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文档简介
1、1课题课题2 月季的花药培养月季的花药培养2花的结构花的结构3一、被子植物的花粉发育一、被子植物的花粉发育雄蕊雄蕊:花丝花丝花药:囊状结构,内有很多花粉粒花药:囊状结构,内有很多花粉粒花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的,因此,花花粉是小孢子母细胞经过减数分裂而形成的,因此,花粉是单倍体的生殖细胞。粉是单倍体的生殖细胞。花粉的发育要经历:四分体时期、单核期、双核期花粉的发育要经历:四分体时期、单核期、双核期4花粉发育过程花粉发育过程减数分裂减数分裂有丝分裂有丝分裂5注意注意:二核花粉粒:成熟的花粉粒中,只含花粉管细胞核和二核花粉粒:成熟的花粉粒中,只含花粉管细胞核和生殖细胞核。(精子在花粉管
2、中形成)生殖细胞核。(精子在花粉管中形成)三核花粉粒:有些植物的花粉,在成熟前,生殖细胞三核花粉粒:有些植物的花粉,在成熟前,生殖细胞进行一次有丝分裂,形成两个精子,这样的花粉在成熟进行一次有丝分裂,形成两个精子,这样的花粉在成熟时,含有一个营养核和两个精子。时,含有一个营养核和两个精子。两个精子和一个营养核的基因型相同。两个精子和一个营养核的基因型相同。1花粉母细胞花粉母细胞4个小孢子个小孢子减分减分有分有分4个花粉管细胞核个花粉管细胞核4个生殖细胞核个生殖细胞核有分有分8个精子个精子6产生花粉植株的两条途径产生花粉植株的两条途径花粉花粉花粉花粉胚状体胚状体愈伤组织愈伤组织从芽从芽从芽从芽生
3、根生根移栽移栽脱分化脱分化分化分化再分再分化化诱导诱导7人工种子人工种子 人工种子是指通过植物组织培养技术获得具有人工种子是指通过植物组织培养技术获得具有胚芽、胚胚芽、胚根、胚轴等结构的植物胚状体根、胚轴等结构的植物胚状体,并且用适当方法将胚状体包并且用适当方法将胚状体包裹起来,用以代替天然种子进行繁殖的一种结构。裹起来,用以代替天然种子进行繁殖的一种结构。 目前研制的人工种子,是由目前研制的人工种子,是由胚状体、胚状体、作为保护性外壳的作为保护性外壳的人工种皮人工种皮和提供发育所需营养的和提供发育所需营养的人工胚乳人工胚乳三部分组成的。三部分组成的。能在一定的条件下萌发生长,形成完整植株。能
4、在一定的条件下萌发生长,形成完整植株。8人工种子的优点人工种子的优点:首先,它首先,它解决解决了有些了有些作物品种繁殖能力差、结子困难作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题。或发芽率低等问题。第二,人工种子可以第二,人工种子可以工业化生产工业化生产,提高农业的自动化,提高农业的自动化程度。程度。第三,第三,人工胚乳中除含有胚状体发育所需的营养物质人工胚乳中除含有胚状体发育所需的营养物质外,还可以添加各种附加成分外,还可以添加各种附加成分,如固氮细菌、防病虫农药、除草剂和植物激素类似物等,有利于幼苗茁壮成长,提高作物产量。第四,第四,用人工种子播种可以节约粮食用人工种子播种可以节约粮食。例
5、如,一个12 L的发酵罐在20 d内生产的胡萝卜胚状体,可以制成1 000万粒人工种子,满足几千公顷农田的种植需要,与天然种子相比,大大节约了粮食。9三、影响花药培养的因素三、影响花药培养的因素1、材料的选择、材料的选择不同植物的诱导成功率很不相同不同植物的诱导成功率很不相同同一亲本:同一亲本:亲本植株的生理状况对诱导成功率也有直接影响亲本植株的生理状况对诱导成功率也有直接影响 (早期的花药比后期的更容易产生花粉植株)(早期的花药比后期的更容易产生花粉植株)选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素因素(在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的
6、时期,花药在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功率最高培养成功率最高。)。)10三、影响花药培养的因素三、影响花药培养的因素 2、培养基的组成、培养基的组成(MS培养基+不同比例的激素) 3、亲本植株的生长条件、材料的低温预、亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度处理以及接种密度等对诱导成功率都有一定影响11影响花药培养的因素影响花药培养的因素一、材料的选择:一、材料的选择: 花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。一般,月季的花药培养时间选在五月初到植株。一般,月季的花药培养时间选在五月初到五月中旬,即月季的初花期。五月中旬
7、,即月季的初花期。 选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素。一般来说,在功率的重要因素。一般来说,在单核期单核期,细胞核,细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功率最由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功率最高。高。 为了挑选到为了挑选到单核期单核期的花药,通常选择的花药,通常选择完全完全未开放的花蕾未开放的花蕾。 12实验操作实验操作一、材料的选取二、材料的消毒三、接种和培养13(一)材料的选取(一)材料的选取 选择花药时,一般通过镜检来确定选择花药时,一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。其中的花粉是否处于适宜的发育期。 最常
8、用的方法有最常用的方法有醋酸洋红法醋酸洋红法。但是,。但是,某些植物的花粉细胞核不易着色,需采某些植物的花粉细胞核不易着色,需采用用焙花青焙花青-铬矾法铬矾法,这种方法能将花粉细,这种方法能将花粉细胞核染成胞核染成蓝黑色蓝黑色。14(二)材料的消毒(二)材料的消毒1、花蕾用、花蕾用V/V为为70%的酒精的酒精浸泡浸泡30秒秒2、无菌水清洗、无菌水清洗3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分4、放入、放入质量分数为质量分数为0.1%的氯化汞的氯化汞溶液中溶液中24分钟(也可分钟(也可质量分数为质量分数为1%的次氯酸的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液钙溶液或饱和漂白粉溶液)5、无
9、菌水冲洗、无菌水冲洗35次次 用于培养花药,实际上多数未熟,由于用于培养花药,实际上多数未熟,由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护,通它的外面有花萼、花瓣或颖片保护,通常处于无菌状态,所以只要将整个花蕾常处于无菌状态,所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。或幼穗消毒即可。15(三)接种和培养(三)接种和培养 灭菌后花蕾,要在灭菌后花蕾,要在无菌条件无菌条件下除去萼片和花下除去萼片和花瓣,并立即将花药接种到培养基上。在剥离花药瓣,并立即将花药接种到培养基上。在剥离花药时,要尽量时,要尽量不损伤花药不损伤花药(否则接种后,容易从受否则接种后,容易从受伤部位产生二倍体的愈伤组织伤部位产生二倍体的愈伤组织)
10、,同时还要彻底),同时还要彻底去除花丝去除花丝,因为与花丝相连的花药不利于愈伤组因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成织或胚状体的形成。 通常每瓶通常每瓶接种花药接种花药7-10个个,温度控制在,温度控制在25左右,左右,不需要光照不需要光照。幼小植株形成后才。幼小植株形成后才需要光照。需要光照。 一般经过一般经过20-30天培养后,会发现花药开裂,天培养后,会发现花药开裂,长出长出愈伤组织或释放出胚状体愈伤组织或释放出胚状体。将愈伤组织及时。将愈伤组织及时转移到分化培养基上,以便进一步分化出再生植转移到分化培养基上,以便进一步分化出再生植株。株。16 如果花药开裂释放出如果花药开裂
11、释放出胚状体胚状体,则,则一个花药内就会产生大量幼小植株,一个花药内就会产生大量幼小植株,必须在花药开裂后尽快将幼小植株必须在花药开裂后尽快将幼小植株分开,分别移植到新的培养基上,分开,分别移植到新的培养基上,否则这些植株将很难分开。否则这些植株将很难分开。 在花药培养中,特别是通过在花药培养中,特别是通过愈伤组织形成的花粉植株,常常会愈伤组织形成的花粉植株,常常会出现染色体倍性的变化。(主要原出现染色体倍性的变化。(主要原因是因是营养核和生殖核融合营养核和生殖核融合造成的。)造成的。)17植物组织培养技术与花药培养技术的异同点植物组织培养技术与花药培养技术的异同点项目项目相同点相同点不同点不
12、同点植物组织培养技植物组织培养技术术离体的植物组织离体的植物组织经脱分化形成愈经脱分化形成愈伤组织,再分化伤组织,再分化成丛芽,诱导出成丛芽,诱导出根,然后进行移根,然后进行移栽。栽。外植体为体细胞,外植体为体细胞,染色体数无需加染色体数无需加倍。倍。花药培养技术花药培养技术取材为花药,培养取材为花药,培养的为单倍体幼苗,的为单倍体幼苗,植株弱小,高度不植株弱小,高度不育,必须用秋水仙育,必须用秋水仙素处理,使染色体素处理,使染色体加倍,恢复正常植加倍,恢复正常植株的染色体数,而株的染色体数,而且为纯种。且为纯种。18练习:小麦高杆(练习:小麦高杆(D)对矮杆()对矮杆(d)为显性,抗锈病()
13、为显性,抗锈病(T)对不抗锈病()对不抗锈病(t)为)为显性,现有高杆抗锈病和矮杆不抗病的两种纯合体,要获得矮杆抗锈病的良种,显性,现有高杆抗锈病和矮杆不抗病的两种纯合体,要获得矮杆抗锈病的良种,可用杂交育种和单倍体育种法,步骤如下:可用杂交育种和单倍体育种法,步骤如下: 高杆抗锈病高杆抗锈病 矮秆不抗锈病矮秆不抗锈病 P DDTT ddtt (一一)F1的基因型表现型的基因型表现型 a各种配子的种类各种配子的种类 a (二)(二)符合要求的单倍体的基因型符合要求的单倍体的基因型 良种的基因型表现型良种的基因型表现型 (三)(三)(1)请在上图横线上填写上基因型、表现型内容。)请在上图横线上填写上基因型、表现型内容。(2)图中(一)(二)(三
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