实验六细菌荚膜染色法PPT学习教案

1、会计学1实验六细菌荚膜染色法实验六细菌荚膜染色法第1页/共19页第2页/共19页v菌种菌种褐球固氮菌、胶质芽孢杆菌褐球固氮菌、胶质芽孢杆菌v试剂试剂绘图墨水绘图墨水1%甲基紫水溶液甲基紫水溶液6%葡萄糖水溶液葡萄糖水溶液20%硫酸铜水溶液硫酸铜水溶液甲醇甲醇香柏油香柏油二甲苯二甲苯v仪器和用具仪器和用具载玻片载玻片盖玻片盖玻片滤纸滤纸显微镜显微镜镜头纸镜头纸第3页/共19页第4页/共19页第5页/共19页1、滴绘图墨水、滴绘图墨水 2、制备混合液、制备混合液绘图墨水绘图墨水滴滴1滴绘图墨水在载玻滴绘图墨水在载玻片中央片中央挑取少量菌苔挑取少量菌苔与墨水混与墨水混合均匀涂布合均匀涂布第6页/共1

2、9页在盖玻片上放一张滤纸，轻轻按压吸干多余混合液在盖玻片上放一张滤纸，轻轻按压吸干多余混合液1、加盖玻片、加盖玻片将盖玻片一端浸泡在细菌墨水混合液中缓缓盖上盖玻片将盖玻片一端浸泡在细菌墨水混合液中缓缓盖上盖玻片2、吸去多余液体、吸去多余液体勿留气泡勿留气泡第7页/共19页1、镜检、镜检用低倍镜高倍镜观察用低倍镜高倍镜观察制片置显微镜载物台上制片置显微镜载物台上2、结果：、结果： 背景灰色，菌体较暗，菌体周围荚膜呈现明亮透明圈。背景灰色，菌体较暗，菌体周围荚膜呈现明亮透明圈。第8页/共19页第9页/共19页1、滴生理盐水、滴生理盐水 2、涂片、涂片6%葡萄糖葡萄糖在载玻片一在载玻片一端端 滴一滴

3、滴一滴6%葡萄糖水葡萄糖水挑取少量菌苔挑取少量菌苔再加一环墨水再加一环墨水,混合均匀混合均匀第10页/共19页1、先将推片一、先将推片一端放在混合液上端放在混合液上 2、将推片向另、将推片向另一端平行滑动一端平行滑动 3、使混合液、使混合液均匀铺成薄层均匀铺成薄层 4、干燥、干燥室温自然晾干室温自然晾干第11页/共19页甲醇固定，自然干燥甲醇固定，自然干燥 甲醇甲醇滴甲醇浸没涂片滴甲醇浸没涂片1分钟分钟倾去甲醇，室温自然干燥倾去甲醇，室温自然干燥注意：注意：固定及干燥均不能加热和用热风吹干，因为荚膜含水量高，加热会使其失水变形。固定及干燥均不能加热和用热风吹干，因为荚膜含水量高，加热会使其失水

4、变形。同时，菌体失水收缩，会与周围染料脱离产生透明区，导致不产荚膜的细菌被误认为有荚膜。同时，菌体失水收缩，会与周围染料脱离产生透明区，导致不产荚膜的细菌被误认为有荚膜。第12页/共19页1、滴甲基紫染液、滴甲基紫染液2、水洗、水洗不要直接冲菌膜不要直接冲菌膜甲基紫染液甲基紫染液甲基紫染液染色甲基紫染液染色1-2分钟分钟3、自然干燥、自然干燥第13页/共19页1、镜检、镜检用低倍镜高倍镜观察用低倍镜高倍镜观察制片置显微镜载物台上制片置显微镜载物台上2、结果：、结果： 背景灰色，菌体紫色，菌体周围荚膜呈现明亮透明圈。背景灰色，菌体紫色，菌体周围荚膜呈现明亮透明圈。第14页/共19页第15页/共19页生理盐水生理盐水 1、滴生理盐水、滴生理盐水 挑取少量菌苔挑取少量菌苔与生理盐水混匀与生理盐水混匀均匀涂布均匀涂布2、涂片、涂片滴半滴生理滴半滴生理盐水在载玻盐水在载玻片中央片中央 3、干燥固定、干燥固定室温自然晾干室温自然晾干第16页/共19页1%结晶紫染液结晶紫染液1、滴孔结晶紫染液、滴孔结晶紫染液滴结晶紫染滴结晶紫染色色2分钟分钟3、脱色、脱色20%CuSO4水溶液水溶液第17页/共19页1、镜检、镜检用低倍镜高倍镜观察用低倍镜高倍镜观察制片置显微镜