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文档简介

1、课题 2多聚酶链式反应扩增DNA片段一、单项选择题1下列有关 PCR的描述,不正确的是()A PCR技术的原理是 DNA复制B用 PCR技术扩增 DNA是一个酶促反应,需耐高温的解旋酶和DNA聚合酶C一个 DNA片段经 PCR扩增,可形成nn2解析: PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,它以极少量的DNA为模板,以四种脱氧核苷酸为原料,在引物作用下使DNA聚合酶从引物的3' 端连接脱氧核苷酸,短时间内迅速复制上百万份的DNA拷贝。 PCR利用 DNA在不同温度下变性解聚或复性的特性来解旋并结合引物,不用解旋酶解旋。答案: B2.PCR 技术最突出的优点是()A原理简单B原料易找C

2、 Taq DNA 聚合酶有耐热性D快速、高效、灵活、易于操作答案: D3 PCR技术的操作步骤依次是()A高温变性、中温延伸、低温复性B高温变性、低温复性、中温延伸C中温延伸、高温变性、低温复性D中温延伸、低温复性、高温变性答案: B4聚合酶链式反应(PCR技术 ) 是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行, 使目的 DNA得以迅速扩增, 其简要过程如下图所示。下列关于PCR技术的叙述,不正确的是()A PCR技术是在实验室中以少量DNA制备大量DNA的技术B反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板C PCR技术中以核糖核苷酸

3、为原料,以指数方式扩增D应用 PCR技术与探针杂交技术可以检测基因突变解析: PCR技术是人工合成DNA的方法,原料是脱氧核苷酸,不是核糖核苷酸。答案: C5 PCR 实验室中使用的微量离心管、缓冲溶液以及蒸馏水使用前必须进行的关键步骤是()A反复洗涤B用酒精擦洗C高压灭菌D在 20 下储存解析: 为了避免外源DNA等因素的污染,PCR实验室中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌。PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份,并在20 储存 。使用前,将所需的试剂从冰箱内拿出,放在冰块上缓慢融化。答案: C6 PCR技术中,引物的作用是()A打开 DNA双链B催化合成DNA

4、子链C使 DNA聚合酶能够从引物的3端开始复制D提供模板解析: DNA聚合酶不能从头开始合成 DNA,而只能从 3端延伸 DNA链,引物的作用就在于此。答案: C7有关 PCR反应的叙述中,正确的是()A PCR反应所需要的引物只有RNAB PCR反应所需要的原料是核糖核苷酸C PCR反应所需要的酶在60 会变性D PCR反应需要在一定的缓冲溶液中进行答案: D8 DNA 检测技术可应用于亲子鉴定、遗传病检测等领域。DNA检测离不开对样品DNA的 PCR扩增。不同样品DNA的扩增过程或条件不同的是()A引物B DNA聚合酶C四种脱氧核苷酸D预变性的温度解析: 不同的样品DNA有不同的核苷酸序列

5、,由于引物能与模板DNA(样品基互补配对原则结合,因此不同样品DNA所需的引物有不同的核苷酸序列。答案: ADNA)按照碱9复性温度是影响PCR特异性的较重要因素。变性后温度快速冷却至4060,可使引物和模板发生结合。PCR的结果可不考虑原来解旋开的两个DNA模板链的重新结合,原因不包括()A由于模板DNA比引物复杂得多B引物和模板之间的碰撞结合机会远远高于模板互补链之间的碰撞C加入引物的量足够多而模板链数量少D模板链加热解旋已经变性,不可能再次结合解析: DNA分子在 80100 的温度范围内双螺旋结构解体,双链打开,在DNA分子复制时提供模板,这个过程称为变性。当温度缓慢降低到50 左右时

6、,两条解聚的单链重新结合成双链,称为复性,故D 项阐述错误。答案: D10在 PCR扩增 DNA的实验中,根据设计,一分子DNA经 3010循环次数不够 Taq DNA聚合酶活力不够或其活性受到抑制次循环后,应得到约()引物不能与亲链结230合系统设计欠妥AB CD 解析: 该现象属于在PCR扩增中假阴性现象。其原因有:(1) Taq DNA 聚合酶活力不够或其活性受到抑制导致催化效率降低,得到的产物比预期的少; (2) 引物设计不合理,可能不能与模板DNA结合,导致无法进行扩增;(3) 提取的模板数量或质量不过关,可能不能起模板作用。也无法进行扩增;(4)PCR 系统设置不妥,达不到预期的效

7、果;(5) 循环次数过少,产物的量比预期的少。答案: D二、双项选择题11关于 DNA的复制,下列叙述正确的是()A DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从5端延伸DNA链B DNA复制需要引物C引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合D DNA的合成方向总是从子链的3端向5端延伸解析:由于 DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,只能从引物的3端即复制方向是由3端向 5端延伸;由于DNA分子是反向平行的,子链是依据碱基互补配对的原则,在DNA聚合酶作用下合成的,其合成方向是从子链5端向 3端延伸。答案: BC12 PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比,主要有两点不同,它们是()A PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA或 RNAB PCR过程不需要DNA聚合酶C PCR

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