探究“酵母菌种群大小的动态变化”ppt课件

1、一探求目的一探求目的 1. 1.初步学会酵母菌等微生物的显微镜计数原初步学会酵母菌等微生物的显微镜计数原 理和方法。理和方法。 2. 2.察看种群数量的变化，学习种群数量变化察看种群数量的变化，学习种群数量变化的动态曲线的绘制。的动态曲线的绘制。 探求探求“酵母菌种群大小的动态变化酵母菌种群大小的动态变化 二探求原理二探求原理: : 用液体培育基培育酵母菌，种群的用液体培育基培育酵母菌，种群的增长受培育液的成分、空间、增长受培育液的成分、空间、pHpH、温度、温度等要素的影响。等要素的影响。可以根据培育液中的酵母菌数量和可以根据培育液中的酵母菌数量和时间为坐标轴做曲线，从而掌握酵母菌时间为坐标

2、轴做曲线，从而掌握酵母菌种群数量的变化情况。种群数量的变化情况。 三探求步骤 1.酵母菌培育液的配制 1 5%的葡萄糖500ml。 2 分装、包扎高压蒸汽灭菌：121摄氏度、0分钟、接种培育、接种培育 用天平称取用天平称取. .克活性干酵母投入盛有克活性干酵母投入盛有0ml0ml葡萄糖培育基的锥形瓶中，置于葡萄糖培育基的锥形瓶中，置于2828C C恒温培育箱中培育恒温培育箱中培育取样察看和计数取样察看和计数 定时取样，将培育液滴在血球计数板上，定时取样，将培育液滴在血球计数板上，选取视野进展察看和计数，计算选取视野进展察看和计数，计算1ml1ml培育培育液中酵母菌的个体数液中酵母菌的个体数4.

3、4.绘制种群个体数量变化的动态曲线绘制种群个体数量变化的动态曲线 以时间为横坐标，以时间为横坐标，mlml培育液中酵母菌培育液中酵母菌的数量为纵坐标，绘出培育液中酵母菌的数量为纵坐标，绘出培育液中酵母菌种群个体数量变化的动态曲线种群个体数量变化的动态曲线血球计数板直接计数法血球计数板直接计数法一、血球计数板计数的原理：一、血球计数板计数的原理： 利用血球计数板在显微镜下直接利用血球计数板在显微镜下直接计数是一种常用的微生物技术方法。这计数是一种常用的微生物技术方法。这种方法的优点是直观、快速。种方法的优点是直观、快速。此法计得的是活菌体和死菌体的总此法计得的是活菌体和死菌体的总和，故又称为总菌

4、计数法和，故又称为总菌计数法 血血球球计计数数板板的的构构造造血球计数板的构造血球计数板的构造 血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上由玻片上由4 4条槽构成条槽构成3 3个平台。个平台。 中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每半边的平台上各刻有一个方隔成两半，每半边的平台上各刻有一个方格网。格网。 方格网上刻有方格网上刻有9 9个大方格，其中只需中间个大方格，其中只需中间的一个大方格为计数室，供微生物计数用。的一个大方格为计数室，供微生物计数用。这一大方格的长和宽各为这一大方格的长和宽各为1mm1mm。 计

5、数室通常有两种规格。计数室通常有两种规格。 一种是大方格内分为一种是大方格内分为1616中格，每一中格又中格，每一中格又分为分为2525小格；另一种是大方格内分为小格；另一种是大方格内分为2525中中格，每一中格又分为格，每一中格又分为1616小格。小格。 但是不论计数室是哪一种构造；它们都有但是不论计数室是哪一种构造；它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由一个共同的特点，即每一大方格都是由161625=2525=2516=40016=400个小方格组成个小方格组成 每个大方格边长为每个大方格边长为1mm1mm，那么每一大方格，那么每一大方格的面积为的面积为1mm21mm2 盖上盖玻片后，

6、盖玻片与计数室底部之盖上盖玻片后，盖玻片与计数室底部之间的高度为间的高度为0.1mm0.1mm，所以每个计数室，所以每个计数室( (大大方格方格) )的体积为的体积为0.1mm30.1mm3 运用血球计数板直接计数时，先要测定运用血球计数板直接计数时，先要测定每个小方格每个小方格( (或中方格或中方格) )中微生物的数量，中微生物的数量，再换算成每毫升菌液再换算成每毫升菌液( (或每克样品或每克样品) )中微中微生物细胞的数量。生物细胞的数量。 计数时，假设运用计数时，假设运用1616格格2525格规格的计数格规格的计数室，要按对角线位，取左上、右上、左下、室，要按对角线位，取左上、右上、左下

7、、右下右下4 4个中格即个中格即100100个小格的酵母菌数。个小格的酵母菌数。 假设规格为假设规格为2525格格1616格的计数板，除了取格的计数板，除了取其其4 4个对角方位外，还需再数中央的一个个对角方位外，还需再数中央的一个中格中格( (即即8080个小方格个小方格) )的酵母菌数。的酵母菌数。 计算公式计算公式运用血球计数板计数时，先要测定每个小方运用血球计数板计数时，先要测定每个小方格中微生物的数量，再换算成每毫升菌液格中微生物的数量，再换算成每毫升菌液或每克样品中微生物细胞的数量。或每克样品中微生物细胞的数量。25251616计数板：计数板：总菌数总菌数/ml=/ml=每小方格内

8、菌数每小方格内菌数4 4106106稀释倍稀释倍数数酵母细胞数酵母细胞数/ml=80/ml=80小格内酵母细胞个数小格内酵母细胞个数/80/804004001010四次方四次方稀释倍数稀释倍数 二 操作步骤1、菌悬液的制备为便于计数，对样品进展适当稀释，稀释程度以每小格内含5-10个酵母为宜，可采用10倍系列稀释法。2、镜检计数室在加样前，先对计数板的计数室进展镜检。如有污物，那么需清洗，用电吹风吹干后才干进展计数。 3 3、加样品、加样品 将清洁枯燥的血球计数板盖上盖玻片，再将清洁枯燥的血球计数板盖上盖玻片，再用无菌的毛细滴管将摇匀的菌悬液由盖玻用无菌的毛细滴管将摇匀的菌悬液由盖玻片边缘让菌

9、液沿缝隙靠毛细浸透作用自动片边缘让菌液沿缝隙靠毛细浸透作用自动进入计数室，用吸水纸吸去多余菌液。样进入计数室，用吸水纸吸去多余菌液。样品要均匀充溢计数室，不可有气泡。品要均匀充溢计数室，不可有气泡。 4 4、显微镜计数、显微镜计数 加样后静止加样后静止5min5min，然后将血球计数板置于，然后将血球计数板置于显微镜载物台上，先用低倍物镜寻觅计数显微镜载物台上，先用低倍物镜寻觅计数室的位置，然后换成高倍物镜室的位置，然后换成高倍物镜4040倍进倍进展计数展计数 显微镜视野中的光线要暗一些，否那么，显微镜视野中的光线要暗一些，否那么，不容易看清计数室的方格线。不容易看清计数室的方格线。 计数时，

10、对位于线上的酵母菌，可采取只计数时，对位于线上的酵母菌，可采取只计数两条边的方法，即遵照计上不计下，计数两条边的方法，即遵照计上不计下，计左不计右的原那么。当酵母菌芽体到达计左不计右的原那么。当酵母菌芽体到达母细胞大小母细胞大小1/21/2时，即可计作两个细胞。时，即可计作两个细胞。 5、清洗血球计数板 计数终了，将计数板在水龙头下冲洗干净，切勿用硬物洗刷，洗完后自行晾干或电吹风吹干。三实验结果记录三实验结果记录各中格中菌数各中格中菌数AB菌菌数数/ml二室二室平均平均值值第一第一室室第二第二室室将结果记录于下表中，将结果记录于下表中，A表示个中方表示个中方格总菌数，格总菌数，B表示菌液稀释倍

11、数表示菌液稀释倍数 1.1.取清洁无油的血球计数板，在计数室上面加取清洁无油的血球计数板，在计数室上面加盖盖 玻片。玻片。 2.2.取酵母菌液，摇匀，用滴管由盖玻片边缘滴取酵母菌液，摇匀，用滴管由盖玻片边缘滴一小滴，使菌液自行渗入，计数室内不得有气一小滴，使菌液自行渗入，计数室内不得有气泡。泡。 3.3.用用1010镜察看并将计数室移至视野中央。镜察看并将计数室移至视野中央。 4.4.在在4040镜下计数：计数镜下计数：计数4 4个或个或5 5个中格的个中格的平均值，然后求得每个中格的平均值。乘上平均值，然后求得每个中格的平均值。乘上1616或或2525就得出计数区总菌数，最后再换算到就得出计

12、数区总菌数，最后再换算到每每mLmL菌液中的含菌数。菌液中的含菌数。 5.5.本卷须知：计上不计下，计左不计右。出芽本卷须知：计上不计下，计左不计右。出芽计一半。计一半。 本卷须知本卷须知(1)(1)显微镜计数时，对于压在小方格界限上显微镜计数时，对于压在小方格界限上的酵母菌，应只计数相邻两边及其顶角的酵母菌，应只计数相邻两边及其顶角的酵母菌。的酵母菌。(2)(2)吸出培育液进展计数前，需将试管悄然吸出培育液进展计数前，需将试管悄然振荡几次，目的是使培育液中的酵母菌振荡几次，目的是使培育液中的酵母菌均匀分布，减少误差。均匀分布，减少误差。 (3)(3)每天计数酵母菌数量的时间要固定每天计数酵母

13、菌数量的时间要固定(4)(4)培育和记录过程要尊重现实，培育和记录过程要尊重现实， 真实记录，真实记录，不能客观臆造。不能客观臆造。1 1、(2019(2019江苏高考题，江苏高考题，31)31)8 8分为研讨酵母菌种群密分为研讨酵母菌种群密度的动态变化，某同窗按下表所列条件进展了度的动态变化，某同窗按下表所列条件进展了A A、B B、C C和和D D 共共4 4组实验，用组实验，用1 000mL1 000mL锥形瓶作为培育器皿，棉塞封口，锥形瓶作为培育器皿，棉塞封口，在在2525下静置培育，其他实验条件均一样，定时用血球计下静置培育，其他实验条件均一样，定时用血球计数板计数。根据实验结果绘出

14、的酵母菌种群密度变化曲线数板计数。根据实验结果绘出的酵母菌种群密度变化曲线图如下，请分析回答以下问题。图如下，请分析回答以下问题。1图中曲线、和分别是_组、_组和_组的结果。B A D 稳定练习稳定练习2B组和组和A组的实验结果不同的缘由是组的实验结果不同的缘由是B组组_。3D组和组和B组的实验结果不同的缘由是组的实验结果不同的缘由是D组组 _。4在整个实验过程中，直接从静置的培育瓶中取培育在整个实验过程中，直接从静置的培育瓶中取培育 原液计数的做法是错误的，正确的方法是原液计数的做法是错误的，正确的方法是 和和 。5实验终了后，用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板的实验终了后，用试管刷蘸洗涤剂擦洗

15、血球计数板的 做法是错误的，正确的方法做法是错误的，正确的方法 是是 。养液较多，与空气接触面积较小，故供氧较少养液较多，与空气接触面积较小，故供氧较少 葡萄糖浓度较低，故营养物供应较少葡萄糖浓度较低，故营养物供应较少 摇匀培育液后再取样摇匀培育液后再取样 培育后期的样液稀释后再计数培育后期的样液稀释后再计数 浸泡和冲洗浸泡和冲洗 解析解析:培育液中物质的浓度过大，会呵斥细胞浸培育液中物质的浓度过大，会呵斥细胞浸透失水而抑制酵母菌的生长繁衍，因此，、透失水而抑制酵母菌的生长繁衍，因此，、是是A A或或B B，、为，、为C C或或D D。培育液体积越小，那么。培育液体积越小，那么瓶内氧气越多，酵

16、母菌进展有氧呼吸，生长繁衍瓶内氧气越多，酵母菌进展有氧呼吸，生长繁衍快，到达最大数量的时间短，故是快，到达最大数量的时间短，故是B B，是，是A A，是是D D，是，是C C。B B组和组和A A组的浓度一样，只需体积组的浓度一样，只需体积不同，故实验结果的差别是由体积呵斥的，培育不同，故实验结果的差别是由体积呵斥的，培育液较多，与空气接触面积较小，故供氧较少；液较多，与空气接触面积较小，故供氧较少；D D组组和和B B组的体积一样而浓度不同，实验结果不同只能组的体积一样而浓度不同，实验结果不同只能是由浓度不同呵斥的，葡萄糖浓度较低，故营养是由浓度不同呵斥的，葡萄糖浓度较低，故营养物质供应较少

17、；由于酵母菌在培育液中分布并不物质供应较少；由于酵母菌在培育液中分布并不均匀，故需摇匀培育液后再取样，由于后期酵母均匀，故需摇匀培育液后再取样，由于后期酵母菌的数量多，能够呵斥堆积而无法计数，应进展菌的数量多，能够呵斥堆积而无法计数，应进展稀释后再取样计数；由于用试管刷蘸洗涤剂擦洗稀释后再取样计数；由于用试管刷蘸洗涤剂擦洗血球计数板能够会使血细胞黏固在血球计数板的血球计数板能够会使血细胞黏固在血球计数板的小室内，呵斥下次无法运用，正确的方法是浸泡小室内，呵斥下次无法运用，正确的方法是浸泡和冲洗。和冲洗。2.2.20212021江苏生物，江苏生物，1919某小组进展某小组进展“探求培育液中酵母探

18、求培育液中酵母菌种群数量的动态变化实验时，同样实验条件下分别在菌种群数量的动态变化实验时，同样实验条件下分别在4 4个试管中进展培育个试管中进展培育( (见下表见下表) )，均获得了，均获得了“S“S型增长曲线。型增长曲线。根据实验结果判别，以下说法错误的选项是根据实验结果判别，以下说法错误的选项是 试管号试管号 培养液体积（培养液体积（mLmL）10105 510105 5起始酵母菌数（起始酵母菌数（10103 3个）个）10105 55 51010A.4A.4个试管内的种群初始阶段都阅历了个试管内的种群初始阶段都阅历了“J“J型增长型增长B.4B.4个试管内的种群同时到达个试管内的种群同时

19、到达K K值值C.C.试管试管内种群的内种群的K K值与试管值与试管不同不同D.D.试管试管内的种群数量先于试管内的种群数量先于试管开场下降开场下降B 3、(2019江苏高考题，江苏高考题，26)(7分分)右图为酵母菌细胞构造表右图为酵母菌细胞构造表示图。请回答以下问题：示图。请回答以下问题：(1)酵母菌细胞构造与菠菜叶肉细酵母菌细胞构造与菠菜叶肉细胞相比，最主要的区别是酵母胞相比，最主要的区别是酵母菌菌 ；与蓝藻细胞相比，；与蓝藻细胞相比，最主要的区别是酵母菌最主要的区别是酵母菌 。(2)图中含有图中含有RNA的构造有的构造有 (填序号填序号)。(3)图中不能直接分解葡萄糖但能释放图中不能直接分解葡萄糖但能释放CO2的构造是的构造是 (填填序号序号)。(4)为制备酵母菌原生质体，需用酶解法除去构造，但应在为制备酵母菌原生质体，需用酶解法除去构造，但应在 溶液中进展。溶液中进展。没有叶绿体没有叶绿体 具有核膜包被的细胞核有成形的细胞核具有核膜包被的细胞