（n=84）。下面是获得的结果。Elecsys 20*10 and cobas b 411Wit

22、h In-run precisionTotal precisianSampleMean ngmLSD nyinLCV%SD ng/mLcv %Human plasma 10.0600.005BS0.01016.3Human plasma 20.6220.0132.10.026J-.2Human plasma 34120.87S2.12盘4.9P*ecFConirol PCT10.520D.0071.3o.oig3.7PrciCDnlral PCT21020.妙卿0.4044。MODULAR ANALYTICS EIE Bind 亡曲醋皀 601 zi问lyw畑Within-run precis

23、iunlotel preciswnSampleMean ny'mLSD ng/mLcv %SD nytrilCV %Human serum 1O.OBO0.0067.10.0078.7Human 盟njrm 20.431ia0.011Human serum 354406ia110.8951.6PrecfCanlrol PCT10.49!0.0132&0 01632PietiConlriol FCT2§590.1 Bl1.S0.22?23分析灵敏度最低检岀限< 0.02 n g/mL最低检岀限是最低浓度标准品+2SD得到的浓度（厂商定标品1+2SD,批内精密度，n

24、=21）Elecsys 禾口 cobas e 分析仪7 / 62008-03, V 3临床分类ElecsyBRAHMS PCTSIRS严重的脓毒血症/感染性休克共计<2 n g/mL8818106> 2 n g/mL799106共计95117212以cut-off 值为2.0ng/mL进行统计方法学比较使用人肝素抗凝血浆比较 分析（y）和 BRAHMPCT 数据如下（ng/mL）:比较标本数n=15223Pass in g/Babloky = 1.065x - 0.090t = 0.856Elecsys BRAHMCTLIA分析（x），相关性线性回归y = 1.143x - 0.1

25、94r = 0.981Elecsys 禾口 cobas e 分析仪# / 62008-03, V 3比较样品浓度约为0.3 82 ng/mL根据以上数据，临床敏感性为 85%临床特异 性为93%阳性预期值为 93%,阴性预期值为 82%。临床分类ElecsyBRAHMS PCTSIRS脓毒血症共计<2 n g/mL8855143使用人肝素抗凝血浆比较Elecsys BRAHMECT分析（y）和 BRAHMS PCT sensitive Kryptor 分 析（x），相关性数据如下（ng/mL）:比较标本数n=185Passi ng/Bablok线性回归Elecsys 禾口 cobas e

26、 分析仪8 / 62008-03, V 3Elecsys 禾口 cobas e 分析仪# / 62008-03, V 3ao)bas&Elecsys 禾口 cobas e 分析仪9 / 62008-03, V 3y = 0.850x - 0.035t = 0.953比较样品浓度约为0.4 /y = 1.090x - 0.709 r = 0.98885 ng/mL。分析特异性Elecsys BRAHMS PCT检测与下列物质不发生交叉反应，PCT佥测浓度约为0.4和1.5ng/mL。物质无干扰浓度（ng/mL）Huma n katacalc in30Huma n calcito nin1

27、0Huma n alpha-CGRPb10000Huma n beta-CGRP10000b） Calcit onin Gen e-Related Peptide功能灵敏度< 0.06 n g/mL功能灵敏度是批间检测CV< 20%寸得到的最低分析物浓度。与 BRAHM3PCT LIA/sensitiveKryptor 分析的一致性研究比较 Elecsys BRAHMS PCT分析和 BRAHMSPCT LIA。分别评价 Cut-off 值为 0.5ng/mL 和 2 ng/mL的一致性。BRAHMS PCT LIAElecsys BRAHMS PCT<0.5 ng/mL&g

28、t; 0.5 ng/mL共计< 0.5ng/mL10449153> 0.5ng/mL6370376共计110419529BRAHMS PCT LIAElecsys BRAHMS PCT< 2ng/mL> 2 ng/mL共计< 2 ng/mL26610276> 2 ng/mL11242253共计277252529Cut-off 值为 0.5 ng/mL时，两者的一致性为9U% Cut-OTT为 96%o值为 2 ng/mL时为两者的一致性研究比较 Elecsys BRAHMS PCT分析和PCT sensitive Kryptor 分析。分别评价 Cut-of

29、f 值 为0.5ng/mL 和 2 ng/mL 的一致性。BRAHMS PCT Kryptor sensitiveElecsys BRAHMS PCT< 0.5 ng/mL> 0.5 ng/mL共计< 0.5ng/mL18320203> 0.5ng/mL2392394共计185412597BRAHMS PCT Kryptor sensitiveElecsys BRAHMS PCT< 2 ng/mL> 2 ng/mL共计< 2 ng/mL24336> 2 ng/mL1260261313284597Cut-off 值为 0.5 ng/mL时，两者的一

30、致性为96%； Cut-off值为2 ng/mL时为两者的一致性为 96%。参考文献1. Gendrel D, Bohuon C. Procalcitonin as a marker of bacterial infection. Pediatr Infect Dis J 2000;19:679-688.2. Becker KL, Nyl 缶 ES, White JC, Mtller B,Snider RH. Procalcitonin and the CalcitoninGene Family of Peptides in Inflammation, Infection, and Sepsi

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