不同形态、用量培养基对黄皮洋葱试管苗生长的影响

1、不同形态、用量培养基对黄皮洋葱试管苗生长的影响 摘 要：以黄皮洋葱鳞茎为试材，以ms+ba 0.4 mg/l+naa 0.1 mg/l为基础，white+ba 0.4 mg/l+naa 0.1 mg/l培养基为对照，研究了培养基的形态（固态和液态）及用量对洋葱试管苗生长的影响。试验结果表明，ms液体培养基优于ms固体培养基，其用量以50 ml三角瓶中放15 ml培养液最佳。 关键词：洋葱；培养基；试管苗 中图分类号：s633.2 文献标识码：a 文章编号：1001-3547（2013）16-0041-03 洋葱学名allium cepa l.，别名葱头、圆葱、胡葱、玉葱，是百合科葱属草本植物，

2、具有极高的营养价值和药用价值，它不仅能够改善食物风味，而且具有杀菌、抗肿瘤、降血压、抗血栓及动脉硬化等生理功能，耐寒，喜温，适应性强，产量高，易栽培，耐贮运且供应期长，对调节淡季蔬菜供应具有重要作用1。茎尖培养是进行洋葱脱毒、生产无毒种苗、恢复优良种性的有效手段2，3。姜璐琰等4研究了洋葱胚状体的诱导及再生系统的建立。徐启江等5对分蘖洋葱试管鳞茎微繁技术进行了研究。但对洋葱鳞茎快繁环节中培养基形态和用量的研究鲜有报道，特进行了此次试验，以期获得洋葱鳞茎的最佳培养体系。 1 材料与方法 1.1 试验材料 试验材料为黄皮洋葱鳞茎，购自甘肃省张掖市甘州区某蔬菜超市；50 ml三角瓶。 1.2 试验处

3、理 设3组试验，每组试验设4个处理。第一组ms固体培养基不同用量试验，处理a1为50 ml三角瓶放入培养基10 ml，处理b1为15 ml，处理c1为20 ml，处理d1为25 ml。第二组ms液体培养基不同用量试验，处理a2为50 ml三角瓶放入培养液10 ml，处理b2为15 ml，处理c2为20 ml，处理d2为25 ml。第三组white固体培养基不同用量试验，处理a3为50 ml三角瓶放入培养基10 ml，处理b3为15 ml，处理c3为20 ml，处理d3为25 ml。 1.3 试验方法 调整培养基ph值至5.8，消毒灭菌后于无菌条件下用茎盘切割方式切取0.30.5 mm洋葱鳞茎为

4、外植体，接种到ms+ba 0.4 mg/l+naa 0.1 mg/l培养基（固体或液体）和white+ba 0.4 mg/l+naa 0.1 mg/l培养基（固体）上，鳞茎每一处理接种10瓶，每瓶接种6个切段，然后放置在相同条件下培养。培养10、20、30 d时分别随机抽取每处理5瓶30株调查，观察植株生长发育动态，记载叶片数、茎节数、株高、发根数、小苗长势、叶片状态、小苗状态等。 无菌材料的获得、接种 剥去洋葱葱皮，用自来水冲洗10 min左右，采用茎盘切割的方式切取外层鳞茎上半部0.30.5 mm为外植体，将外植体放入75%酒精消毒灭菌30 s，再放入0.1% hgcl2消毒灭菌10 mi

5、n，用无菌水认真冲洗4次。在超净工作台接种到培养基上，进行无菌培养。 培养条件 培养温度（25±2），光照强度 2 0003 000 lx，光照培养16 h，暗培养8 h。 2 结果与分析 2.1 ms固体培养基不同用量对试管苗生长的影响 由图1可知，ms固体培养基不同用量对洋葱试管苗的生长影响比较明显，鳞茎在ms固体培养基上前期生长无差异，叶片数、茎节数、株高、发根数都基本一致；后期试管苗差异很大，从1020 ml范围内试管苗叶片数、茎节数、株高、发根数都随培养基用量的增加而增加，20 ml时达到最大值， 20 ml以后试管苗生长无明显变化。表明ms固体培养基用量过多会超过洋葱试管

6、苗生长所需的营养而造成浪费。由此可见，50 ml三角瓶放入20 ml是ms固体培养基的最佳用量。 2.2 ms液体培养基不同用量对试管苗生长的影响 由图2可知，随着培养液用量的增加，洋葱试管苗叶片数、茎节数、发根数、株高先增大后逐渐减小，至15 ml时洋葱试管苗叶片数、茎节数、发根数、株高达到最大值；20 ml以上时洋葱试管苗的各项指标逐渐减小。表明液体培养基用量过多会使接种的切段浸没于其中，因缺氧而不易发芽，导致试管苗生长势弱。因此，50 ml三角瓶放入15 ml是ms液体培养基的最佳用量。 2.3 white固体培养基不同用量对试管苗生长的影响 由图3可知，鳞茎在white固体培养基上生长

7、差异较小，随着培养基用量的增加，叶片数、茎节数、株高、发根数都随着培养基用量的增加而增加，25 ml时达到最大值。white固体培养基为低浓度盐培养基，其营养元素与前两组基本相同，ph值和培养条件也相同，至25 ml时洋葱试管苗的各项指标达最大值，这与营养元素的浓度有关，因此，50 ml三角瓶放入25 ml是white固体培养基的最佳用量。 2.4 不同形态、用量培养基对洋葱试管苗生长的影响 由图4可知，b2处理（ms液体培养基）明显优于c1处理（ms固体培养基）和d3处理（white固体培养基），其表现在叶片数多、植株高、发根数多、茎粗壮、长势强、苗壮、发芽生长快。同时处理b2培养成苗（达到

8、46片有效叶的植株称为成苗株）时间要比处理c1和处理d3提早5 d左右。因此50 ml三角瓶放入15 ml ms液体培养液是洋葱鳞茎快繁的最佳用量及方式。 3 小结与讨论 phillips等6在bds+毒莠定0.75 mg/l+ba 2 mg/l固体培养基上诱导出愈伤组织和体细胞胚。fridborg7在ms+naa 1 mg/l+kt 1.5 mg/l固体培养基上把洋葱鳞片直接诱导成芽，此试验与本试验的ms固体培养基相同，均能获得小植株；不同之处是培养基激素种类及其配比和外植体不同，表现为对洋葱试管苗生长的影响效果不同。徐启江等5对分蘖洋葱试管鳞茎微繁技术进行研究，以洋葱鳞茎茎尖为外植体，以2

9、5 ml ms+ba 0.4 mg/l+naa 0.1 mg/l固体培养基为起始培养基，培养40 d后获得试管苗，再诱导获得微鳞茎，此试验与本试验的不同之处在于培养基的形态和外植体的选取，本试验选用洋葱外层鳞茎上半部，可能由于不同形态培养基对洋葱试管苗的生长影响不同。本试验得出液体培养基有利于洋葱试管苗的生长。 综上所述，在洋葱鳞茎快繁阶段，ms液体培养基优于ms固体培养基，其用量以50 ml三角瓶中放15 ml培养液最佳。但洋葱鳞茎快繁过程中易产生遗传性变异，特别是染色体倍性的变化有待进一步研究。 参考文献 1 郭玉华，李钰金，殷诗强.洋葱食品的研究进展j.中国调味品，2009，34（11）

10、：35-37. 2 徐启江，陈典，张云修.分蘖洋葱茎尖培养脱毒苗技术研究j.北农林科技大学学报：自然科学版，2002（2）：6-11. 3 陈典，徐启江.分蘖洋葱茎尖愈伤组织诱导及植株再生j.园艺学报，2001，28（4）：359-360. 4 姜璐琰，杨建平，张松，等.洋葱组织培养研究进展j.山东农业大学学报：自然科学版，2003，34（2）：299-302. 5 徐启江，杨守志，池春玉，等.分蘖洋葱试管鳞茎微繁技术研究j.植物学学报，2003，20（1）：80-84. 6 phillips g c， luyten j. effects of picloram and other auxious ononion tissue culturesj. j amer soc hort sci， 1987， 108