高效液相色谱仪验证方案

1、编码:高效液相色谱仪验证方案第5页共12页高效液相色谱仪验证文件年有限公司12345678910目录验证方案的起草与审批概述验证目的再验证人员验证支持性文件相关文件检查仪器状态检查运行确认性能确认再确认1验证方案的起草与审批1.1验证方案的起草仪器名称仪器编号验证编号局效液相色谱仪.起草人部 门日期1.2验证方案的审批审核人部 门日 期批准人部 门日期2 概述：设备名称：高效液相色谱仪设备编码：规格型号:制造商：本高效液相色谱仪主要由四元泵、一个柱温箱、一个可变紫外检测器、一个自动进样器和一台.工作站组成，各部分由工作站软件控制。本仪器主要用丁分析原料和成品的有关物质和含量。为验证本仪器性能的

2、稳定性，确认本仪器在检验工作中的准确性，特安排本次验证。3 验证目的：3.1设备安装状态检查：检查设备各部件完整无损，电源稳定可靠，安装环境符合要求， 确认仪器经过校正合格且在有效期内。3.2运行确认：确认仪器的各种控制功能与性能符合要求；在正常运行情况下，确认高 压泵的流速，柱温箱温度控制和自动进样器等符合要求；确认电脑及工作站权限使 用设置与运行，数据处理稳定可靠。3.3性能确认：以检测为例，证明高效液相色谱仪系统适应性， .检测的线性及重复性等性能符合要求4 再验证人员:姓名负责内容所在部门项目负责人，负责验证的组织及实施，各步骤验证内容的确认汇总、撰写验证报告质量监控负责验证项目的操作

3、实施5 验证支持性文件本方案依据下面列出规范的有关条款，结合本公司需求制定。以下规范为有效的最 新文本，设备所提供的性能及参数应能满足以下规范的有关要求。高效液相色谱仪计量检定规程 JJG 705-2002液相色谱仪标准操作程序高效液相色谱仪使用说明书药品GMP指南中国药品检验标准操作规范6相关文件检查6.1 检查确认文件名称存放地点检测人复核人日期6.2相关文件检查结果相关文件检查偏差：建议：相关文件检查结论：相关文件检查确认人：日期：7 仪器状态检查7.1目的：检查仪器各部件及配套设施完好如初，安装环境符合要求，确认仪器经过校正合格且在有效期内。7.2检查确认高效液相色谱仪各设备部件的现场

4、状态，记录各项指标项目要求检查结果仪器外观应有仪器的名称、型号、制 造厂名、产品系列号、出厂 日期等内容的标牌。仪器电路系统仪器电源线、信号线等插接 紧密，各开关、旋钮、按键 等功能正常，指示灯灵敏，编码：高效液相色谱仪验证方案第9页共12页显示器活晰。安装环境应活洁无尘，无易燃、易爆 和腐蚀性气体，排风良好。室温在 530C ,湿度在2080%RH范围内。仪器安装确认仪器应平稳地放在工作台 上，周围无强烈机械震动和 电磁干扰源，仪器接地良 好。电源电压为（22022） V,频率为（50也.5） Hz。进样器活洁，连接密封，安装稳固流动相试剂瓶活洁，安装稳固。电脑活洁，安装稳固。仪器校验校验合

5、格。检测人复核人日期7.3仪器状态检查结果仪器状态检查偏差：建议：仪器状态检查结论：状态检查确认人：日期：8 运行确认：8.1目的：确认仪器的各种控制功能与性能符合要求；在正常运行情况下，确认高压泵 的流速，柱温箱温度等符合要求；确认电脑及化学工作台的权限设置有效、运行稳 定，数据处理稳定可靠。8.2功能测试，按高效液相色谱仪标准操作规程运行设备，记录各项参数。项目要求检查结果结论局压杲在0.12.0mL/min范围内，流速调节自如，压力显示正 常。手动旋开冲洗阀，点击“冲洗”按钮，排气正常，压力显示应 10bar自动进样器连接电源，启动仪器，样品 转盘旋转正常，自动进样器 移动正常。紫外检测

6、器在400200nm范围内，波 长调节自如，电位显小正常。检测人复核人日期8.3电脑与仪器PC端控制工作台的运行权限及功能确认项 目要 求检查结果电脑使用权限接通计算机电源，启动计算 机后，计算机出现选择用界 面；选定用户后，需输入密 码后才能登录。仪器工作站软件使用权限用户启动工作站后，需要输 入账户和密码后才能登录。检测人复核人日期8.4 高压泵流量稳定性测试（常用流量范围为0.51.5mL/min）将仪器的输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以水为流动相，设定不同的 流量，待流速稳定后，在流动相排出口用事先活洗称重过的10mL容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，准确收集至规定的时间，称

7、重，计算实际流量。计算其 Ss应小丁 2%计算公式：Fm=（W2-W1）/ （ p ） tSs = （Fm-Fs）/Fs 100%其中：Fm为流量实测值（ml/min）, Fs为流量设定值（ml/min）,W2为容量瓶加流动相的重量（g）, W1为容量瓶的重量（g）,P为实验温度下流动相的密度（g/cm3）, E收集流动相的时间（min）。仪器/型号/编号/有效期/计量特性：1、天平/2、温度计/水温： C水密度： g/cm3泵设定值Fs水重量（g）测定值Fm平均值检查结果结论A泵1.0 ml/minB1.0 ml/minC1.0 ml/minD泵1.0 ml/min检测人复核人日期8.5柱温

8、箱温度设定值误差 Ts和控温稳定性Tc方法：将数字温度计探头固定在柱温箱内，开启柱温箱，设定温度为35C,待温度稳定后，记下温度计读数并开始计时，以后每隔10min记录一次读数，共计7次，求出平均值。 Ts不超过 坦C , Tc不超过1 C。计算： Ts为平均值与设定值之差，Tc为7次读数中最大值与最小值之差。仪器/型号/编号/有效期/计量特性：温度巡检仪/各时间点温度平均值 TsTc结论0min10min20min30min40min50min60min检测人复核人日期8.6基线漂移和基线噪声的测定将仪器的各部分连接好，紫外检测器波长调到254nm，流动相为100%甲醇或10%甲醇溶液，流速

9、为1.0ml/min,开机，待基线稳定后，记录基线，在 20分钟的基线上， 计算基线漂移和噪声。要求检查结果结论基线漂移基线噪声基线漂移基线噪声< 5 X -30AU/h)-4< 5 X f0AU)编码:高效液相色谱仪验证方案第13页共12页检测人复核人日期8.7紫外检测器波长准确度和重复性方法：将检测器通电预热稳定后，用注射器将紫外波长标准溶液（标准波长为235nm , 257nm, 313nm和350nm）从检测器入口注入样品池中冲洗，并将池充满。启 动色谱工作站分析模块，将检测器波长调到200nm400nm范围，进行色谱扫描，每个波长重复测量3次，记录波峰（或波谷）对应的波长

10、，并与标准波长比较。紫外波长标准溶液配制：称取基准重铭酸钾约12mg,置 200mL量瓶中，用 0.005mol/L硫酸液溶解并稀释至200mL。波长准确度（不超过史nm）:最高（或最低）色谱峰对应的波长与标准溶液波长之波长重复性（优丁 2nm）:每个波长重复测量3次，其中最大值与最小值之差。设定值Fs扫描特征峰检查结果结论123平均值波长准确度波长重复性235nm257nm313nm350nm检测人复核人日期8.8运行确认结果运行确认偏差:建议：运行确认结论:日期:运行检查确认人:9 性能确认9.1目的：以.检测为例，证明高效液相色谱仪系统适应性， 检测的线性及重复性等性能符合要求。9.2

11、系统适应性用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以。为流动相；柱温为35C ,检 测波长为。nm；取供试品溶液，精密量取10ul,注入液相色谱仪，与供试品溶液色谱图相比，出峰次序依次为 、。理论板数按计算应不低丁 1500,各 色谱峰的分离度应符合要求。9.3检测线性测试取样品（）约0.25g,用流动相溶解并定容至50 ml,摇匀；为溶液A。分别准确吸取溶液A 1ml, 2ml, 4ml, 6ml ,8ml 丁 5个50ml的容量瓶中，加流动相至刻度， 摇匀。溶液 II 相当丁每 ml 约含.100ug, 200ug, 400ug, 600ug, 800ug。取 10注入 液相色谱仪，记录图谱。考查

12、线性关系。.的线性关系浓度 C（mg/ml）12468峰面积T3线性方程相关系数示意图:检测结果小结：9.4检测重复性测试称取样品（）约0.2g，称定6份，用水溶解并定容至50 ml,再精密吸取5ml用流动相溶至50ml，摇匀；取10 注入液相色谱仪，记录图谱。计算其他杂质以及杂质总量的白分比。重复性测定序号123456平均值RSD (%)其他杂质重复性测定序号123456其他杂质平均值RSD (%)杂质总量重复性测定序号123456杂质总量%平均值RSD (%)检测结果小结:9.5系统适应性、线性测试和重复性测试检测结果表项目要求检查结果结论峰理论塔板数应 A 1500分峰应 A 1.5离峰应 A